哈维氏弧菌yjeE和yeaZ基因定点突变及生物学性质研究

发布时间：2021-03-29 21:07

　　哈维氏弧菌（Vibrio harveyi）广泛存在于海洋环境,在极端环境下可进入非可培养（Viable but non-culturable,VBNC）状态,VBNC细胞在适宜条件下复苏为可培养形式。本论文研究了过氧化氢和低温诱导哈维氏弧菌形成的VBNC状态。对哈维氏弧菌细胞生长及环境应激相关的YjeE、YeaZ蛋白进行了原核表达及生物学性质研究,利用定点突变技术研究了YjeE和YeaZ的酶活性位点,研究了重组蛋白的酶活性与生物学作用相关性,以及不同重组蛋白对哈维氏弧菌的促生长及促细胞复苏作用,主要研究结果如下:哈维氏弧菌SF-1在4℃低温诱导70 d后,细胞进入活的非可培养状态。当用50 mM的H₂O₂诱导时,哈维氏弧菌细胞在96 h进入VBNC状态。用LIVE/DEAD BacLight试剂盒测定过氧化氢诱导过程中活细胞数和细胞总数变化,发现总细胞数和活细胞数均保持微小变化,而可培养细胞数下降为零,表明细胞进入VBNC状态。将过氧化氢酶、丙酮酸钠、及其类似物分别添加到VBNC状态的哈维氏弧菌细胞中,发现过氧化氢酶、丙酮酸钠、α-丁酮酸钠盐... 

【文章来源】：兰州理工大学甘肃省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

激光扫描共聚焦显微镜下，观察经H2O2处理的细胞被染色照片

硕士学位论文 2.3.3.2 电镜观察 当用扫描电子显微镜观察时，正常状态哈维氏弧菌的细胞为杆状，VBNC 状态哈维氏弧菌的细胞则变为球形，并且细胞体积减小。正常状态细胞的平均大小为 1.6ⅹ0.5μm。VBNC 状态细胞的平均半径为 0.5 μm。

系统发育树

【参考文献】：
期刊论文
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博士论文
[1]弧菌YeaZ基因表达、蛋白性质及其对环境微生物促生长作用研究[D]. 李彦林.兰州理工大学 2017

硕士论文
[1]红平红球菌rpf基因突变、生物活性及应用研究[D]. 罗旦.兰州理工大学 2019
[2]哈维氏弧菌YeaZ互作蛋白基因克隆表达及其性质研究[D]. 芮文鸿.兰州理工大学 2018
[3]添加藤黄球菌SRpf对序批式反应器（SBR）废水处理效果的影响及其机理初探[D]. 刘殷东.浙江大学 2016
[4]海洋弧菌复苏促进因子家族糖蛋白酶的研究[D]. 赵明君.中国海洋大学 2011
[5]辛辛那提弧菌、哈维氏弧菌和鳗弧菌活的非可培养状态的研究[D]. 钟琳红.中国海洋大学 2009



本文编号：3108191