番茄SlNBRP1基因的克隆及抗病性研究
发布时间：2021-04-01 22:21
作物病害是限制农业生产的主要原因之一。通常植物通过两种途径来抵御病害,分别是基础抗性（PTI）和基因对基因抗性（ETI）,其中在ETI途径中发挥主要作用的就是抗性基因（R基因）,它可以编码产生ETI系统中的免疫受体。利用R基因培育抗性品种是防治作物病害最为直接、环保、有效的手段。大多数的R基因都可以编码含有卷曲螺旋结构、核苷酸结合位点和富含亮氨基酸重复序列（CC-NBS-LRR）结构域的蛋白质。番茄是全世界种植最为广泛的一种经济作物,在果蔬供应中占有至关重要的地位。细菌性斑点病对番茄的生产构成了严重的威胁,深入研究细菌性斑点病的致病机理不仅为改良番茄育种提供了新的线索而且对提高番茄品质起到了重要的指导作用。番茄中的DDB1作为CRL4泛素连结酶复合体的核心成分,通过靶向修饰不同底物蛋白的丰度和活性参与调控多种生物学功能,包括叶绿体发育、果实大小和抗病应答等。前期的研究发现,番茄的DDB1功能缺失突变体hp1表现出对病原菌高敏感性。为了进一步研究DDB1在番茄中的抗病功能,我们以DDB1为诱饵通过酵母双杂交筛选得到了一个番茄的抗性基因SlNBRP1。通过基因表达模式分析和亚细胞定位实验我...
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SlNBRP1和DDB1的免疫共沉淀分析
图 3.6 SlNBRP1 酵母双杂交实验Fig 3.6 Yeast two-hybrid assay of SlNBRP1含有 X-Gal 的三缺筛选培养基（-His, -Trp, -Ura），由左至右依次G202::SlNBRP1--pJG4-5::DDB1；pEG202::SlNBRP1--pJG4-5::CupEG202::SlNBRP1--pJG4-5::空载 pEG202::DDB1--pJG4-5::NacP1 受 UPS 系统（Ubiquitin Proteasome System）调控降解2 是蛋白酶体抑制剂，通过添加与不添加 MG132 观察蛋白目的蛋白是否受泛素-蛋白酶体系统（UPS）的降BRP1-Flag 同 pTEX::GFP-Flag ， 以 及 pTEX::SlGL-Flag 共同转入烟草叶片原生质体中，其中以 SlGLK2 组P 作为参照。结果如图 3.7 所示，SlGLK2 组合中添加 M不加的信号要强，且四个泳道中 GFP 的信号强弱是一致可信的。在 SlNBRP1 组合中，添加 MG132 的泳道蛋白信多，说明 SlNBRP1 蛋白是 UPS 系统调控降解的。
图 3.8 SlNBRP1番茄原生质体转化实验lNBRP1 tomato protoplast transformatio载体的构建基因扩增NA 为模板，分别用 NBRP1-F1/R1 和脂糖凝胶电泳检测，结果如图 3.9 的 SlNBRP1 基因一致。 3.9 番茄 SlNBRP1 基因全长序列扩增产he production of SlNBRP1 gene full len
【参考文献】：
期刊论文
[1]青花菜CC-NBS-LRR抗病基因BoCNL1的克隆与分析[J]. 黄笑梅,金建峰,张雪,朱思眉,朱柯柯,赵罗鹏,蒋明. 浙江农业学报. 2016(02)
[2]番茄细菌性病害的发生与防治[J]. 车德军,王海,高海军. 农业与技术. 2014(12)
[3]番茄SlWRKY80基因共抑制表达影响转基因植株抗逆性的研究[J]. 曾辉,高永峰,刘继恺,余进德,黄胜雄,刘永胜. 四川大学学报(自然科学版). 2014(05)
[4]番茄NBS-LRR抗病基因家族全基因组分析[J]. 刘云飞,万红建,韦艳萍,李志邈,叶青静,王荣青,阮美颖,姚祝平,周国治,杨悦俭. 核农学报. 2014(05)
[5]干旱胁迫下CO2浓度升高对转StAPX番茄植株耐旱能力的影响[J]. 孙卫红,孙禛禛,吴秋霞,刘汉玄,陈梅,陈喆. 植物生理学报. 2013(12)
[6]苹果NBS-LRR1基因的鉴定与表达分析[J]. 宋霄,柏素花,戴洪义. 园艺学报. 2013(07)
[7]番茄基因工程的研究进展[J]. 王蕾,宿烽. 安徽农业科学. 2013(07)
[8]番茄COBRA基因克隆、表达模式及生物信息学分析[J]. 曹颖,唐晓凤,刘永胜. 植物研究. 2012(03)
[9]植物转基因中同源共抑制的机制及其解决措施[J]. 孔莹莹,蒋丽,韩凝,边红武,朱睦元,王君晖. 生命科学. 2012(05)
[10]植物与病原微生物互作分子基础的研究进展[J]. 程曦,田彩娟,李爱宁,邱金龙. 遗传. 2012(02)
博士论文
[1]番茄中SISINA泛素连接酶家族的功能分析及对果实生长发育的影响[D]. 王文杰.合肥工业大学 2018
硕士论文
[1]番茄SlCDT1调控植物生长发育功能的研究[D]. 胡鑫.合肥工业大学 2018
[2]番茄OFP20基因的克隆及功能初步分析[D]. 赵春燕.山东农业大学 2017
[3]番茄丁香假单胞菌抗病基因Pto互作蛋白功能分析[D]. 刘莹.合肥工业大学 2017
[4]番茄中一个抗病基因的遗传转化及抗病性的初步研究[D]. 许伟.合肥工业大学 2016
