灵芝LaeA基因沉默与过表达对灵芝代谢的影响
发布时间：2021-04-12 12:07
纵观灵芝发酵生产的整个进程及其研究现状,灵芝酸等活性物质产量低是发酵法不能进行商业化生产的主要原因。研究表明,通过构建高表达工程菌株可以显著提高灵芝酸的生物合成量,因此,转基因技术是灵芝酸等活性物质增产的有效策略。目前的研究多集中于通过过表达灵芝酸或灵芝多糖生物合成途径中的关键酶基因,从而实现增产目的。LaeA是丝状真菌全局性调控因子之一,参与其形态发育和次级代谢的调控。研究发现,LaeA基因对丝状真菌次级代谢相关基因簇的表达水平及次级代谢产物的产量具有正调控效应。灵芝作为高等丝状真菌之一,其形态发育和次级代谢是否受LaeA基因的调控、如何调控及内在的调控机制方面至今未见报道。本研究采用转基因技术构建灵芝LaeA基因沉默菌株、过表达LaeA基因cDNA序列菌株及过表达LaeA基因全序列菌株,对其菌丝生长、产孢能力、糖消耗能力、灵芝酸和灵芝多糖产量以及合成相关基因表达情况进行检测,探究LaeA基因对灵芝形态发育和次级代谢的调控作用及其内在的调控机制。通过研究LaeA基因沉默、过表达LaeA基因cDNA序列、过表达LaeA基因全序列对灵芝形态发育和次级代谢的影响,结果表明:（1）LaeA基...
【文章来源】：福建师范大学福建省
【文章页数】：112 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
灵芝酸的基本骨架[22]
福建师范大学崔艳硕士学位论文-4-图2灵芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化学结构[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3灵芝酸的生物合成灵芝酸是最重要的三萜成分，具有极其重要的药用价值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示踪实验证实灵芝酸的三萜烯骨架来自甲羟戊酸途径（MVP途径）。由此可知：灵芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羟戊[25]，其中MVA是唯一的前体，角鲨烯和羊毛甾醇是中间体[26]。图3所示为目前比较公认的灵芝酸的生物合成途径。图3灵芝酸合成代谢的基本途径Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶；(7)鲨烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)
福建师范大学崔艳硕士学位论文-4-图2灵芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化学结构[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3灵芝酸的生物合成灵芝酸是最重要的三萜成分，具有极其重要的药用价值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示踪实验证实灵芝酸的三萜烯骨架来自甲羟戊酸途径（MVP途径）。由此可知：灵芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羟戊[25]，其中MVA是唯一的前体，角鲨烯和羊毛甾醇是中间体[26]。图3所示为目前比较公认的灵芝酸的生物合成途径。图3灵芝酸合成代谢的基本途径Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶；(7)鲨烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)
【参考文献】：
期刊论文
[1]灵芝活性成分的研究进展[J]. 姜芳燕,马军,陈永敢,陈光宙,李珍,王沛正,王辉芳. 黑龙江农业科学. 2014(08)
[2]DNA甲基化的影响因素及对基因表达的调控[J]. 邢晋祎. 生物学教学. 2010(06)
[3]中国药用真菌名录及部分名称的修订[J]. 戴玉成,杨祝良. 菌物学报. 2008(06)
[4]中国灵芝科资源及其地理分布Ⅲ[J]. 吴兴亮,戴玉成,林尤河. 贵州科学. 2004(04)
[5]中国灵芝科资源及其地理分布Ⅱ[J]. 吴兴亮,戴玉成,林尤河. 贵州科学. 2004(03)
[6]中国灵芝科资源及其地理分布Ⅰ[J]. 吴兴亮,戴玉成,林龙河. 贵州科学. 2004(02)
[7]灵芝的临床应用进展[J]. 郭金龙. 福建中医药. 1986(06)
硕士论文
[1]红色红曲菌M-7全局性调控因子laeA功能的研究[D]. 蔡丽.华中农业大学 2013
本文编号：3133269
【文章来源】：福建师范大学福建省
【文章页数】：112 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
灵芝酸的基本骨架[22]
福建师范大学崔艳硕士学位论文-4-图2灵芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化学结构[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3灵芝酸的生物合成灵芝酸是最重要的三萜成分，具有极其重要的药用价值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示踪实验证实灵芝酸的三萜烯骨架来自甲羟戊酸途径（MVP途径）。由此可知：灵芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羟戊[25]，其中MVA是唯一的前体，角鲨烯和羊毛甾醇是中间体[26]。图3所示为目前比较公认的灵芝酸的生物合成途径。图3灵芝酸合成代谢的基本途径Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶；(7)鲨烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)
福建师范大学崔艳硕士学位论文-4-图2灵芝酸GA-Mk、GA-T、GA-S和GA-Me的化学结构[22]Fig.2ThechemicalstructureofGA-Mk、GA-T、GA-SandGA-Me4.3灵芝酸的生物合成灵芝酸是最重要的三萜成分，具有极其重要的药用价值。Shiao[23]、Hirotani[24]等人利用同位素示踪实验证实灵芝酸的三萜烯骨架来自甲羟戊酸途径（MVP途径）。由此可知：灵芝酸的生物合成起始于乙酰CoA和甲羟戊[25]，其中MVA是唯一的前体，角鲨烯和羊毛甾醇是中间体[26]。图3所示为目前比较公认的灵芝酸的生物合成途径。图3灵芝酸合成代谢的基本途径Fig.3PutativepathwayforganodericacidsbiosynthesisfromGanodermalucidum(1)3-羟基-3-甲基戊二酰CoA还原酶；(7)鲨烯合酶；(9)羊毛甾醇合酶；(1)3-hydroxy-3-methylglutaryl-CoAreductase(HMGR);(7)Squalenesynthase(SQS);(9)
【参考文献】：
期刊论文
[1]灵芝活性成分的研究进展[J]. 姜芳燕,马军,陈永敢,陈光宙,李珍,王沛正,王辉芳. 黑龙江农业科学. 2014(08)
[2]DNA甲基化的影响因素及对基因表达的调控[J]. 邢晋祎. 生物学教学. 2010(06)
[3]中国药用真菌名录及部分名称的修订[J]. 戴玉成,杨祝良. 菌物学报. 2008(06)
[4]中国灵芝科资源及其地理分布Ⅲ[J]. 吴兴亮,戴玉成,林尤河. 贵州科学. 2004(04)
[5]中国灵芝科资源及其地理分布Ⅱ[J]. 吴兴亮,戴玉成,林尤河. 贵州科学. 2004(03)
[6]中国灵芝科资源及其地理分布Ⅰ[J]. 吴兴亮,戴玉成,林龙河. 贵州科学. 2004(02)
[7]灵芝的临床应用进展[J]. 郭金龙. 福建中医药. 1986(06)
硕士论文
[1]红色红曲菌M-7全局性调控因子laeA功能的研究[D]. 蔡丽.华中农业大学 2013
本文编号：3133269
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