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小麦胚发育过程特征特性及再生相关基因TaDCC1-2B的克隆与功能分析

发布时间:2021-03-02 15:42
  现阶段小麦再生效率低,遗传转化相对困难,已经成为制约小麦功能基因组研究的主要障碍之一。高效的组织培养再生体系对于推进基因工程改良小麦品种具有重要意义。小麦再生能力与基因型密切相关。为了探究小麦胚发育过程中的部分理化指标和显微结构差异,以不同小麦基因型为材料,测定了花后16天和30天小麦胚中的糖类(葡萄糖、蔗糖)、激素(细胞分裂素、赤霉素)和活性氧(过氧化氢、超氧阴离子)的含量,并对胚内部结构进行观察。同时克隆一个与小麦再生相关的硫氧还蛋白基因TaDCC1-2B,对其进行生物信息学分析,并利用农杆菌介导法将TaDCC1-2B基因转入拟南芥硫氧还蛋白突变体dcc1进行功能分析,取得以下主要研究结果:1.测定不同胚性愈伤率的小麦花后16天和30天小麦胚中的糖类、激素和活性氧的含量,结果显示较高胚性愈伤率基因型小麦花后30天麦胚的赤霉素含量显著大于低胚性愈伤率型,而花后16天赤霉素含量无显著差异,其他生化指标在不同发育阶段同一时期差异不显著。推测小麦胚发育晚期的赤霉素含量与胚性愈伤率具有一定的相关性。在对胚内部结构观察中,并未发现在两个发育阶段同一时期不同小麦胚之间存在明显差异。2.克隆获得的... 

【文章来源】:西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:55 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

小麦胚发育过程特征特性及再生相关基因TaDCC1-2B的克隆与功能分析


中国小麦面积、单产和总产变化趋势(1949-2016)(何中虎等2018)

硫氧还蛋白,二硫键,反应机理


1.2.3 硫氧还蛋白的分类分布Trx 由多基因编码,分布在不同种类生物、不同类细胞乃至同类细胞不同位置的Trx,其种类都会产生一定差异性(王全富等 2015)。植物体内经典的硫氧还蛋白根据一级结构可分为 6 个类型:f、m、x、y、h 和 o,包含有 WCGPC 或者 WCPPC 基序。其中 f、m、x 和 y 型主要位于叶绿体中,o 型位于线粒体中,h 型主要分布在细 胞 质 中 。 此 外 APS REDUCTASE 1 (APR1) 、 HIGH CHLOROPHYLLFLUORESCENCE 164 (HCF164)含有 WCPFC、HCGPC 和 WCEVC 基序,属于非经典Trx(Gelhaye et al. 2004; Gelhaye et al. 2005; Meyer et al. 2005)。1.2.4 植物中的两个硫氧还蛋白系统根据电子供体和还原酶的不同,植物中可分为三个硫氧还蛋白系统,一个是以NADPH 为供氢体,由 Trx、还原型辅酶Ⅱ(NADPH)及硫氧还蛋白还原酶(thioredoxinreductase, TrxR)组成的依赖于 NADPH 的硫氧还蛋白系统,该系统存在于细胞质和线粒体中(马展等 2015),另外一个是由 Trx、铁氧还蛋白(ferredoxin, Fd)和硫氧图 1-2 硫氧还蛋白还原二硫键的反应机理 (Jacquot et al. 2002)Fig.1-2 Reaction mechanism of disulfide reduction by thioredoxin (Jacquot et al. 2002)

小麦胚,细胞分裂素,蔗糖含量,葡萄糖含量


图 2-1 不同基因型小麦开花后 16 d 和 30 d 小麦胚的葡萄糖、蔗糖含量Fig.2-1 Contents of glucose and sucrose in wheat embryos at 16 and 30 days after anthesis of wheat withdifferent genotypes注:1.小写字母不同表示差异达到显著水平(P < 0.05);2.横坐标数字代表小麦基因型。下同。Note: 1.Different small letters indicate significant different (P < 0.05). 2. The Abscissa number represents the wheatgenotypes. The same as below.由图 2-1 统计分析发现不同基因型小麦开花后 16 天和 30 天小麦胚的葡萄糖含量平均值分别为 4.65 mg/g 和 2.33 mg/g,变异系数为 15.83%和 30.75%,相应同时期蔗糖含量平均值分别为 25.66 mg/g 和 40.23 mg/g,变异系数为 13.45%和 23.76%。所有基因型小麦胚内葡萄糖含量随着胚的发育而降低,而蔗糖则随之增加,但不同胚性愈伤率小麦胚葡萄糖和蔗糖含量差异不显著。2.2.2 不同基因型小麦胚发育过程中内源细胞分裂素和赤霉素含量分析


本文编号:3059518

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