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防御假单胞菌SN15-2生防和抗逆基因功能分析

发布时间:2021-04-17 00:34
  防御假单胞菌SN15-2是从番茄根际土壤分离得到的一株具有巨大生防潜力的植物根际促生菌,前期的研究发现其对番茄青枯病等多种植物病害都有较好的防治作用。防御假单胞菌它要通过根际定殖,产生多种抗生素及次级代谢产物,分泌噬铁素以及诱导植物系统抗性等机制拮抗植物病原菌,但是其抵御外界不良环境的能力较弱,因而在制剂加工过程中损耗较大且极易失活。因此研究与菌株生防和抗逆相关的基因及途径对防御假单胞菌的实际应用至关重要。鉴于SN15-2在防治植物病害时具有强大的根际定殖能力,而菌株的运动性与植物根际定殖能力密切相关,因此我们通过构建基因kinB的缺失株ΔkinB,采用运动性平板、生物膜检测、透射电镜观察、拮抗平板实验以及毛细管趋化试验分别检测野生株与突变株的运动(涌动和群集)能力、生物膜形成能力、鞭毛形成、对植物病原菌的拮抗能力以及对植株根茎叶的趋化能力。结果表明防御假单胞菌SN15-2内kinB基因的缺失提高了细菌的运动能力,涌动和群集直径分别增加了 10.3和9.6mm;损害了菌株形成生物膜的能力,对菌株的鞭毛位置和数目以及对病原菌的拮抗能力无显著的影响;提高了菌株对根茎叶的趋化能力,尤其是对根... 

【文章来源】:华东理工大学上海市 211工程院校 教育部直属院校

【文章页数】:70 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

防御假单胞菌SN15-2生防和抗逆基因功能分析


图2.1同源双交换示意图??Fig.?2.1?Schematic?diagram?of?homologous?recombination??

基因,测序,菌株,电泳


华东理工大学硕士学位论文?第17页??和菌体电泳验证筛选阳性转化子,如图2.2?(B)所示。取电泳条带大小正确的菌株,进??行提质粒、测序。测序成功的菌株即可转入到防御假单胞菌感受态细胞中,构建敲除菌。??M?1?2?M?1?2?M?1?2??HHh??-:;/?;?|e...?^????〇〇bp??(1)?(2)?(3)??图2.2?(A)?基因A7wfi、A冰4、Awfi上下同源臂扩增??Fig.?2.2?(A)?The?amplification?of?upstream?and?downstream?fragment?of?gene?kinB^?hetA、betB??注:M?为?DL2000marker;?(1):基因?(2):基因?(3):基因??泳道1为扩增上游同源臂?,泳道2为扩增下游同源臂。??Note:?M?stands?for?DL2000?maker;?(1)?gene?kinB?;?(?2)?gene?betA\?(?3?)?gene?betB.?Land?is?the??amplification?of?upstream;?lane2?is?the?amplification?of?downstream.??M?1?2?3?M?1?2?3?M?I?2?3??i()(?()l^p?;.r^?.?I?;VP'j?^??s^H??(1)?(2)?⑶??图2.2(B)?敲除质粒构建??Fig.?2.2?(B)?The?construction?of?plasmid?with?homologous?arms??注???M为DL2000marker;⑴細忍的敲除

质粒,基因,测序


华东理工大学硕士学位论文?第17页??和菌体电泳验证筛选阳性转化子,如图2.2?(B)所示。取电泳条带大小正确的菌株,进??行提质粒、测序。测序成功的菌株即可转入到防御假单胞菌感受态细胞中,构建敲除菌。??M?1?2?M?1?2?M?1?2??HHh??-:;/?;?|e...?^????〇〇bp??(1)?(2)?(3)??图2.2?(A)?基因A7wfi、A冰4、Awfi上下同源臂扩增??Fig.?2.2?(A)?The?amplification?of?upstream?and?downstream?fragment?of?gene?kinB^?hetA、betB??注:M?为?DL2000marker;?(1):基因?(2):基因?(3):基因??泳道1为扩增上游同源臂?,泳道2为扩增下游同源臂。??Note:?M?stands?for?DL2000?maker;?(1)?gene?kinB?;?(?2)?gene?betA\?(?3?)?gene?betB.?Land?is?the??amplification?of?upstream;?lane2?is?the?amplification?of?downstream.??M?1?2?3?M?1?2?3?M?I?2?3??i()(?()l^p?;.r^?.?I?;VP'j?^??s^H??(1)?(2)?⑶??图2.2(B)?敲除质粒构建??Fig.?2.2?(B)?The?construction?of?plasmid?with?homologous?arms??注???M为DL2000marker;⑴細忍的敲除


本文编号:3142467

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