基于VIGS基因沉默体系的换锦花LsMYBs基因功能研究

发布时间：2021-02-19 01:29

　　换锦花（Lycoris sprengeri）是石蒜属（Lycoris）多年生球根类非模式植物,花色多为红蓝复色花,观赏价值极高,利用基因工程技术探讨换锦花花色形成机制对换锦花新品种选育具有重要的指导意义。本研究采用无缝克隆技术构建换锦花LsMYBs病毒介导的基因沉默（virus-induced gene silencing,VIGS）载体,利用真空渗透法侵染换锦花花苞,并对侵染后换锦花花瓣花色苷含量和花色形成相关基因的表达进行检测,建立换锦花VIGS技术体系并初步分析LsMYBs的基因功能。研究结果表明LsMYBs沉默后换锦花花瓣LsMYBs基因的表达明显下降,而花瓣尖端的蓝色加深,花色苷含量明显增加;VIGS载体的插入片段为400 bp时诱导基因沉默后LsMYBs的表达量相对稳定,是未沉默的LsMYBs基因表达量的1/2,而插入cDNA全长片段基因沉默后LsMYBs表达不稳定。LsMYB4基因沉默后花色苷形成过程中结构基因（早期形成基因（early biosynthesis gene, EBG）和晚期形成基因（late biosynthesis gene, LBG））查尔酮合成酶基因... 

【文章来源】：农业生物技术学报. 2020,28(06)北大核心

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验材料
    1.2 实验方法
        1.2.1 LsMYBs序列分析
        1.2.2 LsMYBs基因克隆和VIGS载体构建
    1.3 换锦花花瓣VIGS体系的建立
    1.4 LsMYB4调控花色合成相关基因的表达
    1.5 换锦花花瓣花色苷的测定
2 结果与分析
    2.1 LsMYB4和LsMYB5序列分析
    2.2 LsMYBs插入片段的克隆和VIGS载体构建
    2.3 LsMYBs基因VIGS沉默后LsMYBs基因的表达和换锦花花瓣花色苷含量的变化
        2.3.1 LsMYBs基因VIGS沉默后对换锦花花瓣颜色和LsMYBs基因表达的影响
        2.3.2 LsMYBs基因沉默后换锦花花瓣花色苷含量的变化
        2.3.3 LsMYBs基因沉默后对花色苷代谢相关基因的表达分析
3 讨论
    3.1 VIGS技术是研究植物基因功能的有力工具
    3.2 LsMYB4和LsMYB5为转录抑制因子
4 结论


【参考文献】：
期刊论文
[1]换锦花LsMYB5基因的克隆与表达分析[J]. 侯朔,高燕会,童再康.  农业生物技术学报. 2019(12)
[2]苹果MdMYB32通过自身EAR抑制序列抑制花青苷的生物合成[J]. 许海峰,杨官显,王意程,姜生辉,王楠,陈学森.  中国农业科学. 2018(24)
[3]应用于茄子的病毒诱导的基因沉默体系的建立与优化[J]. 刘军,杨艳,周晓慧,姜悬云,鲍生有,庄勇.  江苏农业学报. 2018(04)
[4]植物花青素生物合成与调控研究进展[J]. 梁立军,杨祎辰,王二欢,邢丙聪,梁宗锁.  安徽农业科学. 2018(21)
[5]基因功能研究工具VIGS在植物中的应用[J]. 李志强,曹延婷,郭晓龙,徐敏.  基因组学与应用生物学. 2018(02)
[6]基于牡丹类黄酮糖基转移酶基因建立VIGS技术体系[J]. 舒庆艳,朱瑾,门思琦,郝青,王倩玉,刘政安,曾秀丽,王亮生.  园艺学报. 2018(01)
[7]VIGS实验技术体系在月季中的应用及优化[J]. 丁榕,梁晶,赵和文,张克中,崔金腾.  中国农学通报. 2018(03)
[8]非洲菊花瓣瞬时表达和病毒诱导的基因沉默（VIGS）系统的建立[J]. 唐宜,李凌飞,王小菁.  植物生理学报. 2017(03)
[9]利用VIGS技术研究草莓FaMYB5的功能[J]. 王玲,汤浩茹,王小蓉,陈清,江雷雨,林源秀.  园艺学报. 2017(01)
[10]VIGS载体在蔬菜作物中的应用研究进展[J]. 季娜娜,闵德栋,邵淑君,李富军,张新华.  植物生理学报. 2016(06)



本文编号：3040391