沉默c-fos基因对PM 2.5 染毒人支气管上皮细胞癌基因和凋亡相关基因表达的影响

发布时间：2021-06-08 01:00

　　目的:探讨沉默c-fos基因对PM_2.5染毒人支气管上皮细胞（HBE细胞）癌基因和凋亡相关基因表达的影响。方法:采用RNA干扰技术,根据GenBank提供的c-fos mRNA序列,设计合成shRNA干扰序列,将重组慢病毒载体转染HBE细胞,构建c-fos基因沉默细胞株。采用实时荧光定量PCR（qPCR）和Western blot对c-fos基因沉默效果进行鉴定。以HBE细胞、c-fos基因沉默细胞为实验对象,用浓度为50μg/mL的PM_2.5混悬液染毒24 h,同时设立阴性对照组,qPCR和Western blot分别检测部分癌基因c-myc、k-ras、c-fos、p53和凋亡相关基因Caspase-3、Caspase-8在mRNA及蛋白质表达水平的变化。结果:转染c-fos-shRNA慢病毒的HBE细胞中,经qPCR和Western blot检测发现,与对照组HBE细胞相比,c-fos m RNA表达水平下降70.1%,c-fos蛋白表达水平下降53.7%。PM_2.5染毒HBE细胞后,与未染毒的对照组比较,c-my... 

【文章来源】：癌变·畸变·突变. 2020,32(04)

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【部分图文】：

PM2.5染毒HBE细胞和c-fos基因沉默细胞后凋亡相关基因mRNA表达水平变化

Western blot检测c-fos蛋白表达水平结果见图2,与HBE正常细胞比较，转染干扰序列shRNAc细胞中c-fos蛋白相对表达水平差异无统计学意义(P>0.05)，c-fos基因沉默细胞中c-fos蛋白表达降低53.7%，差异有统计学意义(P<0.01)，表明c-fos基因沉默细胞株构建成功。图2 Western blot检测c-fos基因沉默细胞中c-fos蛋白表达水平

图1 qPCR检测c-fos基因沉默细胞中c-fos m RNA表达水平2.3 HBE细胞c-fos基因沉默前后PM2.5对癌基因及凋亡相关基因mRNA表达水平的影响

【参考文献】：
期刊论文
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[2]FGF-1对TGF-β1诱导的H9c2心肌细胞凋亡与Caspase-3,Caspase-8和Caspase-9表达的关系研究[J]. 李厚忠,郭金兴,张胜强,张羽飞.  中国现代医学杂志. 2018(07)
[3]支气管肺泡灌洗液DNA异倍体、p53基因检测在肺癌诊断中的应用研究[J]. 李家树,李春华,吴兴萍,宋甲富,张趁英.  肿瘤学杂志. 2015(07)



本文编号：3217549