水稻LCD3功能的初步研究

发布时间：2021-03-28 05:12

　　镉（Cd）是一种二价重金属元素,过量的Cd积累会危害人类健康、影响植物生长。通过Cd胁迫下转录组测序分析,发现水稻OsLCD3受Cd诱导表达。OsLCD3具有磷酸激酶结构域,没有转运功能,也不属于解毒蛋白,探讨OsLCD3对Cd响应的机理及其功能具有重要理论意义。本研究通过CRISPR/Cas9技术获得突变体lcd3,结合转录组测序、酵母双杂交等技术,对OsLCD3在水稻中生物学功能以及在镉离子运输调节中的作用进行了初步研究。主要结果如下:1.利用OsLCD3的基因组序列设计基因编辑靶位点,构建OsLCD3-Cas9敲除载体,以日本晴为背景,通过遗传转化获得43株基因编辑的敲除水稻,鉴定到23株阳性植株,包括12株纯合体和11株杂合体。克隆出OsLCD3基因的CDS片段,通过同源重组的方法将其连到有2×35S启动子的pHB过表达载体上,转入水稻中,经鉴定得到4株阳性植株,选取纯合突变体lcd3-1（-7bp）、lcd3-19（-5bp）、OE-2、OE-3进行后续实验。2.对lcd3-1,lcd3-19和WT的主要农艺学性状进行观察和统计,发现突变体的千粒重显著高于WT,结实率显著低于... 

【文章来源】：湖南师范大学湖南省 211工程院校

【文章页数】：74 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

从土壤至籽粒Cd转运模型

酵母双杂交的蛋白质互作机理Fig.1-2DetectionofproteininteractionmechanismbyYeasttwo-hybridsystem

DUALmembranesystem工作原理


本文编号：3104948