黑穗醋栗类黄酮-3’,5’-羟化酶基因的克隆及表达特性研究

发布时间：2021-03-18 19:37

　　黑穗醋栗（Ribes nigrum L.）是寒地特色小浆果果树树种之一,果实中花色苷含量较高,花色苷具有改善视力、降低血压、减缓炎症、抑制癌细胞等多种保健功能。类黄酮-3’,5’-羟基化酶（F3’5’H）是花色苷合成途径中的关键酶之一,对花翠素（是花色苷的一种）的合成起着至关重要的作用。本论文以东北农业大学园艺试验站黑穗醋栗种植资源圃中的‘布劳德’（Brodforp）为试验材料,在克隆的基础上,实施实时荧光定量PCR技术,分析了黑穗醋栗F3’5’H基因在根、茎、叶、花、芽等不同组织器官以及果实发育的不同时期的表达特性,推测该基因的表达与果中花色苷含量的相关关系,构建了F3’5’H原核表达系统,以期为系统的阐明F3’5’H基因在黑穗醋栗花色苷生物合成中的作用以及表达方式提供理论依据。主要研究结果如下:（1）采用PCR技术成功克隆得到黑穗醋栗类黄酮-3’5’-羟化酶（F3’5’H）基因,开放阅读框（ORF）的长度为1530 bp,编码509个氨基酸。采用生物信息学方法预测黑穗醋栗F3’5’H基因编码的蛋白质相对分子量为57.11 kDa,理论等电点为9.26,为亲水性蛋白,无信号肽,有1个... 

【文章来源】：东北农业大学黑龙江省 211工程院校

【文章页数】：70 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

研究技术路线

黑穗醋栗总RNA琼脂糖凝胶电泳结果

80 值为 2.03，OD 260/OD 230 值为 2.24提取黑穗醋栗的 RNA 符合后续分子生物1 黑穗醋栗总 RNA 琼脂糖凝胶电泳结果l RNA electrophoresis patterns of Ribes n 基因的克隆登录的黑穗醋栗 F3'5'H 基因信息，获得 引物：F1，F2。

【参考文献】：
期刊论文
[1]ABA和GA3对黑穗醋栗二次萌芽超微结构的影响[J]. 秦栋,张椿浩,刘庆帅,薛晓晓,霍俊伟,员盎然.  果树学报. 2017(10)
[2]日本蛇根草黄酮醇合成酶基因的克隆及其序列分析[J]. 张宇斌,彭贵,潘蓉蓉,陈婷,申欢,余远珍,孙威.  基因组学与应用生物学. 2018(07)
[3]细胞色素P450酶的表观遗传学调控及研究进展[J]. 张轶雯,方罗,郑小卫,李清林,童莹慧,鲍美华,黄萍.  中国现代应用药学. 2017(02)
[4]‘桂葡6号’葡萄花色苷组成特点与基因表达规律解析[J]. 成果,周思泓,黄羽,张瑛,管敬喜,杨莹,文仁德,张劲.  植物生理学报. 2017(01)
[5]烟草FLS基因表达抑制对类黄酮代谢的影响[J]. 宋中邦,李文正,高玉龙,王丙武,师君丽,余玉珍,陈丽梅,李永平.  基因组学与应用生物学. 2016(12)
[6]黑穗醋栗果实多糖的制备、结构鉴定及生物活性研究[J]. 徐雅琴,王跃鹏,牛小杰,倪耀成,王丽波,杨昱,周涛.  食品科学. 2017(15)
[7]芍药查尔酮异构酶基因（CHI）克隆、密码子偏好性分析以及蛋白结构功能预测[J]. 吴彦庆,赵大球,王静,陶俊.  华北农学报. 2016(02)
[8]药用植物中细胞色素P450基因的研究进展[J]. 董栩,许燕,李月亭,赵爽.  云南中医中药杂志. 2016(03)
[9]石榴果肉PgF3′5′H基因克隆及不同温度处理下的表达分析[J]. 关晓弯,陈磊,涂佳丽,张水明.  西北植物学报. 2016(03)
[10]黄草乌Av-F3’5’H基因的克隆与表达分析[J]. 马璐琳,王祥宁,贾文杰,段青,崔光芬,杜文文,王继华.  西南农业学报. 2015(06)

博士论文
[1]荔枝果皮花色素苷生物合成关键调控因子的筛选及其功能验证[D]. 赖彪.华南农业大学 2016
[2]微环境调控‘赤霞珠’葡萄果实花色苷代谢的研究[D]. 成果.西北农林科技大学 2015
[3]山葡萄花色苷生物合成相关结构基因克隆与表达[D]. 刘海峰.东北林业大学 2010
[4]蓝色花形成关键基因的分离及其表达分析[D]. 孟丽.北京林业大学 2006

硕士论文
[1]黑穗醋栗酚类物质的分析[D]. 赵剑辉.东北农业大学 2017
[2]不同温度贮藏对采后石榴品质的影响及相关基因的表达[D]. 关晓弯.安徽农业大学 2016
[3]茶树类黄酮-3’,5’-羟基化酶的功能分析[D]. 许玉娇.安徽农业大学 2014
[4]花穗整穗和套袋对葡萄花色苷组分及合成相关基因表达的影响[D]. 张雷.南京农业大学 2014



本文编号：3088823