低温胁迫下福寿螺的生理反应和差异表达基因的筛选及功能研究
发布时间:2021-04-15 13:47
福寿螺是一种外来入侵生物,原产于南美洲亚马逊流域,现遍布于我国长江以南15个省(直辖市、自治区)的各个作物区,对水生作物危害严重。福寿螺对逆境的适应能力极强,对高温、低温和寄主等能较快地作出适应,尤其是对低温的适应是福寿螺向北扩散的生物学基础。因此,福寿螺低温适应性机理的研究已成为生物学界关注的热点,但目前对福寿螺低温适应性以及入侵扩散的分子机理研究较少,因此对其扩散和危害的预防还缺少理论和实践依据。本论文以福寿螺主要入侵危害种类Pomacea canaliculata为研究对象,采用抑制消减杂交(SSH:suppression subtractive hybridization)、斑点杂交(dot blot hybridization),荧光定量PCR(qPCR)和RNA干扰(RNAi:RNA interference)等技术手段,从生理生化和分子生物学角度研究福寿螺对低温胁迫的响应,为预测和有效控制该有害生物的扩散奠定了理论基础。主要结果和结论如下:1.福寿螺越冬幼螺过冷却点(supercooling points,SCP)和低温胁迫研究表明,福寿螺越冬幼螺SCP与样本采集时的环境...
【文章来源】:安徽农业大学安徽省
【文章页数】:138 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图2-3月平均最高、最低环境温度??Fig?2-3?Month?average?minimum?and?maximum?air?temperature??
安徽农业大学博士学位论文?第二章福寿螺过冷却点及耐寒性研究??福寿螺越冬幼螺低温死亡率测定结果表明,随着胁迫温度的降低,福寿螺越??冬幼螺低温胁迫后的存活率逐渐降低(图2-4)。不同螺高幼螺在低温环境下的存??活率具有差异。5°C处理2d,四组幼螺的存活率都在80%以上,差异不显著;3°C??低温处理2d,随着幼螺螺高的增加,福寿螺幼螺的存活率逐渐升高;0°C低温胁??迫2天,幼螺存活率随着螺高增加而增加,H3组幼螺存活率显著高于其他几组幼??螺(P<0.05);在-3°C和更低的-5°C处理组,没有福寿螺存活。??100?-1?_??9〇?-?jri?a?HI:5-10.5mm??80?-?-:?Ij.?t?QH2:?10.6-12.5mm??_?70?-?-;U:?faH3:12.6-20mm??ill??5°C?3°C?0°C?-3°C?-5°C??Incubation?lempern(urc??图2-4不同螺高幼螺存活率??Fig?2-4.?Survivorships?oi'P.?canaliculata?juveniles?of?different?sizes?exposed?to?low??temperatures?at?various?days??2.13.2低温驯化福寿螺幼螺死亡率??结采显随芥胁迫时间的延长,未经冷驯化的福寿螺幼螺和l〇°C冷驯化??10周的福券螺幼螺(均采叱r?2013年10?U?)?/r:不丨rij低温(5°C,?3〇C,?0°C,?-3°C??和-5。0处理卜―的存沾率逐渐卜'降(图2-5)?i提示,经冷驯化的福寿螺幼螺的介??活率高,a低温耐受能力更为突
安徽农业大学博士学位论文?第三章福寿螺在低温胁迫下的抗氧化反应研宄??3.3J.3?GPX?活性??低温胁迫后福寿螺肝脏GPX活性变化见图3-5。结果表明,随着胁迫时间??的延长,福寿螺肝脏GPX活性(F=2.46xl〇2,?d.f.=5,P<0.001)先上升后下降,??再逐渐上升。在胁迫12h时活性最高,随后降低,72h达最低,但仍明显高于对??照(P<0.05)。??70?■??Q?Q0°C?H25°C??t?^60?'?T??3、?T?t??^5〇?■?m??bfl???T??S5?e?T?T?rt??J?40?■兩?兩?_r??^?^?:::::?::::::?:::::?:::::?玉?:::::??p3°_?______?_??雲?Hi?11?111?111?1111??0d?0.25d?0.5d?Id?3d?5d??Time/d??图3-5低温胁迫对福寿螺肝脏中GPX酶活力的影响??Fig.3-5?Effects?of?cold?treatment?on?the?activity?of?GPX?in?liver?of?P.canaliculata??3.3.3.4总抗氧化能力(T-AOC)????低温胁迫对福寿螺肝脏总抗氧化能力(T-AOC)的影响见图3-6。结果表明,随??着胁迫时间的延长,福寿螺肝脏T-AOC水平先上升后下降,再逐渐上升。在胁??迫Id时水平最高,随后降低,但仍明显高于对照(P<0.05)。??0.7?■??G?0.6?■?由?E0。。??<?0.5?■?I?b25°C??0.4-?I?*??镯?5?0.3?.?ffe?I?I?1?
