自噬相关基因-7缺陷对肺泡Ⅱ型细胞功能及板层小体的形成影响的初步研究

发布时间：2021-05-12 08:21

　　目的:自噬是一种存在于所有真核细胞中,进化上高度保守的溶酶体依赖的物质降解过程;主要通过包裹细胞内异常蛋白质和受损细胞器等“废旧物”后形成自噬小体,再与溶酶体融合形成自噬溶酶体,进行物质的降解,而后将分解的产物进行回收利用。近年来研究发现,自噬缺陷可导致某些肺组织疾病的发生。我们课题组前期工作发现:与同窝对照组相比,自噬相关基因-7（Autophagy-related gene 7,Atg7）全身敲除小鼠体积明显减轻、发绀、呼吸困难并在出生12h内死亡等现象。这些表型与临床上新生儿呼吸窘迫综合征患者极为相似。肺泡II型（alveolar type II,ATII）细胞分泌到肺泡腔的肺表面活性物质（pulmonary surfactant,PS）减少,而在ATII细胞中合成、储存和分泌PS的细胞器正是板层小体（lamellar bodies,LBs）。本次实验主要研究自噬的缺陷对ATII细胞及其特异细胞器LBs的影响。然而Atg7全身敲除小鼠在出生后不久死亡,所以我们繁育出支气管肺泡上皮特异性Atg7缺陷小鼠(Atg7^SPC),并对其出生第1天内（P0）和90天（P... 

【文章来源】：中国医科大学辽宁省

【文章页数】：49 页

【学位级别】：硕士

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摘要
Abstract
英语缩略词
1前言
2 材料与方法
    2.1 实验材料
        2.1.1 抗体
        2.1.2 主要试剂及试剂盒
        2.1.3 主要仪器设备
    2.2 实验方法
        2.2.1 小鼠模型
        2.2.2 小鼠基因型鉴定
        2.2.3 q RT PCR
        2.2.4 免疫印迹(Western Blot)
        2.2.5 小鼠肺组织的取材与石蜡切片的制备
        2.2.6 HE染色
        2.2.7 免疫组化
        2.2.8 电镜
        2.2.9 Masson染色
        2.2.10 生化分析仪
        2.2.11 数据分析
3 实验结果
    3.1 支气管肺泡上皮特异性Atg7缺陷小鼠模型及验证
    3.2 Atg7~(SPC)新生小鼠(P0)肺泡壁增厚和肺泡腔面积减少
    3.3 Atg7~(SPC)新生小鼠ATII细胞的功能异常,板层小体变小
    3.4 Atg7~(SPC)小鼠(P90)肺泡壁增厚和肺泡腔面积减少
    3.5 Atg7~(SPC)小鼠(P90)ATII细胞增生、肥大,板层小体异常增大
    3.6 Atg7~(SPC)小鼠(P90)肺功能无明显变化,肺部组织纤维化程度无明显差异
    3.7 小鼠肺泡II型细胞和板层小体的模式图
4 讨论
本研究创新性的自我评价
参考文献
综述
    参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
个人简历



本文编号：3183080