Hras12V转基因雌鼠肝肿瘤来源的巨噬细胞系建立

发布时间：2021-04-22 17:24

　　目的:建立Hras12V转基因雌鼠肝肿瘤组织来源的永生化巨噬细胞系,为探究肿瘤相关巨噬细胞对肿瘤发生发展的影响提供良好的实验工具。方法:1.选用Hras12V转基因雌鼠1只,在无菌的条件下,正常解剖采集肝肿瘤组织,用组织块培养法获得细胞克隆团,后经过60次连续传代培养,成功建立巨噬细胞系,命名为FMHRL10。2.PCR法检测基因组DNA,鉴定FMHRL10的来源;蛋白质印迹法检测FMHRL10的信号分子表达和活化水平与来源小鼠的肝癌组织的差异。3.采用Cell Counting Kit-8染色,利用酶标仪检测细胞生长值,绘制细胞生长曲线图。4.采用细胞周期和凋亡试剂盒,检测FMHRL10的细胞周期和凋亡情况。5.姬姆萨染色法进行FMHRL10的形态学分析。6.流式细胞术检测FMHRL10的细胞类型。7.采用吞噬作用测定试剂盒（Phagocytosis Assay Kit）检测FMHRL10的吞噬能力。8.用Western blot和RT-q PCR的方法,比较FMHRL10与小鼠单核巨噬细胞白血病细胞RAW264.7的异同。9.用裸鼠检测FMHRL10的体内成瘤性。10.用细胞凋亡试... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：57 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
中文摘要
英文摘要
前言
材料和方法
    1.材料
    2.方法
结果
    1.FMHRL10 肝肿瘤来源巨噬细胞系的初步建立
    2.FMHRL10 细胞系的基因型鉴定
    3.FMHRL10 细胞信号通路活化水平的检测
    4.FMHRL10 细胞相关的细胞生物学分析
    5.FMHRL10 细胞的巨噬细胞特性检测
    6.FMHRL10 细胞的吞噬能力检测
    7.FMHRL10和RAW264.7 信号通路活性及基因表达的比较
    8.FMHRL10 细胞的裸鼠体内成瘤性检测
    9.FMHRL10 分泌物对肿瘤细胞的影响
    10.FMHRL10 细胞对体内肝肿瘤细胞成瘤性的影响
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】：
期刊论文
[1]实验动物从业人员培训系统的建立与应用[J]. 林凯丽,刘梅轩,孙井江,潘思丹,高虹.  中国比较医学杂志. 2018(05)
[2]改良酚-氯仿法提取及不同试剂盒扩增检测陈旧性人骨DNA[J]. 张玥,徐国昌,徐凯,王友政,任甫,李红卫.  重庆医科大学学报. 2015(08)



本文编号：3154168