消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的分子机制

发布时间：2021-05-20 12:32

　　目的观察消岩汤对WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖的抑制作用,以及WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 mRNA和蛋白水平变化,探索消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲降的MCF-7细胞增殖的分子机制。方法 WISP2/CCN5 shRNA慢病毒质粒转染MCF-7细胞,构建WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞系,采用高、中、低浓度的消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞24、36及48 h后,检测细胞增殖抑制率、WISP2/CCN5、Skp2及p27Kip1的mRNA和蛋白水平。结果 WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖抑制率低于空白组和空载组（P<0.05）,消岩汤干预组细胞增殖抑制率高于WISP2/CCN5基因敲减组（P<0.05）;高浓度消岩汤孵育WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞48 h组细胞增殖抑制率高于相同浓度孵育24 h组（P<0.05）。WISP2/CCN5基因敲减组Skp2 mRNA和蛋白水平均高于空白组和空载组（P<0.05,P<0.05）,而p27Kip1 mRNA... 

【文章来源】：广东医学. 2020,41(19)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞株
    1.2 实验药物
    1.3 试剂
    1.4 方法
        1.4.1 MCF-7细胞培养
        1.4.2 病毒转染构建WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞
        1.4.3 消岩汤颗粒剂溶解液配制和溶解
        1.4.4 MTT法观察消岩汤对MCF-7细胞增殖的抑制作用
        1.4.5 荧光定量RT-PCR法检测相关因子mRNA水平
        1.4.6 采用Western blot检测相关因子蛋白水平
    1.5 统计学方法
2 结果
    2.1 消岩汤抑制WISP2/CCN5基因敲减的MCF-7细胞增殖,并与消岩汤浓度和作用时间相关
    2.2 消岩汤在mRNA水平对WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1 的调控作用
    2.3 消岩汤在蛋白水平对WISP2/CCN5、Skp2和p27Kip1的调控作用
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[7]Skp2和p27Kip1表达异常与乳腺癌发生及临床病理特征的相关性研究[J]. 吕艳,牛昀,丁秀敏,肖绪祺.  诊断病理学杂志. 2015(07)
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本文编号：3197760