转录因子MYC2和MYB305对烟碱合成基因的表达调控研究
发布时间：2021-03-17 23:34
茉莉酸在烟草的烟碱代谢调控中发挥关键作用。为揭示茉莉酸介导烟碱代谢的分子机制,本研究分析了下游转录因子MYC2和MYB305对烟碱合成相关基因的调控作用。以前期培育的MYC2和MYB305过表达植株（MYC2-OE、MYB305-OE）和基因沉默植株（MYC2-RI、MYB305-RI）、茉莉酸受体蛋白COI1的基因沉默植株（COI1-RI）和COI1沉默植株与MYC2和MYB305过表达植株的杂交后代（COI1-RI×MYC2-OE、COI1-RI×MYB305-OE）、以及TN90对照烟草为材料,进行了茉莉酸敏感性及烟碱含量检测,分析了MYC2和MYB305对烟草茉莉酸敏感特性及烟碱合成水平的影响;检测了MYC2和MYB305转基因材料中MYC2和MYB305的表达水平、以及ERF类烟碱合成调控因子基因（ERF189、ERF168）的表达水平,以解析MYC2、MYB305间的相互表达调控及其对烟碱代谢相关ERF调控因子基因的表达调控;并检测了烟碱代谢功能基因[精氨酸脱羧酶（Arginine decarboxylase,ADC）、鸟氨酸脱羧酶（Ornithine decarboxyl...
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
主要符号对照表
第一章 绪论
1.1 烟碱合成过程与调控机制
1.1.1 烟碱的合成
1.1.2 激素调控
1.1.3 烟碱合成关键基因PMT的分子调控
1.2 茉莉酸途径在烟碱代谢中的调控作用
1.2.1 JA受体蛋白COI1
1.3 bHLH家族转录因子
1.4 MYB家族转录因子
1.5 研究内容及研究意义
1.5.1 研究目的与意义
1.5.2 技术路线
第二章 MYC2、MYB305 对烟草茉莉酸敏感特性及烟碱合成的影响分析
2.1 材料与方法
2.1.1 试验材料
2.1.2 试剂与仪器
2.1.3 材料处理
2.1.4 转基因材料的鉴定
2.1.5 转基因材料的茉莉酸敏感性分析
2.1.6 烟碱含量测定
2.2 结果与分析
2.2.1 转基因植株的鉴定
2.2.2 MYC2、MYB305 对烟草茉莉酸敏感性的影响
2.2.3 MYC2、MYB305 对烟碱合成水平的影响
2.3 讨论
第三章 MYC2、MYB305 对烟碱代谢相关调控因子的表达调控
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 试剂与仪器
3.1.3 实验方法
3.2 结果与分析
3.2.1 MYC2和MYB305 之间的表达调控作用
3.2.2 MYC2、MYB305对ERF类烟碱合成调控基因ERF168/189 的表达调控
3.3 讨论
第四章 MYC2、MYB305 对烟碱代谢功能基因的表达调控
4.1 材料与方法
4.1.1 试验材料
4.1.2 试剂与仪器
4.1.3 实验方法
4.2 结果与分析
4.2.1 MYC2、MYB305 对烟碱代谢功能基因ADC、ODC的表达调控
4.2.2 MYC2、MYB305 对烟碱代谢功能基因PMT、QPT的表达调控
4.3 讨论
第五章 MYC2、MYB305对COI1-RI的烟碱代谢恢复特性
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.2 试剂与仪器
5.1.3 实验方法
5.2 结果与分析
5.2.1 MYC2、MYB305 对恢复COI1-RI烟草的茉莉酸敏感性分析
5.2.2 MYC2、MYB305对COI1-RI烟草中烟碱合成水平的恢复特性分析
5.2.3 MYC2、MYB305对COI1-RI烟草中烟碱代谢功能基因的表达调控
5.3 讨论
第六章 ADC、ODC的启动子克隆及载体构建
6.1 材料与方法
6.1.1 试验材料
6.1.2 试剂与仪器
6.1.3 目的基因Pr ADC和 Pr ODC的获得
6.1.4 pENTR-D-TOP-PrADC和 pENTR-D-TOP-PrODC的构建