【参考文献】:
期刊论文
[1]低温胁迫对黄姑鱼(Nibea albiflora)抗氧化酶、Na+/-K+-ATP酶及Hsp70蛋白含量的影响[J]. 罗胜玉,徐冬冬,楼宝,陈睿毅,詹炜,毛国民. 海洋通报. 2017(02)
[2]异色瓢虫低温胁迫下过冷却点变化及抗寒基因表达分析[J]. 邬梦静,徐青叶,刘雅,施兴荣,沈祺达,杨萌萌,王世贵,唐斌. 中国农业科学. 2016(04)
[3]低温胁迫对云纹石斑鱼幼鱼抗氧化和免疫指标的影响[J]. 潘桂平,刘本伟,周文玉. 上海海洋大学学报. 2016(01)
[4]低温胁迫对点篮子鱼幼鱼肝脏抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响[J]. 宋志明,刘鉴毅,庄平,王妤,章龙珍,胡艳,龚盼. 海洋渔业. 2015(02)
[5]雌雄福寿螺耐寒能力的差异[J]. 郭靖,徐武兵,章家恩,赵本良,罗明珠. 应用生态学报. 2014(06)
[6]福寿螺入侵机制的研究进展[J]. 郭靖,章家恩. 生态学杂志. 2014(03)
[7]盐度、温度对卵形鲳鲹选育群体肝抗氧化酶活力的影响[J]. 刘汝建,区又君,李加儿,苏慧,曹守花,王永翠. 动物学杂志. 2013(03)
[8]六味地黄丸含药血清对自杀基因治疗黑色素瘤增效作用的缝隙连接机制初探[J]. 杜标炎,郭玉荣,易华,谭宇蕙,吴映雅. 中国中西医结合杂志. 2013(05)
[9]福寿螺的过冷却研究[J]. 赵本良,章家恩,罗明珠,宋春秀. 生态学报. 2012(05)
[10]温度和盐度对吉富品系尼罗罗非鱼幼鱼鳃Na+-K+-ATPase活力的联合效应[J]. 王海贞,王辉,强俊,徐跑,李瑞伟. 生态学报. 2012(03)
博士论文
[1]华山松大小蠹幼虫耐寒生化与分子机制[D]. 王娟.西北农林科技大学 2017
[2]长牡蛎免疫系统的发生和发育机制的初步研究[D]. 宋小瑞.中国科学院研究生院(海洋研究所) 2016
[3]基于RNA-Seq解析小桐子抗冷性形成的分子机制及其关键基因的克隆与功能分析[D]. 王海波.云南师范大学 2015
[4]栉孔扇贝免疫系统发生及母源免疫的初步研究[D]. 岳峰.中国科学院研究生院(海洋研究所) 2013
[5]桔小实蝇抗热胁迫反应的机制研究[D]. 夹福先.西南大学 2012
[6]小麦多子房性状SSH文库的构建及其相关基因的克隆与表达[D]. 栗现芳.西北农林科技大学 2011
[7]克氏原螯虾两种模式识别受体基因的克隆、重组表达及功能分析[D]. 董超华.中国海洋大学 2009
[8]高温热激下雌雄B型烟粉虱差异表达基因的筛选和Hsps基因功能的鉴定[D]. 吕志创.中国农业科学院 2008
[9]应用SSH技术研究氧化胁迫下细粒棘球蚴基因的表达[D]. 侯秋莲.新疆大学 2008
[10]杂色鲍(Haliotis diversicolor)响应细菌攻毒血淋巴细胞差异表达基因的研究[D]. 任洪林.厦门大学 2008
硕士论文
[1]金银花蛀干害虫咖啡脊虎天牛嗅觉相关基因鉴定及表达谱分析[D]. 詹文会.贵州师范大学 2018
[2]转录组分析杂色鲍在高温和缺氧应激下免疫相关基因及通路[D]. 孙玉龙.集美大学 2017
[3]中华蜜蜂抗寒性及其对南瓜授粉的研究[D]. 宋昌云.湖南农业大学 2015
[4]瓜实蝇对低温的耐受性及其生理生化机制研究[D]. 黄娜娜.华中农业大学 2014
[5]外来生物福寿螺热休克蛋白的克隆与其表达差异的研究[D]. 郑国湾.中国计量学院 2012
[6]福寿螺对逆境胁迫的行为反应及生理生化反应研究[D]. 韩微.广西大学 2012
[7]低温胁迫对斜带石斑鱼生理、生化、脂肪酸的影响[D]. 谢妙.广东海洋大学 2012
[8]二化螟越冬幼虫耐寒性及其机理研究[D]. 张拥军.华中农业大学 2007
[9]低温胁迫对草鱼ZC-7901细胞系和淡水白鲳CBS细胞系某些细胞功能影响的研究[D]. 徐德立.浙江大学 2002
本文编号:3139454
【文章来源】:安徽农业大学安徽省
【文章页数】:138 页
【学位级别】:博士
【部分图文】:
图2-3月平均最高、最低环境温度??Fig?2-3?Month?average?minimum?and?maximum?air?temperature??
