棉大卷叶螟丝素轻链基因的克隆与功能验证
发布时间：2021-04-12 02:09
棉大卷叶螟Sylepta derogata属于鳞翅目螟蛾科,是棉花等经济作物上的主要害虫,以幼虫吐丝卷叶为害棉花,近些年关于该虫危害棉花等经济作物的研究报道逐渐增多。本文为了探讨该虫吐丝的内在分子机制,以它的丝素轻链基因SdFib为研究目标,在克隆得到其cDNA片段和全长的基础上,采用RNAi技术干扰SdFib,分析干扰SdFib后对棉大卷叶螟幼虫丝的形貌结构、力学性能和氨基酸种类与含量等以及对该虫生长发育的影响,系统验证了SdFi 的功能。研究结果如下:根据已经测序登记的其他昆虫丝素轻链基因的保守区域设计引物,通过RT-PCR克隆得到SdFib基因636 bp的cDNA片段。多重序列比对分析发现,SdFib与外米缀蛾Corcyra cephalonica同源基因的氨基酸相似性最高,达到71%,和大蜡螟GalleRia mellonella与家蚕Bombyx mori同源基因的氨基酸相似性分别为70%和67%。采用饲喂法,结合体外合成dsSdFib和大肠杆菌发酵法构建dsSdFib载体,分别分析了不同浓度dsSdFib处理和不同的饲喂时间对棉大卷叶螟SdFib表达量的影响。在充分验证得...
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
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【参考文献】：
期刊论文
[1]成都地区黄秋葵蚜虫天敌种类及其类群动态研究[J]. 蒲德强,刘东阳,刘虹伶,李跃建,戢沛城,龚一耘,袁灿,周肆维,李斌,王剑,王勇. 植物保护. 2017(01)
[2]锦葵科4种植物上棉大卷叶螟幼虫种群发生动态[J]. 潘洪生,修春丽. 中国生物防治学报. 2016(06)
[3]上海地区棉大卷叶螟在黄秋葵上的发生规律与绿色防控技术[J]. 陈杰,吴寒冰,潘龙金,陈爱波,孙菊华,顾建国,沈红然,潘维军,严宝华,戴勤珍,李惠明. 中国蔬菜. 2015(11)
[4]家蚕、蓖麻蚕和天蚕的茧丝结构比较[J]. 张阳阳,李菁,赵丰,周旸,郑海玲,吴子婴. 蚕业科学. 2015(03)
[5]RNAi在昆虫控制领域的研究进展[J]. 赵洁,刘小宁. 中国植保导刊. 2015(01)
[6]原位显微红外和X射线研究升温过程中桑蚕丝微观结构变化[J]. 张瑞静,邵春光,李倩,曹伟,张阳,刘成刚,申长雨. 高分子材料科学与工程. 2012(09)
[7]桑蚕雌雄蚕丝氨基酸成分分析[J]. 李绍峰,虞晓华. 江苏蚕业. 2012(02)
[8]棉大卷叶螟在黄秋葵上的发生与防治[J]. 范德友. 福建农业科技. 2012(05)
[9]丝胶含量对温敏凝胶形态和热性能的影响[J]. 张青松,李学伟,董盼盼,陈莉,赵义平. 复合材料学报. 2012(03)
[10]一种新的单根茧丝纤维横截面积测量方法[J]. 张阳,赵爱春,陈雪娇,鲁成,向仲怀. 蚕业科学. 2011(05)
博士论文
[1]蚕丝纤维的微孔生成及其填埋特性研究[D]. 林红.苏州大学 2005
硕士论文
[1]亚洲玉米螟丝素轻链基因的克隆、表达分析及RNAi[D]. 李忠.扬州大学 2015
[2]棉大卷叶螟对棉花和苘麻的偏好性评价[D]. 陈玲.扬州大学 2014
[3]蜕皮激素诱导的丝腺相关基因表达研究[D]. 吴玉.苏州大学 2013
[4]家蚕丝素重链基因敲除品系的建立及其应用[D]. 刘勇.西南大学 2013
[5]蚕丝蛋白对涤纶的亲水整理[D]. 周冰.苏州大学 2013
[6]丝胶蛋白/碳酸钙复合材料的制备研究[D]. 丁少.浙江理工大学 2012
[7]转基因抗虫棉对棉大卷叶螟及其主要天敌的影响[D]. 武二忠.扬州大学 2011
[8]影响天然彩丝结构和性能的因素探讨[D]. 王少华.苏州大学 2009
[9]棉大卷叶螟主要生物生态学习性的再研究及主害代种群动态分析[D]. 陈建.扬州大学 2007
本文编号：3132400
【文章来源】：扬州大学江苏省
【文章页数】：109 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
图１－１丝蛋白分子构象示意图??－ｒｍａｉｏｎ?ｏｆ?ｓｉｌｋｒｏｔｅｉｎ??
