油菜Oleosin基因启动子的克

发布时间：2021-05-19 02:38

　　以甘蓝型油菜幼苗为材料,根据油脂蛋白Oleosin（O20）基因的启动子序列设计引物,PCR扩增了长度为935 bp的片段,把该片段连接到pBI101载体,GUS瞬时染色结果表明,该片段可以驱动GUS基因在油菜幼苗根部特异性表达。油菜油脂蛋白是一个蛋白质家族,为进一步鉴别扩增到的935 bp油脂蛋白启动子,该研究利用油菜基因组信息进行序列对比,结果表明935 bp的启动子和Oleosin（O20）的启动子序列之间有较多的变异,但和油菜1号染色体上的序列完全一致;1号染色体上紧跟的编码框序列和油脂蛋白Oleosin（O20）的编码框序列也完全一致,但油脂蛋白Oleosin（O20）的基因组序列要比油菜1号染色体的基因组序列短。通过PLACE和PlantCARE软件对935 bp启动子进行了扫描预测,结果表明该启动子中含有许多顺式作用元件,尤其是脱落酸、茉莉酸甲酯和水杨酸这3个与激素有关的元件;将该研究扩增到的另一个928 bp长度的启动子与935 bp的启动子相比,前者启动子区域水杨酸顺式作用元件缺少了1个碱基,同时也缺失了1个碱基的片段,这些序列的变化可能是该启动子丧失活力的原因。 

【文章来源】：安徽农业科学. 2020,48(22)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 菌株和载体
    1.2 试剂
    1.3 油菜总DNA的提取
    1.4 Oleosin启动子的扩增与相关载体的构建
        1.4.1 Oleosin启动子的扩增。
        1.4.2 重组表达载体的构建。
    1.5 重组质粒的筛选和转化
    1.6 农杆菌介导油菜愈伤组织的转化
    1.7 GUS染色与瞬时表达
2 结果与分析
    2.1 Oleosin基因启动子的扩增
    2.2 Oleosin基因启动子序列比对
    2.3 GUS基因瞬时表达检测
    2.4 油菜启动子中的顺式作用元件
3 结论与讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]植物油质蛋白的结构、功能及应用[J]. 孙静,姜宇,陶俊.  植物生理学报. 2018(03)
[2]谷子Oleosin基因家族及其对干旱响应的分析[J]. 蒋茂双,元香梅,刘晓东,候蕊,苏彦冰,郭展,于世慧,李红英.  山西农业大学学报(自然科学版). 2018(01)
[3]植物生物反应器研究进展[J]. 庞俊峰,黄东光,吴燕民.  生物技术通报. 2011(01)
[4]植物油体表达体系的研究进展[J]. 刘昱辉,贾士荣.  农业生物技术学报. 2003(05)

博士论文
[1]植物油体表达体系的建立及Profilin2维管束特异表达启动子的区段缺失分析[D]. 刘昱辉.中国农业科学院 2001

硕士论文
[1]利用油菜油体系统表达重组人胰岛素原的研究[D]. 张冉.上海师范大学 2010



本文编号：3194951