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调控水稻磷吸收基因OsRLK2的图位克隆与功能研究

发布时间:2021-03-24 10:44
  磷是植物生长与发育过程所必须的大量元素之一,在植物体内具有重要作用。磷在植物生长发育过程中,参与物质合成,能量转化,信号传递等一系列的过程。土壤对磷的固定作用导致土壤中可溶性磷的浓度非常低,因此植物对磷的吸收利用效率也非常低。植物对磷的吸收和转运主要依靠植物体内的磷转运蛋白,因此磷转运蛋白在维持植物体内磷平衡和正常发育的过程中起重要作用。通过筛选本实验室水稻T-DNA插入突变体库,我们得到了一个磷积累,部分叶尖坏死,植株矮化的突变体,并将其命名为rlk2。突变体rlk2以粳稻品种日本晴(Nipponbare)为遗传背景,在幼水稻幼苗期突变体与野生型叶片中有效磷含量无显著差异,水稻进入分蘖期后突变体叶片中有效磷含量显著高于野生型,且植株矮化,叶尖坏死等表型逐渐显现。通过构建遗传群体和田间表型的统计实验得出rlk2突变为隐性纯合突变。通过构建定位群体和运用图位克隆技术,我们从水稻基因组中克隆了一个编码水稻类受体蛋白激酶的基因,将其命名为OsRLK2。OsRLK2在地下组织和地上组织中都有表达。类受体蛋白激酶在植物体中是一个非常重要的信号调节因子。类受体蛋白激酶的结构主要包括一个胞外受体域,... 

【文章来源】:中国农业科学院北京市

【文章页数】:54 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

调控水稻磷吸收基因OsRLK2的图位克隆与功能研究


图2.1水稻苗期野生型与磷积累突变体表型观察(WT:野生型,/?从2:磷积累突变体,Bar=10cm)??Fig.?2.1?Phenotypic?observation?of?wild-type?and?phosphorus?accumulation?mutants?in?rice?seedling?stage??(WT:?wild?type,?rlk2\?phosphorus?accumulation?mutant,?Bar=10cm)??2.3.2突变体与野生型各营养元素含量比较??

氨基酸序列,琼脂糖电泳,植株,引物


图3.1?r从2突变体突变基因的初定位和精细定位??A:初定位琼脂糖电泳图(引物?11-6、11-7、11-8、11-9;?F2?植株?1-6;?D:dular;?N:Nipponbare)??B:细定位琼脂糖电泳图(引物?InDell380、InDell526;?F2?植株?7-20;?D:dular;?N:Nipponbare)??Fig.?3.1?The?initial?localization?and?fine?localization?of?rlk2?mutant?gene??A:?Initial?positioning?agarose?electrophoresis?map?(primers?11-6,?11-7,?11-8,?11-9;?D:?dular;?N:?Nipponbare)??B:?fine?positioning?agarose?electrophoresis?map?(primers?InDell380,?InDell526;?D:?dular;?N:?Nipponbare)??3.5.4?突变体突变位点分析??通过细定位将突变位点的所在区间缩小到了?1.46?Mb,在此区间内大约有200多个基因,经??过基因功能的初步筛选,排除己报道的和突变体表型无关的基因,最终我们筛选得到了几个功能??未知的候选基因。将在此区间内挑选的候选基因进行测序,在序列比对的过程当中发现一个未知??基因的第一个外显子上具有一个单碱基的替换突变,并且基因型与表型连锁。基因氨基酸序列的??15??

基因结构,突变体,区间


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【参考文献】:
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博士论文
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[2]蛋白激酶抑制剂的设计合成及其抗癌活性研究[D]. 古国贤.南开大学 2012
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[2]水稻两个ROS调控相关RPK基因的克隆及其功能研究[D]. 王刚锋.西北农林科技大学 2014
[3]马铃薯晚疫病抗性相关胞质类受体蛋白激酶基因StPK1的功能研究[D]. 王敏.华中农业大学 2012
[4]水稻类受体蛋白激酶OsRPK1胞外配体筛选[D]. 刘彦岐.南京农业大学 2012
[5]水稻类受体蛋白激酶OsRPK1参与生长素信号传导和极性运输的转录组学研究[D]. 邱阳.南京农业大学 2012
[6]拟南芥类受体蛋白激酶LRR-RLK亚家族基因Atlg09970的功能研究[D]. 郭立琳.湖南师范大学 2006
[7]水稻OsRLK1基因的克隆与生理功能的初步研究[D]. 朱凌.浙江大学 2005



本文编号:3097583

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