miR-382-3p靶向RASA1基因调控骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡

发布时间：2021-02-23 17:04

　　目的:探讨mi R-382-3p对骨关节炎软骨细胞增殖和凋亡的影响及其机制。方法:用100 ng/mL的脂多糖（LPS）处理软骨细胞,记为LPS组,以正常培养的软骨细胞作为正常对照（NC）组。mi R-NC、mi R-382-3p、anti-miR-NC、anti-miR-382-3p转染至软骨细胞中,记为mi R-NC组、mi R-382-3p组、anti-miR-NC组、anti-miR-382-3p组;将mi R-NC、mi R-382-3p、si-NC、si-RASA1转染至软骨细胞后再用100 ng/mL的LPS处理,记为mi R-NC+LPS组、mi R-382-3p+LPS组、si-NC+LPS组、si-RASA1+LPS组;将mi R-382-3p分别与pcDNA-NC、pcDNA-RASA1共转染至软骨细胞后再用100 ng/mL的LPS处理,记为mi R-382-3p+pcDNA-NC+LPS组、mi R-382-3p+pcDNA-RASA1+LPS组。实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测mi R-382-3p和Ras p21蛋白活化因子1（RASA1）m RN... 

【文章来源】：现代生物医学进展. 2020,20(13)

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
前言
1 材料与方法
    1.1 材料
    1.2 方法
        1.2.1 软骨细胞的分离培养
        1.2.2 细胞处理与分组
        1.2.3 实时荧光定量PCR（Real-time quantitative PCR,RT-qPCR）检测mi R-382-3p和RASA1 m RNA表达水平
        1.2.4 蛋白质印迹（Western blot）法检测RASA1、CyclinD1、Cleaved-caspase-3蛋白表达
        1.2.5 MTT检测细胞存活率
        1.2.6流式细胞术检测细胞凋亡
        1.2.7 荧光素酶报告实验检测mi R-382-3p和RASA1的靶向关系
        1.2.8 pulldown实验
        1.2.9 统计学分析
2 结果
    2.1 在LPS诱导的软骨细胞，mi R-382-3p和RASA1表达情况
    2.2 过表达mi R-382-3p对LPS处理的软骨细胞增殖和凋亡的影响
    2.3 敲减RASA1对LPS处理的软骨细胞增殖和凋亡的影响
    2.4 mi R-382-3p靶向RASA1
    2.5 高表达RASA1可以部分逆转mi R-382-3p高表达对LPS处理的软骨细胞增殖和凋亡的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]基于Ras-Raf-MEK1/2-ERK1/2信号通路探究狗脊多糖延缓大鼠椎间盘软骨细胞退变[J]. 付长龙,梅阳阳,李民,叶锦霞,郑春松,吴广文.  中华中医药杂志. 2019(07)
[2]软骨细胞衰老在骨关节炎中的作用[J]. 焦丹丽,邢秋娟.  老年医学与保健. 2019(03)
[3]膝骨性关节炎手术治疗的研究进展[J]. 李爽,王伟.  中国骨与关节损伤杂志. 2019(06)
[4]miRNA与骨关节炎病理发展过程的相关性[J]. 王继成,易智.  中国组织工程研究. 2019(24)
[5]川芎嗪抑制NF-κB P65磷酸化对LPS诱导的骨关节炎软骨细胞凋亡和炎症反应的调节作用[J]. 朱海泉,刘子敏,孟祥圣,孙晓,王黎明.  中国免疫学杂志. 2019(02)
[6]miRNAs对骨关节炎调控的研究进展[J]. 赵园园,代思明,张跃,张志毅.  中华医学杂志. 2019 (03)
[7]miRNA与骨关节炎发生发展关系的研究进展[J]. 毛丹,韦纪英,吴明松.  山东医药. 2018(37)
[8]微小RNA-382-5p靶向作用核因子蛋白90对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响[J]. 韩听锋,李春燕,侯青霞,岳青芬.  医学研究杂志. 2018(09)
[9]miR-200b-3p与DNA甲基转移酶-3a在骨关节炎软骨细胞中的表达及作用机制[J]. 商安全,王微微,陆文英,胡丽庆,李冬.  临床检验杂志. 2018(08)
[10]电针抑制Ras/Raf/MEK1/2/ERK1/2信号通路介导骨关节炎软骨超微结构退变[J]. 付长龙,林洁,赵忠胜,吴广文,洪秀娥,郑春松,林秋英,戴一琛,吴明霞.  中国组织工程研究. 2017(32)

博士论文
[1]软骨细胞代谢影响骨关节炎的作用和机制研究[D]. 俞冬升.浙江大学 2017

硕士论文
[1]miR-223靶向RASA1影响结直肠癌的发生发展的研究[D]. 马玉涛.南京大学 2013



本文编号：3047927