长白落叶松瞬时遗传转化及LoMYB8等基因抗旱性研究
发布时间：2021-04-21 10:17
长白落叶松（Larix olgensis）是我国东北地区主要造林树种,具有生长快、生态效益好、工艺价值高的特点,被广泛用于荒山造林和纸浆林等的营建。常规育种周期较长,通过转基因手段可快速获得优良植株,以满足市场的需求。转录因子在转录水平对基因时空表达的调控,影响着植物的生长发育及抵抗逆境的能力。MYB和NAC作为植物中较大的转录因子家族,主要参与包括初生和次生代谢反应、植物生长发育、细胞形态与模式建成、响应生物和非生物胁迫等生物学过程。本文以长白落叶松为试验材料,通过瞬时遗传转化对基因抗旱性进行研究,主要结论如下:1.从长白落叶松中克隆得到全长为1121bp、1223bp和1042bp的LoMYB8、LoMYB9、LoNAC18,构建过表达及抑制表达载体及工程菌株。2.构建长白落叶松瞬时遗传转化体系,运用GUS染色及LoMYB8、LoMYB9、LoNAC18的基因表达量分析,验证体系构建成功。3.在PEG模拟干旱胁迫条件下,LoMYB8基因被干旱诱导,基因表达量较对照有明显上调,生理指标结果表明转基因植株的抗旱性提高,说明该基因参与了长白落叶松对干旱胁迫的应答,而LoMYB9、LoNA...
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 林木遗传转化研究进展
1.1.1 遗传转化的方法
1.1.2 转化植株的鉴定
1.2 MYB和NAC转录因子家族研究进展
1.3 干旱胁迫下基因表达及代谢产物的研究进展
1.3.1 林木抗旱基因
1.3.2 干旱胁迫下林木代谢物质的变化
1.4 目的与意义
1.5 技术路线
2 长白落叶松瞬时遗传转化体系建立
2.1 材料与方法
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株与载体材料
2.2 试剂与药品配制
2.2.1 试剂
2.2.2 药品配制
2.3 主要仪器设备
2.4 试验方法
2.4.1 RNA提取
2.4.2 cDNA合成
2.4.3 基因克隆
2.4.4 植物过表达载体构建
2.4.5 植物抑制表达载体构建
2.4.6 长白落叶松瞬时遗传转化体系构建
2.4.7 数据处理与分析
2.5 结果与分析
2.5.1 基因克隆
2.5.2 载体构建
2.5.3 长白落叶松瞬时遗传转化体系构建
2.5.4 小结
3 长白落叶松瞬时遗传转化植株抗旱性分析
3.1 试验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 菌株与载体材料
3.2 试剂与药品配置
3.2.1 试剂
3.2.2 药品配置
3.3 主要仪器设备
3.4 试验方法
3.4.1 PEG模拟干旱胁迫
3.4.2 瞬时遗传转化植株基因表达量测定
3.4.3 PEG胁迫转基因植株生理生化指标分析
3.4.4 数据处理与分析
3.5 结果与分析
3.5.1 PEG胁迫下植株的基因表达量分析
3.5.2 PEG胁迫下植株的生理生化指标分析
3.5.3 小结
4 PEG胁迫转基因长白落叶松转录组及代谢组分析
4.1 试验材料及药品配置
4.2 试验方法
4.2.1 PEG胁迫转基因长白落叶松转录组测序
4.2.2 转基因长白落叶松代谢组测序
4.2.3 数据处理与分析
4.3 结果与分析
4.3.1 PEG胁迫转基因长白落叶松转录组分析
4.3.2 PEG胁迫转基因长白落叶松代谢组分析
4.3.3 小结
讨论
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]抗CMV转基因辣椒实时荧光PCR检测方法研究[J]. 罗阿东,王丽平,任艳玲,蔡秋,王艳. 现代农业科技. 2019(05)
[2]板栗非胚性愈伤组织DsRed基因瞬时转化方法建立和优化[J]. 李志,邢宇,房克凤,曹庆芹,秦岭,张卿. 北京农学院学报. 2019(03)
[3]干旱胁迫下长白落叶松的代谢组学分析[J]. 熊欢欢,张含国,张磊,闫闪闪. 东北林业大学学报. 2019(04)
[4]干旱胁迫下外源硒对小麦幼苗抗旱性的影响[J]. 兰敏,尹美强,芦文杰,温银元,孙敏,高志强,郝兴宇. 土壤. 2018(06)
