桔小实蝇ABC转运蛋白基因鉴定与表达模式分析

发布时间：2021-02-21 11:35

　　桔小实蝇Bactrocera dorsalis（Hendel）属于双翅目Dipetera,实蝇Trypetidae,寡鬃实蝇亚科Dacinae,果实蝇属Bactrocera Macquart,是一种重要的果蔬害虫。目前,化学防治仍是防控桔小实蝇的主要手段,但由于长期不合理地大量施用化学药剂,导致桔小实蝇对常用化学药剂产生了较高水平的抗性。腺苷三磷酸结合盒转运蛋白（ATP-binding cassette transporter,ABC转运蛋白）作为一种外排泵,是一种可利用三磷酸腺苷（ATP）进而促使物质逆浓度梯度跨膜转运的膜蛋白。ABC转运蛋白能够降低胞内外源物质的浓度,从而导致昆虫对药剂的敏感性下降。迄今,对桔小实蝇抗药性机制的研究主要集中于初级代谢和次级代谢,而对转运代谢研究甚少。据此,本学位论文基于桔小实蝇基因组和转录组数据,鉴定桔小实蝇ABC转运蛋白基因,并通过定量表达、RNAi等手段解析桔小实蝇ABC转运蛋白在杀虫剂转运中的功能,研究结果对于深入阐明桔小实蝇抗药性机制具有重要的意义。本学位论文的主要研究结果如下:基于桔小实蝇基因组和转录组数据,鉴定出47个ABC转运蛋白基因。... 

【文章来源】：西南大学重庆市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：64 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
Abstract
文献综述
    1 桔小实蝇抗性发生现状
    2 杀虫剂抗性研究进展
    3 ABC转运蛋白基因及其介导的抗药性
    4 RNA干扰技术在基因功能研究中的应用
引言
    1 论文的研究背景及意义
    2 论文的研究思路与大致框架
第一章 桔小实蝇ABC转运蛋白基因的鉴定及分析
    1 材料与方法
        1.1 供试虫源
        1.2 主要仪器
        1.3 基因鉴定以及系统发育分析
    2 结论与分析
        2.1 桔小实蝇ABC转运蛋白序列鉴定
        2.2 桔小实蝇ABC转运蛋白基因的系统发育分析
    3 小结
第二章 桔小实蝇ABC转运蛋白基因在成虫不同组织间的表达模式解析
    1 材料与方法
        1.1 供试虫源
        1.2 主要仪器以及试剂
        1.3 桔小实蝇整虫及不同体段组织RNA的提取及cDNA的合成
        1.4 PCR扩增
        1.5 桔小实蝇ABC转运蛋白基因在成虫不同组织间的表达模式分析
        1.6 不同组织转录组的比较分析
    2 结论与分析
    3 小结
第三章 桔小实蝇ABC转运蛋白基因应对药剂处理的表达模式解析
    1 材料与方法
        1.1 供试虫源
        1.2 主要仪器以及试剂
        1.3 几种药剂对桔小实蝇生物活性的测定
        1.4 桔小实蝇整虫及组织总RNA的提取以及cDNA的合成
        1.5 桔小实蝇ABC转运蛋白基因应对药剂处理后的表达模式分析
        1.6 PCR扩增
        1.7 生物信息学分析
    2 结论与分析
        2.1 桔小实蝇ABC转运蛋白基因应对药剂剂量效应的表达模式分析
        2.2 桔小实蝇ABC转运蛋白基因响应药剂胁迫的时间效应
    3 小结
第四章 基于RNAi技术的桔小实蝇ABC转运蛋白基因的功能分析
    1 材料与方法
        1.1 供试虫源
        1.2 主要仪器以及试剂
        1.3 dsRNA的引物合成
        1.4 dsRNA的制备
        1.5 显微注射法
        1.6 沉默效率以及马拉硫磷对桔小实蝇生物活性的测定
        1.7 实时荧光定量PCR
        1.8 生物信息学分析
    2 结论与分析
        2.1 沉默效率检测
        2.2 马拉硫磷对桔小实蝇生物活性的测定结果
    3 小结
第五章 主要结果、结论与研究展望
    1 主要结果与结论
        1.1 桔小实蝇ABC转运蛋白基因的鉴定与分析
        1.2 桔小实蝇ABC转运蛋白基因在成虫不同组织间的表达模式分析
        1.3 桔小实蝇ABC转运蛋白基因响应药剂处理后表达模式分析
        1.4 基于RNAi技术的桔小实蝇BdABCB7在马拉硫磷药剂代谢中的功能研究
    2 研究展望
参考文献
在读期间发表的论文
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]桔小实蝇研究进展[J]. 张彬,刘映红,赵岚岚,周旭.  中国农学通报. 2008(11)
[2]华南地区桔小实蝇田间种群抗药性的监测[J]. 章玉苹,曾玲,陆永跃,梁广文.  华中农业大学学报. 2008(04)
[3]华南地区桔小实蝇抗药性动态监测[J]. 章玉苹,曾玲,陆永跃,梁广文.  华南农业大学学报. 2007(03)
[4]桔小实蝇生物学特性[J]. 张清源,林振基,刘金耀,陈华忠,高泉准,孙国坤,洪赞侨,孙德华,陈加福.  华东昆虫学报. 1998(02)
[5]桔小实蝇形态特征及其生活习性[J]. 梁广勤.  江西农业大学学报. 1985(01)

博士论文
[1]桔小实蝇细胞色素P450酶系及其在马拉硫磷抗性中的作用[D]. 黄勇.西南大学 2016

硕士论文
[1]α羧酸酯酶介导桔小实蝇马拉硫磷抗性的分子机理研究[D]. 汪荦荦.西南大学 2015



本文编号：3044292