ECE-1基因启动子甲基化调控AKT/eNOS通路对心肌肥厚的影响

发布时间：2021-05-21 14:57

　　目的探讨压力超负荷心肌肥厚大鼠内皮素转换酶-1（ECE-1）基因启动子的甲基化状态及其调控蛋白激酶B/内皮型一氧化氮合酶（AKT/eNOS）信号通路促进心肌肥厚发病的机制。方法雄性SD大鼠30只随机分成空白组、假手术组、实验组,每组10只。实验组通过腹主动脉缩窄术构建压力超负荷心肌肥厚模型,假手术组分离动脉但不结扎,空白组不手术;第43天检测心重比、心脏超声、心肌形态学改变; RT-qPCR检测心房利钠肽（ANP）和脑利钠肽（BNP）含量;免疫组化法检测ECE-1在心肌组织中的表达;MSP法检测ECE-1基因甲基化状态;Western blot法检测ECE-1、p-AKT、p-eNOS等表达。结果与假手术组比,实验组心重比、左室舒末后壁厚度增加,左室射血分数、左室短轴收缩率减小,形态学观察到实验组心肌明显肥厚（P<0.01）,ANP和BNP mRNA表达升高（P<0.01）。与假手术组比,实验组大鼠心肌组织中ECE-1在细胞质表达上调（P<0.01）;存在ECE-1非甲基化大鼠的ECE-1蛋白表达上调,p-AKT和p-eNOS蛋白表达下调（P<0.01）。结论压... 

【文章来源】：新疆医科大学学报. 2020,43(10)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 实验动物
    1.2 主要试剂和仪器
    1.3 主要方法
        1.3.1 心肌肥厚模型的构建
        1.3.2 心重比的测定
        1.3.3 心脏超声检测
        1.3.4 心肌组织HE染色
        1.3.5 RT-qPCR 以Trizol
        1.3.6 免疫组化
        1.3.7 MSP法
        1.3.8 Western blot
    1.4 统计学处理
2 结果
    2.1 心肌肥厚模型鉴定
        2.1.1 大鼠心重比的变化
        2.1.2 大鼠心脏超声检查结果
        2.1.3 大鼠心肌组织的形态学改变
        2.1.4 大鼠心肌组织ANP、BNP改变
    2.2 大鼠心肌组织中ECE-1的定位及表达改变
    2.3 大鼠心肌组织中ECE-1基因启动子甲基化状态改变
    2.4 非甲基化大鼠心肌组织中ECE-1、AKT/eNOS相关蛋白表达改变
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]5-氮杂胞苷逆转SARI基因甲基化对人乳腺癌细胞生长和侵袭的影响[J]. 朱文斌,蒋瑞雪,陈绍仁,胡芳,刘继鑫,孙艳宏,姚淑娟,吕丽艳,张畅,孙艳,张春晶.  中国病理生理杂志. 2019(10)
[2]DNA甲基化与原发性高血压关系的研究进展[J]. 刘东芳,杨志甫,刘丹,陈丽珠,张柱.  中华老年心脑血管病杂志. 2019(10)
[3]扎考比利改善压力超负荷致大鼠心室重构的作用[J]. 刘成芳,任芳芳,和荣丽,张卫国,皇甫平,吴博威.  中国病理生理杂志. 2019(02)
[4]哈萨克族原发性高血压病患者全血DNA甲基化位点筛查及异常甲基化谱的构建[J]. 由淑萍,从美丽,倪国华,詹怀峰,王红军,金晶,马登娥,叶力夏提,赵志强,蒋红,刘涛.  中国全科医学. 2017(06)



本文编号：3199909