红花油体蛋白家族CtOleosin基因克

发布时间：2021-03-24 18:09

　　红花,1-2年生草本植物,是近年来国内外发展较快的新型油料作物之一,含油量高达35-47%,其亚油酸含量高达73-80%,号称“亚油酸之王”。本实验以红花为研究对象,利用RT-PCR技术克隆红花CtOleosin家族基因全长cDNA片段;生物信息学方法分析其理化性质及结构特性;利用qRT-PCR方法检测该家族基因在红花不同组织器官、种子不同发育时期以及不同胁迫处理下的表达规律;构建植物超表达载体,转化拟南芥,获得T3代转基因拟南芥种子,进而研究其功能。具体研究结果如下:1、筛选出最佳内参为EF1ɑ。qRT-PCR结果表明,CtOleosin家族基因具有类似的表达模式。该家族基因主要在红花的花和种子中表达,在根、茎、叶、子叶、胚轴几乎不表达;在红花种子不同发育时期,该家族基因的表达量逐渐升高,28d时达到最高,之后下降;经ABA、SA、NaCl处理后发现该家族基因受它们的调控影响显著。2、利用RT-PCR技术成功克隆了CtOleosin家族基因的全长cDNA片段,并对该家族基因进行生物信息学分析,结果显示,CtOleosin1-8家族基因分别编码161,137,160,185,211,2... 

【文章来源】：吉林农业大学吉林省

【文章页数】：79 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

油体结构模型

位论文 Oleosin2 促进油体融合。成熟种子中 Oleosin 一旦缺白结构及生物学作用（Caleosin）以 Ca2+结合的方式存在于油体表面，其油体稳定等。油体钙蛋白的结构与油体蛋白结构类似的疏水区和 C-端的亲水区 3 部分组成。油体钙蛋白端都为亲水区，油体蛋白 C 端为两亲性(兼亲水性和白有相似的功能，可以维持油体稳定性[51]。有研究构紊乱，说明油体钙蛋白对维持油体结构具有重要的不仅受 ABA 调控而且还与植物开花有关[53]。

图 1-1 载体结构示意图Fig.1-1 Structure diagram of pOBT vector图 1-2 载体构建示意图Fig.1-2 Structure of recombinant vector放置 1.5 mL 离心管内，加入 Solution I 连接酶，16℃反应 30m取单一菌落进行 PCR 鉴定，经鉴定正确的菌株，保菌，保存于系见表 1-8。表 1-8 表达载体连接体系

【参考文献】：
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本文编号：3098156