黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2参与C9醛类香气合成功能的初步研究

发布时间：2021-04-29 18:35

　　独特的芳香气味是黄瓜的重要特色。在黄瓜的主体香气成分中,C6和C9醛及相应的醇类具备不同的香气特征,其含量及比例对黄瓜果实风味有重要的影响。脂氧合酶（Lipoxygenase,LOX）是黄瓜果实醛类香气形成过程上游的第一个关键酶,其对游离的脂肪酸的催化位置决定了黄瓜果实中C6、C9醛的含量高低。前期的研究发现,在黄瓜果实中表达的LOXs基因有12个,但哪一个成员参与到C9醛类的产生尚不明晰,因此,本试验在结合黄瓜果实不同发育时期醛类香气含量以及不同CsLOXs的表达模式的基础上,推测CsLOX2基因（C9型）参与到C9醛的合成中,并对CsLOX2基因的功能进行了初步研究,得到以下结论:1.对黄瓜果实发育进程中的C6和C9醛类物质含量的变化进行了分析结果表明,C6、C9醛和相应醇的含量在果实发育前期（0⁶ d）含量较高,花后8 d显著下降;其中C6醛和相应的醇在果实发育前期（0⁸ d）含量较高,占总醛类的12%²3%,而在果实发育的后期（10¹4 d）C9醛和相应的醇含量较高,占总醛类物质的95%左右... 

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
第一章 文献综述
    1.1 脂氧合酶的结构和性质
    1.2 黄瓜果实中的芳香物质成分及合成途径
        1.2.1 黄瓜果实中的芳香物质
        1.2.2 黄瓜果实芳香物质的合成途径
    1.3 植物体内脂氧合酶的生理功能
        1.3.1 脂氧合酶参与果实挥发物质的形成
        1.3.2 脂氧合酶参与植物成熟衰老的过程
        1.3.3 脂氧合酶参与植物抗病抗逆过程
        1.3.4 脂氧合酶参与植物发育的其他过程
        1.3.5 黄瓜脂氧合酶研究现状
    1.4 研究目的与意义
第二章 黄瓜果实不同发育时期CsLOXs表达模式和C6、C9醛类含量分析
    2.1 材料与方法
        2.1.1 材料
        2.1.2 试剂及仪器
        2.1.3 方法
    2.2 结果与分析
        2.2.1 黄瓜果实不同发育时期C6醛和C9醛含量分析
        2.2.2 黄瓜果实不同发育时期CsLOXs基因的表达量分析
        2.2.3 黄瓜果实不同发育时期CsLOXs基因表达与香气物质含量的关系
    2.3 讨论
    2.4 小结
第三章 黄瓜脂氧合酶基因CsLOX2的克隆和表达载体的构建及遗传转化
    3.1 材料
    3.2 方法
        3.2.1 表达载体的构建
        3.2.2 农杆菌的转化
        3.2.3 过表达载体pB2HA-CsLOX2对黄瓜的遗传转化
        3.2.4 干扰载体pART27-CsLOX2RNAi对黄瓜的遗传转化
    3.3 结果
        3.3.1 PMD19-T载体的连接
        3.3.2 CsLOX2过表达载体的构建
        3.3.3 Cs LOX2 干扰载体的构建
        3.3.4 农杆菌的转化
        3.3.5 过表达载体对黄瓜的遗传转化
    3.4 讨论
    3.5 小结
第四章 黄瓜CsLOX2原核表达载体构建及蛋白诱导
    4.1 载体和试剂
        4.1.1 载体和菌株
        4.1.2 试剂
    4.2 方法
        4.2.1 引物设计及目的片段扩增
        4.2.2 目的片段和表达载体PET-32a(+)双酶切
        4.2.3 T4连接基因片段和表达载体
        4.2.4 重组质粒转化DH5α感受态
        4.2.5 重组质粒转化至表达菌株BL
        4.2.6 重组蛋白的诱导
    4.3 结果
        4.3.1 重组质粒32a-CsLOX2的构建及转化
        4.3.2 重组蛋白的诱导
    4.4 讨论
    4.5 小结
第五章 结论
参考文献
致谢
作者简介


【参考文献】：
期刊论文
[1]过量表达蔗糖转运蛋白基因增强转基因小麦的耐旱性[J]. 胡梦芸,李辉,庞建周,刘茜,张颖君,孙丽静.  中国农业科学. 2015(08)
[2]不同基因型黄瓜果实芳香物质组成及含量差异研究[J]. 郝丽宁,陈书霞,王聪颖,陈巧,万旭花,申晓青,程智慧,孟焕文.  西北农林科技大学学报(自然科学版). 2013(06)
[3]RNA干扰载体构建方法的研究进展[J]. 粟挺,刘爱玲,陈信波.  湖南农业科学. 2011(19)
[4]果实香气成分及其形成研究进展[J]. 魏长宾,刘胜辉,臧小平,孙光明.  热带农业科学. 2009(03)
[5]日光温室黄瓜发育过程中主要芳香物质和脂肪酸含量的变化[J]. 徐坤范,王明林,艾希珍.  西北植物学报. 2009(02)
[6]黄瓜果实脂氧合酶活性测定方法的建立[J]. 李强,吴晓露,李红伟,杭梅,李旗峰,朱丹.  东北农业大学学报. 2008(05)
[7]热水预处理对草莓果实采后生理与品质的影响[J]. 杜正顺,巩惠芳,汪良驹,李百健.  江西农业学报. 2008(01)
[8]1-MCP处理对黄花梨果实采后生理的影响[J]. 李志强,汪良驹,王中华.  西北植物学报. 2007(11)
[9]水稻中以亚麻酸为底物的脂氧合酶活性测定[J]. 姚锋先,曾晓春,蒋海燕,方加海,吴晓玉.  江西农业大学学报. 2006(02)
[10]黄瓜芳香物质的研究进展[J]. 刘春香,何启伟.  园艺学报. 2004(02)

博士论文
[1]黄瓜风味品质的构成因素及部分因素遗传参数的研究[D]. 刘春香.山东农业大学 2003



本文编号：3167967