UGT1A1基因野生型和Q239X突变型在cos-7细胞中的表达及功能研究

发布时间：2021-05-24 04:22

　　目的:探讨尿苷二磷酸葡萄糖醛酸转移酶1Al（uridine diphosphate glucuronyltransferase 1A1,UGT1A1）基因野生型和Q239X突变型在非洲绿猴肾细胞（cos-7细胞）中的表达及功能。方法:构建UGT1A1基因野生型过表达、UGT1A1基因Q239X突变型过表达慢病毒载体和阴性慢病毒载体,分别对体外培养的cos-7细胞进行转染。转染72h后,荧光倒置相差显微镜及流式细胞仪观察和检测cos-7细胞的转染效率,用l.Omg/L嘌呤霉素筛选1周得到稳定转染细胞株,采用DNA测序鉴定所构建的稳定转染UGT1A1基因的cos-7细胞株。将cos-7细胞分为5组:空白对照组,阴性慢病毒组,UGT1A1基因野生型组,UGT1A1基因Q239X杂合突变型组,UGT1A1基因Q239X纯合突变型组。PCR、Real-Time PCR和 Western Blot检测各组cos-7细胞中UGT1A1 基因的DNA、mRNA和蛋白表达情况;绘制非结合胆红素的标准曲线,设计两组反应,野生型为对照组,Q239X杂合突变型为实验组,催化非结合胆红素与尿苷二磷酸葡萄糖醛酸（... 

【文章来源】：广西医科大学广西壮族自治区

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
个人简历
中文摘要
英文摘要
前言
    参考文献
第一部分 UGT1A1基因野生型和Q239X突变型过表达慢病毒载体的构建及其稳定转染细胞株的建立
    1. 材料和方法
    2. 实验结果
    3. 讨论
    4. 结论
    参考文献
第二部分 UGT1A1基因野生型和Q239X突变型在cos-7细胞中的表达及功能研究
    1. 材料和方法
    2. 实验结果
    3. 讨论
    4. 结论
    参考文献
全文总结
综述 UGT1A1基因多态性与疾病相关性的研究进展
    参考文献
英文缩略词表
致谢
攻读学位期间发表的学术论文



本文编号：3203543