OVOL2通过下调NF-KB信号通路及其下游靶基因MMP9抑制EMT

发布时间：2021-04-27 01:54

　　ovo12作为一个转录因子,在乳腺癌、结直肠癌等肿瘤的发生发展中都起到了重要的作用。但是作为全球发病率排名前十的肝癌,ovo12在其中的作用研究相对比较少。我们在实验中发现ovo12在肝癌细胞中的表达量要比正常细胞中少。并且ovo12可以抑制肝癌细胞中基质金属蛋白酶9（MMP9）的表达。MMP9可以降解四型胶原,降解细胞外基质,在癌症的浸润和转移中有重要作用。通过细胞划痕和transwell实验以及对EMT相关因子的检测,我们证实了 ovo12会抑制肝癌细胞的EMT过程。考虑到NF-κB可以与MMP9的启动子直接结合,以及对EMT的调节作用。我们猜想ovol2会不会是通过NF-κB信号通路来影响EMT过程。于是我们展开进一步的研究,通过luc实验,我们证实了 ovol2对TNF-α激活的NF-κB信号有明显的抑制作用,并且对NF-κB的下游靶基因也有明显下调。我们继而想探索ovo12影响NF-κB的机理。在研究NF-κB的众多文章都表明,P65是经典通路中的核心蛋白。通过免疫共沉淀实验我们证实了 ovol2可以与P65相互作用。本篇文章主要阐明了 ovol2可能是通过与P65相互作用,... 

【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
ABSTRACT
第一章
    1.1 NF-κB信号通路
        1.1.1 NF-κB信号通路简述
        1.1.2 经典与非经典信号通路
        1.1.3 NF-κB蛋白家族
        1.1.4 NF-κB与肿瘤
    1.2 EMT
        1.2.1 EMT简述
        1.2.2 EMT与肿瘤的关系
        1.2.3 影响EMT的因素
    1.3 ovol2
        1.3.1 ovo基因的发现
        1.3.2 ovo蛋白家族成员
        1.3.3 ovol2蛋白的结构与功能
    1.4 MMP9
第二章 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 细胞系和菌种
        2.1.2 试剂药品
        2.1.3 抗体
        2.1.4 溶液配制
    2.2 实验方法操作
        2.2.1 细胞相关实验方法
        2.2.2 蛋白与核酸相关实验方法
第三章 结果与分析
    3.1 ovo12抑制肝癌细胞的EMT进程
        3.1.1 Ovol2在肝癌细胞中的表达量低于正常肝细胞
        3.1.2 ovol2抑制mmp9的表达
        3.1.3 ovol2抑制肝癌细胞迁移和侵袭
        3.1.4 ovol2对上皮/间质标志因子的影响
    3.2 ovol2抑制NF-KB信号通路
        3.2.1 Ovol2抑制NFKB luc活性
        3.2.2 ovol2抑制NFKB下游靶基因
        3.2.3 ovol2与P65结合
        3.2.4 ovol2与P52结合
第四章 讨论
参考文献
致谢



本文编号：3162537