[5]干旱胁迫对2个甘蔗品种生长和生理生化特性的影响[J]. 李健,农艳丰. 安徽农学通报. 2018(21)
[6]基于转录组测序数据分析及高通量GO注释理论的研究[J]. 刘粉香,杨文国,孙勤红. 安徽农业科学. 2018(31)
[7]干旱胁迫对油松生理指标的影响[J]. 任贵军. 辽宁林业科技. 2018(05)
[8]不同家系马尾松苗木对持续干旱的响应[J]. 莫荣海,丁贵杰,罗仙英,陈龙. 森林与环境学报. 2018(04)
[9]基于马尾松干旱转录组的抗旱功能SSR位点分析[J]. 杜明凤,丁贵杰. 林业科学研究. 2018(05)
[10]PCR技术在植物生物学研究中的应用[J]. 李冬洁. 种子科技. 2018(08)
博士论文
[1]敖汉苜蓿小花与种子响应硼胁迫的蛋白质组学与代谢组学分析[D]. 陈玲玲.中国农业大学 2017
[2]高温和干旱胁迫下茶树转录组分析及Histone H1基因的功能鉴定[D]. 王伟东.南京农业大学 2016
[3]胡杨干旱响应转录组及NF-YB基因表达谱[D]. 严东辉.北京林业大学 2013
[4]干旱胁迫下长白落叶松家系变异的研究[D]. 张磊.东北林业大学 2012
[5]细枝木麻黄再生体系及农杆菌介导遗传转化研究[D]. 姜清彬.中国林业科学研究院 2011
硕士论文
[1]香榧体胚发生体系的优化及遗传体系的构建[D]. 龚丽.浙江农林大学 2018
[2]土施四种B族维生素对‘富士’苹果叶片营养及果实品质的影响[D]. 于文章.山东农业大学 2017
[3]长白落叶松体细胞胚胎发生及遗传转化研究[D]. 宋跃.东北林业大学 2017
[4]基于高通量测序的木麻黄转录组分析[D]. 刘海.福建农林大学 2014
[5]木薯干旱胁迫相关R2R3-MYB转录因子MeMYB63的基因特性及启动子分析[D]. 荣晶.海南大学 2014
[6]苹果MYB转录因子家族的生物信息学分析及MdMYB121和MdSIMYB1在非生物胁迫响应中的作用[D]. 曹忠慧.山东农业大学 2013
[7]NtNAC-R1介导烟株打顶诱导烟碱生物合成过程[D]. 程广伟.河南农业大学 2013
[8]桑树干旱胁迫转录组测序和P5CS基因的克隆及表达分析[D]. 童伟.江苏科技大学 2013
[9]农杆菌介导巨桉无性系Eg5遗传转化的研究[D]. 郭利军.中国林业科学研究院 2012
[10]罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究[D]. 高菊.广西大学 2004
本文编号：3151574
【文章来源】：东北林业大学黑龙江省 211工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：68 页
【学位级别】：硕士
【文章目录】：
摘要
Abstract
1 绪论
1.1 林木遗传转化研究进展
1.1.1 遗传转化的方法
1.1.2 转化植株的鉴定
1.2 MYB和NAC转录因子家族研究进展
1.3 干旱胁迫下基因表达及代谢产物的研究进展
1.3.1 林木抗旱基因
1.3.2 干旱胁迫下林木代谢物质的变化
1.4 目的与意义
1.5 技术路线
2 长白落叶松瞬时遗传转化体系建立
2.1 材料与方法
2.1.1 植物材料
2.1.2 菌株与载体材料
2.2 试剂与药品配制
2.2.1 试剂
2.2.2 药品配制
2.3 主要仪器设备
2.4 试验方法
2.4.1 RNA提取
2.4.2 cDNA合成
2.4.3 基因克隆
2.4.4 植物过表达载体构建
2.4.5 植物抑制表达载体构建
2.4.6 长白落叶松瞬时遗传转化体系构建
2.4.7 数据处理与分析
2.5 结果与分析
2.5.1 基因克隆
2.5.2 载体构建
2.5.3 长白落叶松瞬时遗传转化体系构建
2.5.4 小结
3 长白落叶松瞬时遗传转化植株抗旱性分析
3.1 试验材料
3.1.1 植物材料
3.1.2 菌株与载体材料
3.2 试剂与药品配置
3.2.1 试剂
3.2.2 药品配置
3.3 主要仪器设备
3.4 试验方法
3.4.1 PEG模拟干旱胁迫
3.4.2 瞬时遗传转化植株基因表达量测定
