四重实时荧光PCR快速检测转基因玉米及其加工产品

发布时间：2021-04-19 06:18

　　运用四重实时荧光聚合酶链式反应技术（polymerase chain reaction,PCR）对转基因玉米及其深加工制品进行筛选检测。选定花椰菜花叶病毒35S启动子（pCaMV35S）、农杆菌的胭脂碱合成酶基因终止子（tNOS）以及根癌农杆菌CP4蛋白基因和5-莽草酸-3-磷酸合成酶基因（EPSPS）为外源基因,选定编码玉米淀粉合成酶异构体zSTSII-2 （zSSIIb）基因作为玉米物种的内参照基因。设计和合成靶标基因特异性引物和多重荧光探针,经特异性、重复性、灵敏性和适用性等方法学验证建立了四重实时荧光PCR检测方法。结果表明该方法检测特异性强,重复性好,扩增效率在90%～110%,标准曲线相关系数R²≥0.99,最低检测限为每20μL反应13个拷贝,最低定量限为每20μL反应1.3个拷贝,其检测结果与SN/T 1204—2016标准方法检测结果一致,由于四个目标基因可以在一个反应管中进行扩增反应,且含有内源基因和外源基因,可降低试剂成本,简化操作程序,缩短检测时间,为玉米及其深加工产品转基因成分的快速检测提供参考。 

【文章来源】：中国粮油学报. 2020,35(10)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【部分图文】：

外源基因pCaMV35S、tNOS和EPSPS以及内源

【参考文献】：
期刊论文
[1]2018年全球生物技术/转基因作物商业化发展态势[J]. International Service for the Acquisition of Agri-biotech Applications China Biotechnology;.  中国生物工程杂志. 2019(08)
[2]转基因玉米MON89034、MON810、MIR162双重数字PCR定量方法的建立[J]. 梁文,杨镇州,李妍,罗超,闻艳丽,刘刚.  中国测试. 2019(06)
[3]转基因大豆食品中外源基因种类及食用安全性分析[J]. 许晓丹,刘畅,史永翠,王存芳.  食品与药品. 2013(06)



本文编号：3147010