稻瘟病抗性基因Pi63的启动子调控功能分析及其同源基因抗性的初步研究

发布时间：2021-02-23 16:17

　　稻瘟病是水稻最严重的病害之一,利用宿主抗性进行品种的抗病遗传改良为稻瘟病提供了经济有效和环境友好的解决办法。但稻瘟病病菌的群体变异频繁,导致水稻单个抗性基因品种的抗病效果在短时间内减弱甚至丧失。因此,需要进一步的研究稻瘟病抗性机制,开发新的广谱抗性基因,为水稻抗性育种提供新的资源。本研究中的稻瘟病抗性基因Pi63具有良好的田间抗性,前期实验结果表明Pi63的表达量在抗性品种中很高,且抗性与其表达量成正相关,推测这一特性与启动子的调节和表达模式密切相关。前期研究利用生物信息学软件分析了Pi63启动子区域的顺式作用元件,根据预测的顺式作用元件的分布位置不同,分段构建了4个启动子缺失片段。本研究并将上述构建体分别连接GUS基因和Pi63全长基因进行遗传转化分析其启动子的表达特性及对抗病的影响。此外,Pi63位于水稻4号染色体31 Mb区域内,是这个区域内被克隆的第一个基因。为研究Pi63的进化机制,发掘抗性资源,本研究在收集的栽培稻和野生稻品种里克隆了Pi63的同源基因,并对同源基因的转基因植株进行了抗病分析。本研究取得的结果如下:⑴将上述缺失体连接Pi63全长基因转入植物双元表达载体pMD... 

【文章来源】：中南民族大学湖北省

【文章页数】：69 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

不同缺失体的目的片段扩增电泳检测Fig2.1Theelectrophoresisdetectionofdifferentfragmentamplification

c d图 2.2 启动子缺失载体阳性鉴定电泳检测Fig 2.2 The clony PCR of vector construction DL；a: Pi63 5'u-p0；b:Pi63 5'u-p1；c:Pi63 5'u-p2；d:P转化达载体以日本晴为受体材料进行农杆菌介导的共培养，筛选，分化，生根，炼苗 6 个阶段得到

图 2.3 水稻遗传转化部分过程示意图.3 Schematic diagram of rice genetic transformation p代植株的阳性鉴定Z-P0 共计转化 60 瓶愈伤，得到 pCAMBIA1391Z-P1 共计转化 40 瓶愈伤，得到 pCAM鉴定并未得到的 pCAMBIA1391Z-P2 转基因；pCAMBIA1391Z-P3 共计转化 50 瓶愈伤 转基因苗 14 棵（图 2.4）。

【参考文献】：
期刊论文
[1]水稻稻瘟病抗病基因Pi63顺式作用元件的载体构建[J]. 梁华兵,王晓婉,胡晓岚,赵峰,张成国,韩淑慧,姚富城,徐鑫.  中国农学通报. 2015(30)
[2]实时定量PCR鉴定转基因作物纯合体[J]. 张丽,刘丽丽,梁晓声,王海英.  中南民族大学学报(自然科学版). 2015(01)
[3]水稻稻瘟病抗性基因研究进展[J]. 李婷,王建龙.  作物研究. 2012(06)
[4]水稻稻瘟病及其综合防治措施[J]. 张俊奇.  安徽农学通报(下半月刊). 2012(08)

硕士论文
[1]SA和MeJA双重诱导的GT基因启动子5′-缺失体构建及其功能研究[D]. 李静.中南民族大学 2007



本文编号：3047872