安徽农业大学博士学位论文?第二章福寿螺过冷却点及耐寒性研究??福寿螺越冬幼螺低温死亡率测定结果表明,随着胁迫温度的降低,福寿螺越??冬幼螺低温胁迫后的存活率逐渐降低(图2-4)。不同螺高幼螺在低温环境下的存??活率具有差异。5°C处理2d,四组幼螺的存活率都在80%以上,差异不显著;3°C??低温处理2d,随着幼螺螺高的增加,福寿螺幼螺的存活率逐渐升高;0°C低温胁??迫2天,幼螺存活率随着螺高增加而增加,H3组幼螺存活率显著高于其他几组幼??螺(P<0.05);在-3°C和更低的-5°C处理组,没有福寿螺存活。??100?-1?_??9〇?-?jri?a?HI:5-10.5mm??80?-?-:?Ij.?t?QH2:?10.6-12.5mm??_?70?-?-;U:?faH3:12.6-20mm??ill??5°C?3°C?0°C?-3°C?-5°C??Incubation?lempern(urc??图2-4不同螺高幼螺存活率??Fig?2-4.?Survivorships?oi'P.?canaliculata?juveniles?of?different?sizes?exposed?to?low??temperatures?at?various?days??2.13.2低温驯化福寿螺幼螺死亡率??结采显随芥胁迫时间的延长,未经冷驯化的福寿螺幼螺和l〇°C冷驯化??10周的福券螺幼螺(均采叱r?2013年10?U?)?/r:不丨rij低温(5°C,?3〇C,?0°C,?-3°C??和-5。0处理卜―的存沾率逐渐卜'降(图2-5)?i提示,经冷驯化的福寿螺幼螺的介??活率高,a低温耐受能力更为突
安徽农业大学博士学位论文?第三章福寿螺在低温胁迫下的抗氧化反应研宄??3.3J.3?GPX?活性??低温胁迫后福寿螺肝脏GPX活性变化见图3-5。结果表明,随着胁迫时间??的延长,福寿螺肝脏GPX活性(F=2.46xl〇2,?d.f.=5,P<0.001)先上升后下降,??再逐渐上升。在胁迫12h时活性最高,随后降低,72h达最低,但仍明显高于对??照(P<0.05)。??70?■??Q?Q0°C?H25°C??t?^60?'?T??3、?T?t??^5〇?■?m??bfl???T??S5?e?T?T?rt??J?40?■兩?兩?_r??^?^?:::::?::::::?:::::?:::::?玉?:::::??p3°_?______?_??雲?Hi?11?111?111?1111??0d?0.25d?0.5d?Id?3d?5d??Time/d??图3-5低温胁迫对福寿螺肝脏中GPX酶活力的影响??Fig.3-5?Effects?of?cold?treatment?on?the?activity?of?GPX?in?liver?of?P.canaliculata??3.3.3.4总抗氧化能力(T-AOC)????低温胁迫对福寿螺肝脏总抗氧化能力(T-AOC)的影响见图3-6。结果表明,随??着胁迫时间的延长,福寿螺肝脏T-AOC水平先上升后下降,再逐渐上升。在胁??迫Id时水平最高,随后降低,但仍明显高于对照(P<0.05)。??0.7?■??G?0.6?■?由?E0。。??<?0.5?■?I?b25°C??0.4-?I?*??镯?5?0.3?.?ffe?I?I?1?