[5]番茄胞嘧啶甲基转移酶同源基因SlMET1的功能初探[D]. 曹徐绿.合肥工业大学 2016
[6]玉米BK2L3基因过表达载体的构建及在番茄中的遗传转化[D]. 杨潇怡.合肥工业大学 2015
[7]番茄GRAS转录因子家族基因SlFSR的克隆及其功能研究[D]. 任丽军.重庆大学 2014
[8]番茄在中国的传播及其影响研究[D]. 刘玉霞.南京农业大学 2007
本文编号：3114054
【文章来源】：合肥工业大学安徽省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
SlNBRP1和DDB1的免疫共沉淀分析
图 3.6 SlNBRP1 酵母双杂交实验Fig 3.6 Yeast two-hybrid assay of SlNBRP1含有 X-Gal 的三缺筛选培养基（-His, -Trp, -Ura），由左至右依次G202::SlNBRP1--pJG4-5::DDB1；pEG202::SlNBRP1--pJG4-5::CupEG202::SlNBRP1--pJG4-5::空载 pEG202::DDB1--pJG4-5::NacP1 受 UPS 系统（Ubiquitin Proteasome System）调控降解2 是蛋白酶体抑制剂，通过添加与不添加 MG132 观察蛋白目的蛋白是否受泛素-蛋白酶体系统（UPS）的降BRP1-Flag 同 pTEX::GFP-Flag ， 以 及 pTEX::SlGL-Flag 共同转入烟草叶片原生质体中，其中以 SlGLK2 组P 作为参照。结果如图 3.7 所示，SlGLK2 组合中添加 M不加的信号要强，且四个泳道中 GFP 的信号强弱是一致可信的。在 SlNBRP1 组合中，添加 MG132 的泳道蛋白信多，说明 SlNBRP1 蛋白是 UPS 系统调控降解的。
图 3.8 SlNBRP1番茄原生质体转化实验lNBRP1 tomato protoplast transformatio载体的构建基因扩增NA 为模板，分别用 NBRP1-F1/R1 和脂糖凝胶电泳检测，结果如图 3.9 的 SlNBRP1 基因一致。 3.9 番茄 SlNBRP1 基因全长序列扩增产he production of SlNBRP1 gene full len
【参考文献】：
期刊论文
[1]青花菜CC-NBS-LRR抗病基因BoCNL1的克隆与分析[J]. 黄笑梅,金建峰,张雪,朱思眉,朱柯柯,赵罗鹏,蒋明. 浙江农业学报. 2016(02)
[2]番茄细菌性病害的发生与防治[J]. 车德军,王海,高海军. 农业与技术. 2014(12)
[3]番茄SlWRKY80基因共抑制表达影响转基因植株抗逆性的研究[J]. 曾辉,高永峰,刘继恺,余进德,黄胜雄,刘永胜. 四川大学学报(自然科学版). 2014(05)
[4]番茄NBS-LRR抗病基因家族全基因组分析[J]. 刘云飞,万红建,韦艳萍,李志邈,叶青静,王荣青,阮美颖,姚祝平,周国治,杨悦俭. 核农学报. 2014(05)
[5]干旱胁迫下CO2浓度升高对转StAPX番茄植株耐旱能力的影响[J]. 孙卫红,孙禛禛,吴秋霞,刘汉玄,陈梅,陈喆. 植物生理学报. 2013(12)
[6]苹果NBS-LRR1基因的鉴定与表达分析[J]. 宋霄,柏素花,戴洪义. 园艺学报. 2013(07)
[7]番茄基因工程的研究进展[J]. 王蕾,宿烽. 安徽农业科学. 2013(07)
[8]番茄COBRA基因克隆、表达模式及生物信息学分析[J]. 曹颖,唐晓凤,刘永胜. 植物研究. 2012(03)
[9]植物转基因中同源共抑制的机制及其解决措施[J]. 孔莹莹,蒋丽,韩凝,边红武,朱睦元,王君晖. 生命科学. 2012(05)
[10]植物与病原微生物互作分子基础的研究进展[J]. 程曦,田彩娟,李爱宁,邱金龙. 遗传. 2012(02)
博士论文
[1]番茄中SISINA泛素连接酶家族的功能分析及对果实生长发育的影响[D]. 王文杰.合肥工业大学 2018
硕士论文
[1]番茄SlCDT1调控植物生长发育功能的研究[D]. 胡鑫.合肥工业大学 2018
[2]番茄OFP20基因的克隆及功能初步分析[D]. 赵春燕.山东农业大学 2017
[3]番茄丁香假单胞菌抗病基因Pto互作蛋白功能分析[D]. 刘莹.合肥工业大学 2017
[4]番茄中一个抗病基因的遗传转化及抗病性的初步研究[D]. 许伟.合肥工业大学 2016
[5]番茄胞嘧啶甲基转移酶同源基因SlMET1的功能初探[D]. 曹徐绿.合肥工业大学 2016
[6]玉米BK2L3基因过表达载体的构建及在番茄中的遗传转化[D]. 杨潇怡.合肥工业大学 2015
[7]番茄GRAS转录因子家族基因SlFSR的克隆及其功能研究[D]. 任丽军.重庆大学 2014
[8]番茄在中国的传播及其影响研究[D]. 刘玉霞.南京农业大学 2007
本文编号：3114054
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3114054.html
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