脂肪分化相关蛋白基因敲除抑制血管平滑肌细胞增生与分化及减少血管内膜增生的实验研究
发布时间：2021-04-14 00:43
研究背景:现动脉粥样硬化所导致的心脑血管疾病及周围血管疾病发病率逐年增高,在国人死亡原因排第一位,人们一直在探索动脉硬化的致病机理,寻求解决动脉硬化性疾病的有效方法。目前,随着介入技术的进步,新器材的出现,腔内手术治疗动脉硬化闭塞性疾病越来越多,但术后中远期动脉再狭窄一直是无法彻底解决的难题。无论是动脉粥样硬化的进展过程中,还是动脉介入或手术后再狭窄的过程中,血管平滑肌细胞的增生和迁移均扮演着重要角色。资料显示,脂肪分化相关蛋白在单核-巨噬细胞、血管平滑肌细胞向泡沫细胞分化的过程中起着重要作用,进而影响着动脉粥样硬化的形成。据现有资料显示,目前尚缺乏ADRP基因敲除的VSMCs在体外培养血小板源性生长因子刺激下增殖与分化的相关研究;另外,也缺少ADRP基因敲除对在动物或人体内血管内膜增生的影响的相关研究。研究目的:确定ADRP基因敲除对体外培养的VSMCs的增殖、分化、迁移能力的影响;探索ADRP对内膜增生和VSMC产生影响的分子机制;通过动物实验确定ADRP基因敲除对小鼠体内动脉粥样硬化形成及内膜增生的影响;通过动物实验确定ADRP基因敲除对大鼠体内动脉球囊损伤后动脉内膜增生的影响。...
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：105 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
1siADRP/siCtr转染VSMCs24小时后，加入10ng/LPDGF，48h后westernblotting检测ADRP蛋白的表达，β-actin作为内部控制.*P<0.05，**P<0.01，下同
2.3.2 siADRP/siCtr 转染 VSMCs24 小时后，加入 10 ng/L PDGF，于第 24h、48h 和 72h别行 MTT 实验检测细胞生存能力。检测吸光度 490nmOD 值。人 VSMCs 进行 siCtr/siADRP 转染，或未转染，均加入 10 ng/ml PDGF，通 MTT 实验检测其生存能力。于 24h，48h 及 72h 时间点检测，实验结果（见图.3.2）表明，与对照组相比，PDGF 会刺激 VSMCs 增生，ADRP 敲除显著的抑了 PDGF 所诱导的 VSMCs 增殖。比较 PDGF+siADRP 组和 PDGF+siCtr 组，DRP 敲除可明显抑制 PDGF 所诱导的 VSMCs 增殖。本研究还分析了 VSMCs 的细胞周期分布(见表 2.3.1 及图 2.3.3）。数据显示DGF 组 G1 期细胞所占比例明显低于对照组，而 S 期细胞所占比例明显高于对31
2.3.3 siADRP/siCtr 转染 VSMCs24h 后加入 PDGF 孵育 48 小时后进行流siADRP/siCtr 转染 VSMCs24 小时后，加入 10 ng/L PDGF，继标本，应用 western blotting 检查增生标准物 PCNA 表达情况（DGF 组 PCNA 表达明显高于对照组，而 PDGF+siADRP 组与 P示 ADRP 敲除可明显抑制 PDGF 诱导的 PCNA 蛋白增殖。
【参考文献】：
期刊论文
[1]HFJ大鼠与Wistar大鼠用于动脉粥样硬化造模的比较研究[J]. 连伟光,郑龙,尤红煜,刘健敏,张东明,刘福英,王俊霞. 四川动物. 2013(04)
[2]中国自然人群下肢外周动脉疾病患病率及相关危险因素[J]. 王勇,李觉,徐亚伟,布艾加尔·哈斯木,杨进刚,袁洪,胡大一. 中华心血管病杂志. 2009 (12)
[3]脂肪分化相关蛋白在巨噬细胞和泡沫细胞中的表达[J]. 宋越,李航,张丽英,叶菁,李青. 细胞与分子免疫学杂志. 2009(04)
[4]50岁以上糖尿病人群周围动脉闭塞性疾病相关因素分析[J]. 管珩,刘志民,李光伟,郭晓蕙,许樟榕,邹大进,邢惠莉,刘伟,盛正妍,田浩明,朱大龙,于德民,庄维特,陈璐璐,翁建平. 中华医学杂志. 2007(01)
[5]代谢综合征患者合并外周动脉疾病的临床研究[J]. 魏毅东,胡大一,张润峰,郑黎强,李觉,余金明,邢燕. 中华医学杂志. 2006(30)