【参考文献】:
期刊论文
[1]低温胁迫对黄姑鱼(Nibea albiflora)抗氧化酶、Na+/-K+-ATP酶及Hsp70蛋白含量的影响[J]. 罗胜玉,徐冬冬,楼宝,陈睿毅,詹炜,毛国民. 海洋通报. 2017(02)
[2]异色瓢虫低温胁迫下过冷却点变化及抗寒基因表达分析[J]. 邬梦静,徐青叶,刘雅,施兴荣,沈祺达,杨萌萌,王世贵,唐斌. 中国农业科学. 2016(04)
[3]低温胁迫对云纹石斑鱼幼鱼抗氧化和免疫指标的影响[J]. 潘桂平,刘本伟,周文玉. 上海海洋大学学报. 2016(01)
[4]低温胁迫对点篮子鱼幼鱼肝脏抗氧化酶活性及丙二醛含量的影响[J]. 宋志明,刘鉴毅,庄平,王妤,章龙珍,胡艳,龚盼. 海洋渔业. 2015(02)
[5]雌雄福寿螺耐寒能力的差异[J]. 郭靖,徐武兵,章家恩,赵本良,罗明珠. 应用生态学报. 2014(06)
[6]福寿螺入侵机制的研究进展[J]. 郭靖,章家恩. 生态学杂志. 2014(03)
[7]盐度、温度对卵形鲳鲹选育群体肝抗氧化酶活力的影响[J]. 刘汝建,区又君,李加儿,苏慧,曹守花,王永翠. 动物学杂志. 2013(03)
[8]六味地黄丸含药血清对自杀基因治疗黑色素瘤增效作用的缝隙连接机制初探[J]. 杜标炎,郭玉荣,易华,谭宇蕙,吴映雅. 中国中西医结合杂志. 2013(05)
[9]福寿螺的过冷却研究[J]. 赵本良,章家恩,罗明珠,宋春秀. 生态学报. 2012(05)
[10]温度和盐度对吉富品系尼罗罗非鱼幼鱼鳃Na+-K+-ATPase活力的联合效应[J]. 王海贞,王辉,强俊,徐跑,李瑞伟. 生态学报. 2012(03)
博士论文
[1]华山松大小蠹幼虫耐寒生化与分子机制[D]. 王娟.西北农林科技大学 2017
[2]长牡蛎免疫系统的发生和发育机制的初步研究[D]. 宋小瑞.中国科学院研究生院(海洋研究所) 2016
[3]基于RNA-Seq解析小桐子抗冷性形成的分子机制及其关键基因的克隆与功能分析[D]. 王海波.云南师范大学 2015
[4]栉孔扇贝免疫系统发生及母源免疫的初步研究[D]. 岳峰.中国科学院研究生院(海洋研究所) 2013
[5]桔小实蝇抗热胁迫反应的机制研究[D]. 夹福先.西南大学 2012
[6]小麦多子房性状SSH文库的构建及其相关基因的克隆与表达[D]. 栗现芳.西北农林科技大学 2011
[7]克氏原螯虾两种模式识别受体基因的克隆、重组表达及功能分析[D]. 董超华.中国海洋大学 2009
[8]高温热激下雌雄B型烟粉虱差异表达基因的筛选和Hsps基因功能的鉴定[D]. 吕志创.中国农业科学院 2008
[9]应用SSH技术研究氧化胁迫下细粒棘球蚴基因的表达[D]. 侯秋莲.新疆大学 2008
[10]杂色鲍(Haliotis diversicolor)响应细菌攻毒血淋巴细胞差异表达基因的研究[D]. 任洪林.厦门大学 2008
硕士论文
[1]金银花蛀干害虫咖啡脊虎天牛嗅觉相关基因鉴定及表达谱分析[D]. 詹文会.贵州师范大学 2018
[2]转录组分析杂色鲍在高温和缺氧应激下免疫相关基因及通路[D]. 孙玉龙.集美大学 2017
[3]中华蜜蜂抗寒性及其对南瓜授粉的研究[D]. 宋昌云.湖南农业大学 2015
[4]瓜实蝇对低温的耐受性及其生理生化机制研究[D]. 黄娜娜.华中农业大学 2014
[5]外来生物福寿螺热休克蛋白的克隆与其表达差异的研究[D]. 郑国湾.中国计量学院 2012
[6]福寿螺对逆境胁迫的行为反应及生理生化反应研究[D]. 韩微.广西大学 2012
[7]低温胁迫对斜带石斑鱼生理、生化、脂肪酸的影响[D]. 谢妙.广东海洋大学 2012
[8]二化螟越冬幼虫耐寒性及其机理研究[D]. 张拥军.华中农业大学 2007
[9]低温胁迫对草鱼ZC-7901细胞系和淡水白鲳CBS细胞系某些细胞功能影响的研究[D]. 徐德立.浙江大学 2002
本文编号:3139454
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