食源性单核细胞增生型李斯特菌lmoF2365 0 032基因克隆及序列分析

发布时间：2021-06-08 21:51

　　对食源性单核细胞增生李斯特菌LM5567的lmoF2365₀032基因进行克隆和序列分析,利用PCR方法对lmoF2365₀032基因进行扩增,将扩增产物连接到pMD19-T载体上,筛选阳性菌株进行测序比对分析。结果显示,扩增获得的lmoF2365₀032基因序列长度为811 bp,克隆得到lmoF2365₀032基因的阳性转化子;生物信息学分析表明,lmoF 2365₀032蛋白属于跨膜蛋白,无信号肽序列;二级结构中无规则卷曲和延伸链结构占比较大,分别是37.86%和36.89%;序列比对结果表明,LM5567菌株lmoF2365₀032基因的核苷酸序列与02-6680菌株（4b,奶酪,加拿大）、10-0811菌株（1/2b,螃蟹,加拿大）的相似性均为99.7%;与10-0809菌株（4b,粪便,加拿大）、81-055菌株（4b,脑脊髓液,加拿大）、02-1103菌株、02-1792菌株（4b,奶酪,加拿大）、81-0861菌株（4b,卷心菜,加拿大）的... 

【文章来源】：江苏农业科学. 2020,48(16)

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 材料
        1.1.1 菌株和质粒
        1.1.2 主要试剂和仪器
        1.1.3 引物设计与合成
    1.2 方法
        1.2.1 菌株培养和基因组DNA的提取
        1.2.2 PCR检测
        1.2.3 PCR扩增产物的检测
        1.2.4 目的基因克隆及测序
        1.2.5 生物信息学分析
2 结果与分析
    2.1 lmoF2365_0032基因PCR扩增和克隆测序
    2.2 lmoF2365_0032编码蛋白的理化性质分析
    2.3 lmoF2365_0032编码蛋白信号肽和跨膜区分析
    2.4 lmoF2365_0032基因核苷酸序列同源性比对
    2.5 lmoF2365_0032基因序列编码氨基酸同源性比对
    2.6 lmoF2365_0032蛋白的二级和三级结构预测
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]进口俄罗斯食品中食源性微生物的检测分析[J]. 马微,潘秀霞,李苏龙,何浩,魏书娟,穆晓东,吕重,程丽.  食品安全质量检测学报. 2016(12)
[2]2013年梅州市餐饮业自制食品微生物污染检测与分析[J]. 丘增萍,谢强,况伟,赖纪年,朱茂玉.  中国药事. 2015(04)
[3]单核细胞增生性李斯特菌srtA基因的克隆与原核表达[J]. 吴学林,曹树珠,马勋.  石河子大学学报(自然科学版). 2015(02)
[4]Arc基因表达及甲基化与幼龄鼠和成年鼠空间记忆形成的相关性[J]. 叶保国,滕士勇,李新白,宋雪松,麻海春,朱庆三.  中国生物制品学杂志. 2013(03)
[5]单增李斯特菌增殖的影响因素研究[J]. 张春琳,张家国.  食品研究与开发. 2011(07)



本文编号：3219269