[6]Onychin inhibits proliferation of vascular smooth muscle cells by regulating cell cycle[J]. Ming YANG~2,Hong-lin HUANG~2,Bing-yang ZHU,Qin-hui TUO,Duan-fang LIAO~3Institute of Pharmacy and Pharmacology,Nanhua University,Hengyang 421001,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2005(02)
[7]老年周围动脉硬化闭塞病与心血管疾病的关系——北京万寿路地区老年人群横断面调查[J]. 李小鹰,王洁,何耀,范利. 中华医学杂志. 2003(21)
本文编号：3136318
【文章来源】：吉林大学吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：105 页
【学位级别】：博士
【部分图文】：
1siADRP/siCtr转染VSMCs24小时后，加入10ng/LPDGF，48h后westernblotting检测ADRP蛋白的表达，β-actin作为内部控制.*P<0.05，**P<0.01，下同
2.3.2 siADRP/siCtr 转染 VSMCs24 小时后，加入 10 ng/L PDGF，于第 24h、48h 和 72h别行 MTT 实验检测细胞生存能力。检测吸光度 490nmOD 值。人 VSMCs 进行 siCtr/siADRP 转染，或未转染，均加入 10 ng/ml PDGF，通 MTT 实验检测其生存能力。于 24h，48h 及 72h 时间点检测，实验结果（见图.3.2）表明，与对照组相比，PDGF 会刺激 VSMCs 增生，ADRP 敲除显著的抑了 PDGF 所诱导的 VSMCs 增殖。比较 PDGF+siADRP 组和 PDGF+siCtr 组，DRP 敲除可明显抑制 PDGF 所诱导的 VSMCs 增殖。本研究还分析了 VSMCs 的细胞周期分布(见表 2.3.1 及图 2.3.3）。数据显示DGF 组 G1 期细胞所占比例明显低于对照组，而 S 期细胞所占比例明显高于对31
2.3.3 siADRP/siCtr 转染 VSMCs24h 后加入 PDGF 孵育 48 小时后进行流siADRP/siCtr 转染 VSMCs24 小时后，加入 10 ng/L PDGF，继标本，应用 western blotting 检查增生标准物 PCNA 表达情况（DGF 组 PCNA 表达明显高于对照组，而 PDGF+siADRP 组与 P示 ADRP 敲除可明显抑制 PDGF 诱导的 PCNA 蛋白增殖。
【参考文献】：
期刊论文
[1]HFJ大鼠与Wistar大鼠用于动脉粥样硬化造模的比较研究[J]. 连伟光,郑龙,尤红煜,刘健敏,张东明,刘福英,王俊霞. 四川动物. 2013(04)
[2]中国自然人群下肢外周动脉疾病患病率及相关危险因素[J]. 王勇,李觉,徐亚伟,布艾加尔·哈斯木,杨进刚,袁洪,胡大一. 中华心血管病杂志. 2009 (12)
[3]脂肪分化相关蛋白在巨噬细胞和泡沫细胞中的表达[J]. 宋越,李航,张丽英,叶菁,李青. 细胞与分子免疫学杂志. 2009(04)
[4]50岁以上糖尿病人群周围动脉闭塞性疾病相关因素分析[J]. 管珩,刘志民,李光伟,郭晓蕙,许樟榕,邹大进,邢惠莉,刘伟,盛正妍,田浩明,朱大龙,于德民,庄维特,陈璐璐,翁建平. 中华医学杂志. 2007(01)
[5]代谢综合征患者合并外周动脉疾病的临床研究[J]. 魏毅东,胡大一,张润峰,郑黎强,李觉,余金明,邢燕. 中华医学杂志. 2006(30)
[6]Onychin inhibits proliferation of vascular smooth muscle cells by regulating cell cycle[J]. Ming YANG~2,Hong-lin HUANG~2,Bing-yang ZHU,Qin-hui TUO,Duan-fang LIAO~3Institute of Pharmacy and Pharmacology,Nanhua University,Hengyang 421001,China. Acta Pharmacologica Sinica. 2005(02)
[7]老年周围动脉硬化闭塞病与心血管疾病的关系——北京万寿路地区老年人群横断面调查[J]. 李小鹰,王洁,何耀,范利. 中华医学杂志. 2003(21)
本文编号：3136318
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