还脑益聪方提取物含药血清对APP/PS1双基因转染细胞γ分泌酶活性及相关蛋白表达的影响

发布时间：2021-05-10 19:42

　　目的观察中药复方-还脑益聪方提取物（Huannao Yicong decoction,HYD）含药血清对β-淀粉样前蛋白swe基因（APPswe）人类早老素（PSEN1d E9,PS1）和早老蛋白1d E9基因（PSEN1d E9）人鼠淀粉样前蛋白融合体（APPswe,APP）双基因转染人胚肾293（human embryonic kidney 293,HEK293）细胞γ分泌酶活性及相关蛋白的影响,分析含药血清影响γ分泌酶活性相关蛋白的作用机制。方法以人APP/PS1双基因转染（HEK293）人胚肾细胞株为载体,将其分为5组,分别为空白组,7.5%HYD含药血清组,15%HYD含药血清组,HYD直接给药组,γ分泌酶抑制剂-DAPT组,复苏传代后采用细胞计数试剂盒CCK-8（cell counting kit-8,CCK-8）法检测HYD含药血清（大鼠灌胃10 d,取血清并进行血药成分检测）对人APP/PS1双基因转染细胞的生长活力和超微结构的影响;透射电镜观察各组细胞超微结构;双荧光素酶基因检测γ分泌酶活性;蛋白质印迹法（Western blot）检测γ分泌酶组件及相关蛋白早老素1（... 

【文章来源】：中国药理学通报. 2017,33(03)北大核心CSCD

【文章页数】：10 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 动物、细胞株与药物
    1.2 细胞的体外培养与传代
    1.3 含药血清的制备
    1.4 分组与给药
    1.5 透射电镜观察
    1.6 γ分泌酶活性检测
    1.7 Western blot检测
    1.8 统计学方法
2 结果
    2.1 HYD有效组分测定
    2.2 不同浓度HYD含药血清对细胞株活性的影响
    2.3 HYD含药血清对γ分泌酶活性的影响
    2.4 HYD含药血清对γ分泌酶相关组件表达的影响
        2.4.1 HYD含药血清对人APP/PS1双基因转染细胞株PS1蛋白表达电泳图的影响
        2.4.2 HYD含药血清对人APP/PS1双基因转染细胞株CHIP蛋白表达灰度值的影响
        2.4.3 HYD含药血清对人APP/PS1双基因转染细胞株CDC42蛋白表达灰度值的影响
        2.4.4 HYD含药血清对人APP/PS1双基因转染细胞株Aph-1α蛋白表达灰度值的影响
        2.4.5 HYD含药血清对人APP/PS1双基因转染细胞株HIF-1α蛋白表达灰度值的影响
    2.5 APP/PS1双基因转染细胞株超微结构的改变
        2.5.1线粒体
        2.5.2 脂褐素
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]大黄及大黄蒽醌类有效成分对胰腺腺泡细胞损伤的保护作用[J]. 吴丽,徐春蕾,季易彦,蔡宝昌.  中药新药与临床药理. 2014(05)
[2]还脑益聪方提取物对淀粉样前体蛋白/早老蛋白1双转基因痴呆模型小鼠学习记忆能力的改善作用及其机制[J]. 刘美霞,刘剑刚,李浩,刘龙涛,梁琳,胡佳,魏芸.  中国药理学与毒理学杂志. 2014(01)
[3]γ-分泌酶、淀粉样前体蛋白和早老蛋白1在阿尔采末病中相关性的研究进展[J]. 韦云,刘剑刚,李浩,唐旭东.  中国药理学通报. 2014(02)
[4]还脑益聪方对快速老化小鼠脑组织氧化应激及炎性因子的影响[J]. 田芳,梁琳,刘剑刚,李浩.  北京中医药大学学报. 2013(11)
[5]盐酸小檗碱含药血清与血浆抗鼻咽癌CNE-1细胞作用的比较分析[J]. 李彩虹,彭罡,李锦云,王效军,徐德峰,周克元.  医学研究生学报. 2013(07)
[6]还脑益聪方提取物对APP转基因小鼠脑组织Aβ生成相关因子和学习记忆行为的影响[J]. 李浩,刘明芳,刘剑刚,刘龙涛,官杰,蔡琳琳,胡佳,魏芸.  中国中西医结合杂志. 2013(01)
[7]原人参三醇组皂苷和人参皂苷-Re对MPP+诱导的SH-SY5Y细胞损伤的保护作用[J]. 李东薇,窦德强.  神经药理学报. 2011(05)
[8]含二苯乙烯苷大鼠血清对NG108-15痴呆模型细胞的影响[J]. 黄忠仕,谢海源,张树球,李韬,农嵩,李曙波.  中国药房. 2009(25)
[9]健康大鼠服用益肾通络方后血清中阿魏酸的RP-HPLC测定[J]. 金红,李雅,凌晓,杨智,卢岳华.  湖南师范大学学报(医学版). 2007(04)



本文编号：3179947