?２．３结果与分析??对挑取的１５个单菌落进行过夜培养，菌液ＰＣＲ检测（图２－１）可知，由引物顺??利扩增出条带，由图２－２可以看出，胶回收都成功获得所需要的目的条带。从图２－３??所示，成功地克隆到棉大卷叶螟丝素轻链基因片段，顺利进行测序，其长度为６３６?ｂｐ。??最终获得如图２－４所７Ｋ的氣基酸序列。??Ｍ?１?２?３?４?５?６?７?８?９?１０?１１?１２?１３?１４?１５??ｉ｜??Ｉ，．国??圍義圓＿圓??Ｌ…ｍ…＇１??图２－１菌落ＰＣＲ扩增基因插入检测结果??Ｆｉｇ?２－１?Ｔｈｅ?ｒｅｓｕｌｔｓ?ｏｆ?ＰＣＲ?ａｍｐｌｉｆｉｃａｔｉｏｎ?ｏｆ?ｔａｒｇｅｔ?ｉｎｓｅｒｔｅｄ
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【参考文献】：
期刊论文
[1]成都地区黄秋葵蚜虫天敌种类及其类群动态研究[J]. 蒲德强,刘东阳,刘虹伶,李跃建,戢沛城,龚一耘,袁灿,周肆维,李斌,王剑,王勇. 植物保护. 2017(01)
[2]锦葵科4种植物上棉大卷叶螟幼虫种群发生动态[J]. 潘洪生,修春丽. 中国生物防治学报. 2016(06)
[3]上海地区棉大卷叶螟在黄秋葵上的发生规律与绿色防控技术[J]. 陈杰,吴寒冰,潘龙金,陈爱波,孙菊华,顾建国,沈红然,潘维军,严宝华,戴勤珍,李惠明. 中国蔬菜. 2015(11)
[4]家蚕、蓖麻蚕和天蚕的茧丝结构比较[J]. 张阳阳,李菁,赵丰,周旸,郑海玲,吴子婴. 蚕业科学. 2015(03)
[5]RNAi在昆虫控制领域的研究进展[J]. 赵洁,刘小宁. 中国植保导刊. 2015(01)
[6]原位显微红外和X射线研究升温过程中桑蚕丝微观结构变化[J]. 张瑞静,邵春光,李倩,曹伟,张阳,刘成刚,申长雨. 高分子材料科学与工程. 2012(09)
[7]桑蚕雌雄蚕丝氨基酸成分分析[J]. 李绍峰,虞晓华. 江苏蚕业. 2012(02)
[8]棉大卷叶螟在黄秋葵上的发生与防治[J]. 范德友. 福建农业科技. 2012(05)
[9]丝胶含量对温敏凝胶形态和热性能的影响[J]. 张青松,李学伟,董盼盼,陈莉,赵义平. 复合材料学报. 2012(03)
[10]一种新的单根茧丝纤维横截面积测量方法[J]. 张阳,赵爱春,陈雪娇,鲁成,向仲怀. 蚕业科学. 2011(05)
博士论文
[1]蚕丝纤维的微孔生成及其填埋特性研究[D]. 林红.苏州大学 2005
硕士论文
[1]亚洲玉米螟丝素轻链基因的克隆、表达分析及RNAi[D]. 李忠.扬州大学 2015
[2]棉大卷叶螟对棉花和苘麻的偏好性评价[D]. 陈玲.扬州大学 2014
[3]蜕皮激素诱导的丝腺相关基因表达研究[D]. 吴玉.苏州大学 2013
[4]家蚕丝素重链基因敲除品系的建立及其应用[D]. 刘勇.西南大学 2013
[5]蚕丝蛋白对涤纶的亲水整理[D]. 周冰.苏州大学 2013
[6]丝胶蛋白/碳酸钙复合材料的制备研究[D]. 丁少.浙江理工大学 2012
[7]转基因抗虫棉对棉大卷叶螟及其主要天敌的影响[D]. 武二忠.扬州大学 2011
[8]影响天然彩丝结构和性能的因素探讨[D]. 王少华.苏州大学 2009
[9]棉大卷叶螟主要生物生态学习性的再研究及主害代种群动态分析[D]. 陈建.扬州大学 2007
本文编号：3132400
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3132400.html
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