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温肾健脾法对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织TLR/IL-1信号通路调控因子基因表达影响的研究

发布时间:2021-05-22 19:37
  目的采用“病-证”结合的方法制作脾肾阳虚型溃疡性结肠炎动物模型,从分子和激素水平探讨中医“脾肾阳虚”证的现代科学物质基础。采用温肾健脾法代表方剂四神丸对大鼠进行干预,通过观察大鼠症状、结肠粘膜并检测相关指标,明确温肾健脾法对UC的治疗作用。观察大鼠结肠组织中Toll样受体/白细胞介素-1(TLR/IL-1)信号通路正、负性调控因子基因表达在给药前后的变化,从而揭示温肾健脾法防治溃疡性结肠炎的部分作用机理。方法采用三硝基苯磺酸灌肠,叠加番泻叶灌胃、氢化可的松腹腔注射的方法建立脾肾阳虚型UC大鼠模型,给予四神丸进行干预治疗,用西药柳氮磺胺嘧啶进行对照。观察大鼠的一般状态和症状,结肠粘膜肉眼及光镜观察,并采用放射免疫(RIA)法检测血清相关生化指标如T、FT3、FT4、IgE、IL-2,对“病-证”结合动物模型进行评判。采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测大鼠结肠组织TLR/IL-1信号通路正、负性调控因子TLR4、IRAK-M、Tollip mRNA的相对表达量。结果①动物模型评判指标的结果:模型组大鼠症状积分显著高于空白组(p<0.01),结肠组织肉眼评分明显高于空白... 

【文章来源】:甘肃中医药大学甘肃省

【文章页数】:69 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
缩略词表
前言
实验研究
    1 材料
        1.1 动物
        1.2 药物及试剂
        1.3 主要仪器
        1.4 实验场所
    2 方法
        2.1 模型建立及药物制备
        2.2 分组、给药、取材
        2.3 对脾肾阳虚型UC大鼠模型评判指标的检测
            2.3.1 观察模型大鼠的一般状态并症状评分
            2.3.2 肉眼观察模型大鼠结肠病理变化并评分
            2.3.3 光镜观察模型大鼠结肠病理变化
            2.3.4 检测模型大鼠血清相关生化指标
        2.4 RT-qPCR法检测各组大鼠结肠组织中TLR/IL-1 信号通路正、负性调节因子TLR4、IRAK-M、Tollip的基因相对表达量
        2.5 各指标间的相关性分析
        2.6 统计方法
    3 结果
        3.1 对脾肾阳虚型UC大鼠模型评判指标的检测结果
            3.1.1 大鼠一般状态和症状评分
            3.1.2 结肠组织病变肉眼观察及评分
            3.1.3 结肠组织病变光镜观察结果
            3.1.4 模型评判的血清生化指标检测结果
        3.2 大鼠结肠组织TLR/IL-1 信号通路正、负性调节因子TLR4、IRAK-M、Tollip mRNA相对表达量
        3.3 各指标之间的相关性
    4 讨论
        4.1 建模方法讨论
            4.1.1 番泻叶的作用
            4.1.2 氢化可的松的作用
            4.1.3 TNBS的作用
        4.2 脾肾阳虚型UC模型的病理评价
        4.3 脾肾阳虚证的物质基础
        4.4 温肾健脾法对脾肾阳虚型UC的修复作用
        4.5 温肾健脾法防治溃疡性结肠炎的作用机制与TLR/IL-1 信号通路及其正、负性因子基因表达的相关性讨论
            4.5.1 TLR4
            4.5.2 IRAK-M
            4.5.3 Tollip
结语
参考文献
附录
文献综述
    综述一:温肾健脾法防治溃疡性结肠炎的概况
        参考文献
    综述二:现代医学对溃疡性结肠炎发病机制的研究概况
        参考文献
致谢
在学期间主要研究成果


【参考文献】:
期刊论文
[1]四神丸对溃疡性结肠炎模型大鼠血清白细胞介素-1β、-4、肿瘤坏死因子-α的影响[J]. 王燕,曹燕飞,朱向东,荀敏齐,汪斌.  中国老年学杂志. 2015(01)
[2]四神丸对溃疡性结肠炎模型大鼠一氧化氮和氧自由基水平影响的实验研究[J]. 高长玉,王垚,毛颖,高彦宇,柴剑波,李胜志,肖洪彬.  中医药学报. 2014(05)
[3]基于支持向量机的肾阳虚大鼠甲状腺与肾上腺功能的动态分析[J]. 王秀凤,张磊,张琰,唐小娅,罗来成.  时珍国医国药. 2014(08)
[4]健脾温肾法治疗脾肾阳虚型溃疡性结肠炎理论探讨及临证体会[J]. 解秀翠,张怡,代夏欢,朱丹.  四川中医. 2014(08)
[5]肠道细菌感染与炎症性肠病的关系[J]. 邱骅婧,刘占举.  同济大学学报(医学版). 2014(04)
[6]四神丸对溃疡性结肠炎大鼠血清TLR4、TGF-β1及IL-10的影响[J]. 蔺晓源,邓娜,薛玉婷,蔡莹.  中医药导报. 2014(07)
[7]近10年脾肾阳虚证动物模型研究述评[J]. 荀敏奇,李兰珍.  中国中医药信息杂志. 2014(06)
[8]温肾健脾法干预腹泻型肠易激综合征大鼠的实验研究[J]. 苏晓兰,唐艳萍,张静,白亦冰,史海霞,刘燕君,常玉娟,魏玮.  中国中西医结合杂志. 2014(02)
[9]溃疡性结肠炎相关饮食影响及管理研究现状[J]. 韩现红,翟晓萍,戴新娟.  中华护理杂志. 2014(02)
[10]四神丸对溃疡性结肠炎大鼠结肠组织病理形态及血清抗炎、促炎因子平衡的影响[J]. 王燕,朱向东,段永强,李兰珍,曹燕飞,汪斌.  中医研究. 2014(01)

硕士论文
[1]脾肾阳虚慢性咳嗽大鼠模型的研制[D]. 屈娅婷.湖南中医药大学 2012



本文编号:3201557

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