苹果蠹蛾细胞色素P450基因CYP332A19和CYP337B19的克隆及表达分析

发布时间：2021-04-21 12:17

　　【目的】本研究旨在通过克隆苹果蠹蛾Cydia pomonella细胞色素P450基因CYP332A19和CYP337B19,并对其进行序列和表达分析,以更好地了解这两个P450基因在植物次生物质解毒方面的作用,为进一步的功能研究提供依据。【方法】采用本地BLAST搜索苹果蠹蛾转录组数据库获得细胞色素P450基因cDNA序列,采用RT-PCR技术克隆目的基因的编码区。利用生物信息学软件分析目的基因的序列特征及与其他近缘物种的P450基因的系统进化关系。采用RT-qPCR技术测定目的基因在苹果蠹蛾不同发育阶段（卵、1-5龄幼虫、蛹和成虫）、4龄幼虫不同组织（头部、表皮、脂肪体、中肠和马氏管）以及4龄幼虫分别取食添加0.1%香豆素和0.5%槲皮素的人工饲料2 d后的表达水平。【结果】克隆获得苹果蠹蛾细胞色素P450基因CYP332A19（GenBank登录号:MF574708）和CYP337B19（GenBank登录号:MF574697）的全长cDNA序列,开放阅读框（ORF）分别长1 518和1 491 bp,分别编码505和496个氨基酸,其蛋白质分子量分别为58.586和57.734 ... 

【文章来源】：昆虫学报. 2020,63(08)北大核心CSCD

【文章页数】：11 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 供试昆虫
    1.2 供试药剂
    1.3 基因克隆、测序和鉴定
    1.4 基因序列分析
    1.5 CYP332A19和CYP337B19基因表达水平分析
    1.6 数据分析
2 结果
    2.1 苹果蠹蛾CYP332A19和CYP337B19基因的克隆及序列分析
    2.2 苹果蠹蛾CYP332A19和CYP337B19基因的系统发育
    2.3 CYP332A19和CYP337B19在苹果蠹蛾不同发育阶段的表达模式
    2.4 CYP332A19和CYP337B19在苹果蠹蛾中的组织特异性表达模式
    2.5 植物次生物质处理后苹果蠹蛾CYP332A19和CYP337B19基因的表达水平
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]苹果蠹蛾在辽宁省彰武县梨树上的发生规律[J]. 房阳,蔡明,可欣,邢竣策,杨雪清,王小奇.  植物保护学报. 2018(04)
[2]飞蝗细胞色素P450基因LmCYP6FD3的表达及其在杀虫剂解毒中的作用[J]. 朱文雅,吴海花,张学尧,刘娇,张建珍,马恩波.  昆虫学报. 2017(07)
[3]人工饲料对苹果蠹蛾颗粒体病毒产量的影响[J]. 刘国锋,樊江斌,吴正伟,梁召俊,王敦.  西北农业学报. 2016(07)
[4]苹果蠹蛾β-actin基因cDNA的克隆、序列分析及mRNA表达稳定性检测[J]. 杨雪清,张雅林.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2014(11)
[5]6种植物次生物质对斜纹夜蛾解毒酶活性的影响[J]. 王瑞龙,孙玉林,梁笑婷,宋圆圆,苏贻娟,朱克岩,曾任森.  生态学报. 2012(16)
[6]入侵生物苹果蠹蛾监测与防控技术研究——公益性行业（农业）科研专项（200903042）进展[J]. 张润志,王福祥,张雅林,陈汉杰,罗进仓,王勤英,刘万学,艾尼瓦尔·木沙,蒲崇建,严勇敢,郭静敏,刘星月,陈继光,张增幅,杨森,许建军,崔艮中,徐婧.  应用昆虫学报. 2012(01)
[7]植物源次生代谢物质的杀虫作用机制[J]. 邓鸿飞,桑晓清,周利娟.  世界农药. 2011(03)
[8]寄主植物信息化合物对苹果蠹蛾行为的影响及其在防控中的应用[J]. 周文,刘万学,万方浩,申建茹.  应用生态学报. 2010(09)
[9]植物次生代谢物质和害虫防治[J]. 徐正浩,崔绍荣,何勇,李迪,赵明,张旭,余柳青.  植物保护. 2004(04)
[10]细胞色素P450在植物与昆虫相互关系中的作用[J]. 邱星辉,冷欣夫.  昆虫知识. 2002(01)

博士论文
[1]苹果蠹蛾解毒酶基因的克隆及功能研究[D]. 杨雪清.西北农林科技大学 2014



本文编号：3151741