6.1.5 pMDC-attR-PrADC-GUS和 pMDC-attR-PrODC-GUS蛋白表达载体的构建
6.1.6 PrADC和 PrODC融合报告基因GUS转基因材料的培育
6.2 结果与分析
6.2.1 NtADC和 NtODC基因的启动子克隆
6.2.2 NtADC和 NtODC基因启动子融合GUS基因报告的植物表达载体构建
6.2.3 转基因材料的培育
6.3 讨论
第七章 全文结论
7.1 结论
7.2 展望
参考文献
附录 A
致谢
作者简历
本文编号：3087910
【文章来源】：中国农业科学院北京市
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
abstract
主要符号对照表
第一章 绪论
1.1 烟碱合成过程与调控机制
1.1.1 烟碱的合成
1.1.2 激素调控
1.1.3 烟碱合成关键基因PMT的分子调控
1.2 茉莉酸途径在烟碱代谢中的调控作用
1.2.1 JA受体蛋白COI1
1.3 bHLH家族转录因子
1.4 MYB家族转录因子
1.5 研究内容及研究意义
1.5.1 研究目的与意义
1.5.2 技术路线
第二章 MYC2、MYB305 对烟草茉莉酸敏感特性及烟碱合成的影响分析
2.1 材料与方法
2.1.1 试验材料
2.1.2 试剂与仪器
2.1.3 材料处理
2.1.4 转基因材料的鉴定
2.1.5 转基因材料的茉莉酸敏感性分析
2.1.6 烟碱含量测定
2.2 结果与分析
2.2.1 转基因植株的鉴定
2.2.2 MYC2、MYB305 对烟草茉莉酸敏感性的影响
2.2.3 MYC2、MYB305 对烟碱合成水平的影响
2.3 讨论
第三章 MYC2、MYB305 对烟碱代谢相关调控因子的表达调控
3.1 材料与方法
3.1.1 试验材料
3.1.2 试剂与仪器
3.1.3 实验方法
3.2 结果与分析
3.2.1 MYC2和MYB305 之间的表达调控作用
3.2.2 MYC2、MYB305对ERF类烟碱合成调控基因ERF168/189 的表达调控
3.3 讨论
第四章 MYC2、MYB305 对烟碱代谢功能基因的表达调控
4.1 材料与方法
4.1.1 试验材料
4.1.2 试剂与仪器
4.1.3 实验方法
4.2 结果与分析
4.2.1 MYC2、MYB305 对烟碱代谢功能基因ADC、ODC的表达调控
4.2.2 MYC2、MYB305 对烟碱代谢功能基因PMT、QPT的表达调控
4.3 讨论
第五章 MYC2、MYB305对COI1-RI的烟碱代谢恢复特性
5.1 材料与方法
5.1.1 试验材料
5.1.2 试剂与仪器
5.1.3 实验方法
5.2 结果与分析
5.2.1 MYC2、MYB305 对恢复COI1-RI烟草的茉莉酸敏感性分析
5.2.2 MYC2、MYB305对COI1-RI烟草中烟碱合成水平的恢复特性分析
5.2.3 MYC2、MYB305对COI1-RI烟草中烟碱代谢功能基因的表达调控
5.3 讨论
第六章 ADC、ODC的启动子克隆及载体构建
6.1 材料与方法
6.1.1 试验材料
6.1.2 试剂与仪器
6.1.3 目的基因Pr ADC和 Pr ODC的获得
6.1.4 pENTR-D-TOP-PrADC和 pENTR-D-TOP-PrODC的构建
6.1.5 pMDC-attR-PrADC-GUS和 pMDC-attR-PrODC-GUS蛋白表达载体的构建
6.1.6 PrADC和 PrODC融合报告基因GUS转基因材料的培育
6.2 结果与分析
6.2.1 NtADC和 NtODC基因的启动子克隆
6.2.2 NtADC和 NtODC基因启动子融合GUS基因报告的植物表达载体构建
6.2.3 转基因材料的培育
6.3 讨论
第七章 全文结论
7.1 结论
7.2 展望
参考文献
附录 A
致谢
作者简历
本文编号：3087910
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