3.4.3 PEG胁迫转基因植株生理生化指标分析
3.4.4 数据处理与分析
3.5 结果与分析
3.5.1 PEG胁迫下植株的基因表达量分析
3.5.2 PEG胁迫下植株的生理生化指标分析
3.5.3 小结
4 PEG胁迫转基因长白落叶松转录组及代谢组分析
4.1 试验材料及药品配置
4.2 试验方法
4.2.1 PEG胁迫转基因长白落叶松转录组测序
4.2.2 转基因长白落叶松代谢组测序
4.2.3 数据处理与分析
4.3 结果与分析
4.3.1 PEG胁迫转基因长白落叶松转录组分析
4.3.2 PEG胁迫转基因长白落叶松代谢组分析
4.3.3 小结
讨论
结论
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
【参考文献】：
期刊论文
[1]抗CMV转基因辣椒实时荧光PCR检测方法研究[J]. 罗阿东,王丽平,任艳玲,蔡秋,王艳. 现代农业科技. 2019(05)
[2]板栗非胚性愈伤组织DsRed基因瞬时转化方法建立和优化[J]. 李志,邢宇,房克凤,曹庆芹,秦岭,张卿. 北京农学院学报. 2019(03)
[3]干旱胁迫下长白落叶松的代谢组学分析[J]. 熊欢欢,张含国,张磊,闫闪闪. 东北林业大学学报. 2019(04)
[4]干旱胁迫下外源硒对小麦幼苗抗旱性的影响[J]. 兰敏,尹美强,芦文杰,温银元,孙敏,高志强,郝兴宇. 土壤. 2018(06)
[5]干旱胁迫对2个甘蔗品种生长和生理生化特性的影响[J]. 李健,农艳丰. 安徽农学通报. 2018(21)
[6]基于转录组测序数据分析及高通量GO注释理论的研究[J]. 刘粉香,杨文国,孙勤红. 安徽农业科学. 2018(31)
[7]干旱胁迫对油松生理指标的影响[J]. 任贵军. 辽宁林业科技. 2018(05)
[8]不同家系马尾松苗木对持续干旱的响应[J]. 莫荣海,丁贵杰,罗仙英,陈龙. 森林与环境学报. 2018(04)
[9]基于马尾松干旱转录组的抗旱功能SSR位点分析[J]. 杜明凤,丁贵杰. 林业科学研究. 2018(05)
[10]PCR技术在植物生物学研究中的应用[J]. 李冬洁. 种子科技. 2018(08)
博士论文
[1]敖汉苜蓿小花与种子响应硼胁迫的蛋白质组学与代谢组学分析[D]. 陈玲玲.中国农业大学 2017
[2]高温和干旱胁迫下茶树转录组分析及Histone H1基因的功能鉴定[D]. 王伟东.南京农业大学 2016
[3]胡杨干旱响应转录组及NF-YB基因表达谱[D]. 严东辉.北京林业大学 2013
[4]干旱胁迫下长白落叶松家系变异的研究[D]. 张磊.东北林业大学 2012
[5]细枝木麻黄再生体系及农杆菌介导遗传转化研究[D]. 姜清彬.中国林业科学研究院 2011
硕士论文
[1]香榧体胚发生体系的优化及遗传体系的构建[D]. 龚丽.浙江农林大学 2018
[2]土施四种B族维生素对‘富士’苹果叶片营养及果实品质的影响[D]. 于文章.山东农业大学 2017
[3]长白落叶松体细胞胚胎发生及遗传转化研究[D]. 宋跃.东北林业大学 2017
[4]基于高通量测序的木麻黄转录组分析[D]. 刘海.福建农林大学 2014
[5]木薯干旱胁迫相关R2R3-MYB转录因子MeMYB63的基因特性及启动子分析[D]. 荣晶.海南大学 2014
[6]苹果MYB转录因子家族的生物信息学分析及MdMYB121和MdSIMYB1在非生物胁迫响应中的作用[D]. 曹忠慧.山东农业大学 2013
[7]NtNAC-R1介导烟株打顶诱导烟碱生物合成过程[D]. 程广伟.河南农业大学 2013
[8]桑树干旱胁迫转录组测序和P5CS基因的克隆及表达分析[D]. 童伟.江苏科技大学 2013
[9]农杆菌介导巨桉无性系Eg5遗传转化的研究[D]. 郭利军.中国林业科学研究院 2012
[10]罗汉果的组织培养与农杆菌介导遗传转化体系的建立研究[D]. 高菊.广西大学 2004
本文编号：3151574
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3151574.html
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