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转录调控子CRP对肺炎克雷伯菌KP1 1 373基因的转录调控研究

发布时间:2021-03-12 17:55
  目的肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae,K.pneumoniae)是革兰阴性菌中一种常见且非常重要的致病菌,可以引起多种疾病,常见的有肺炎、尿路感染、血液感染、化脓性肝脓肿以及细菌性脑膜炎。cAMP受体蛋白(cAMP receptor protein,CRP)是细菌的一种重要转录调控子。肺炎克雷伯菌中KP11373基因功能目前尚不清楚。在KP11373基因的启动子区中,发现了CRP蛋白可能的结合序列,提示了CRP蛋白对靶基因可能存在的转录调控影响。本文拟用实验探究并验证CRP蛋白对KP11373基因可能存在的调控作用。方法先用凝胶阻滞实验(EMSA)判断CRP蛋白能否直接特异性结合在KP11373基因上游的启动子区。扩增KP11373基因启动子区域的DNA片段,与纯化的CRP蛋白进行体外孵育,观察有无阻滞带的出现。然后,用LacZ报告基因融合实验判断CRP蛋白对靶基因的具体调控关系。扩增KP11373基因启动子序列,将DNA片段导入p... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:48 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

转录调控子CRP对肺炎克雷伯菌KP1 1 373基因的转录调控研究


EMSA原理图

转录调控子CRP对肺炎克雷伯菌KP1 1 373基因的转录调控研究


LacZ报告基因融合实验原理图

转录调控子CRP对肺炎克雷伯菌KP1 1 373基因的转录调控研究


EMSA实验结果

【参考文献】:
期刊论文
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硕士论文
[1]高毒力肺炎克雷伯菌生物标志的鉴定研究及基因组学分析[D]. 唐敏.西南医科大学 2019



本文编号:3078729

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