藏系绵羊复胃差异表达基因的筛选及功能分析

发布时间：2021-05-22 06:50

　　为阐明藏绵羊瘤胃、网胃、瓣胃与皱胃功能差异的分子机理,试验以藏绵羊为研究对象,采用抑制消减杂交法筛选藏绵羊瘤胃、网胃、瓣胃与皱胃差异表达基因并进行生物信息学分析。结果表明:成功构建了6个藏绵羊瘤胃、网胃、瓣胃与皱胃差异表达的正反向消减c DNA文库;得到了皱胃特异表达的30个EST片段,瘤胃、网胃、瓣胃特异表达的10个EST片段。经Blast X对比发现5个EST片段与已知基因具有较高的序列相似性,且都在皱胃中特异表达。其中胃蛋白酶A、Napsin-A参与蛋白质水解;胃溶菌酶参与菌体蛋白的消化过程;胃饥饿激素调节食欲且促进相关消化酶分泌;锌指蛋白调节胃酸分泌。说明皱胃具有真正的消化功能,而瘤胃、网胃、瓣胃不能分泌消化酶。瘤胃能利用微生物将摄入的饲草发酵分解成小颗粒物质,网胃、瓣胃起筛滤作用。 

【文章来源】：黑龙江畜牧兽医. 2017,(13)北大核心

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料
    1.1 试验动物
    1.2 主要试剂
    1.3 主要仪器
2 方法
    2.1 引物的设计及合成
    2.2 总RNA的提取及检测
    2.3 双链c DNA的合成
    2.4 抑制消减杂交
    2.5 消减文库的建立、阳性克隆的筛选、序列测定与分析
3 结果与分析
    3.1 总RNA完整性检测结果
    3.2 RsaⅠ酶切效率及接头连接效率检测
    3.3 第二轮PCR产物检测
    3.4 消减文库随机c DNA片段PCR检测
    3.5 差异表达序列的测定和初步分析
4 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]藏山羊瓣胃溶菌酶基因TGOLyz的克隆及组织表达分析[J]. 张鹏,江明锋,马晓瑞,方毅,王永.  华北农学报. 2013(03)
[2]草地藏系绵羊贾洛类群生产性能研究[J]. 吴锦波,王永,傅昌秀,杨虎林,程鉴,刘鲁蜀.  西南民族大学学报(自然科学版). 2009(02)
[3]锌指蛋白结构和功能研究进展[J]. 余晓丹.  国外医学(卫生学分册). 2004(03)



本文编号：3201187