紫花苜蓿MsHB7基因的克隆及功能分析
发布时间：2021-06-09 00:18
植物的生长和发育受到各种非生物胁迫因素的影响。干旱和盐胁迫下,植物的生长和生理功能会被影响。转录因子在植物对环境的适应方面起着重要的作用。其中,HD-Zip第I类亚家族主要参与植物对非生物胁迫的响应。本研究旨在从紫花苜蓿中克隆得到HD-Zip第I类亚家族基因MsHB7基因,并将其转入拟南芥和紫花苜蓿中,研究该基因的功能。主要研究结果如下:1.MsHB7基因的克隆与生物信息学分析通过同源克隆,获得了紫花苜蓿MsHB7基因,该基因编码245个氨基酸,并含有两个保守结构域:同源异形域和亮氨酸拉链。系统进化树分析表明MsHB7为HD-Zip I亚类转录因子。2.MsHB7基因的组织特异性表达对紫花苜蓿根、茎、叶和花组织中MsHB7基因的表达水平进行了检测,发现MsHB7基因在不同组织中均有表达,且在花中的表达量最高。3.MsHB7的亚细胞定位通过构建MsHB7基因的亚细胞定位载体,使MsHB7基因与GFP蛋白在烟草细胞中融合表达,结果表明MsHB7蛋白定位在细胞核上。4.MsHB7基因对拟南芥和紫花苜蓿的遗传转化构建植物超表达载体pBI121-MsHB7,分别转化拟南芥和紫花苜蓿,成功获得转基...
【文章来源】：哈尔滨师范大学黑龙江省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HD-ZipI–IV亚类家族的结构特征[9]
哈尔滨师范大学硕士学位论文1260℃1min95℃15s其中最后一步为扩增产物的溶解曲线分析。定量结果采用2-ΔΔCT法（Livak）计算基因的相对表达量。2.5实验结果2.5.1MsHB7基因的克隆根据NCBI已知的蒺藜苜蓿中相关基因的序列设计引物，以反转录得到的cDNA为模板，对目的基因克隆之后，进行琼脂糖凝胶电泳检测，获得一条750bp左右的条带。与目标序列大小一致（图2-1）。M：DNAmarker图2-1MsHB7基因的PCR产物Fig.2-1PCRpruductofMsHB7gene2.5.2生物信息学分析对获得的MsHB7基因序列进行生物信息学分析，该基因包含一个738bp的开放阅读框，可编码245个氨基酸，蛋白质的分子量为29.02kDa，理论等电点5.33，包含两个结构域：同源异形域（41-91）和亮氨酸拉链结构域（93-131）。MsHB7基因核苷酸序列如下：
哈尔滨师范大学硕士学位论文14I-IV分别为拟南芥中四类亚家族HD-Zip蛋白I-IVarefoursubfamilyofHD-ZipproteinsinArabidopsisthaliana图2-2MsHB7与拟南芥中一些同源异型域-亮氨酸拉链蛋白进化树分析Fig.2-2PhylogenetictreeanalysisofMsHB7andsomehomeodomain-leucinezipperproteinfromArabidopsisthaliana用于多重序列比对的HD-ZipI类亚家族蛋白信息如下：蒺藜苜蓿MedicagotruncatulaATHB-12XP_003602321.2；鹰嘴豆CicerarietinumATHB-12-likeXP_004502719.1；小豆VignaangularisATHB-12-likeXP_017420762.1；陆地棉GossypiumhirsutumATHB-12-likeXP_016695089.1；核桃JuglansregiaATHB-12-likeXP_018842791.1；毛果杨PopulustrichocarpaATHB-7XP_002320889.1；巨桉EucalyptusgrandisATHB-12-likeXP_018729630.1；桃树PrunuspersicaATHB-12XP_007218213.1；麻疯树JatrophacurcasATHB-12XP_012088620.1；苹果MalusdomesticaATHB-12-likeNP_001281285.1；辣椒CapsicumannuumATHB-12-likeXP_016538252.1；烟草NicotianatabacumATHB-12-likeNP_001311821.1；橙CitrussinensisATHB-7XP_006491341.1；大豆GlycinemaxATHB-12XP_003548207.2；番茄SolanumlycopersicumATHB-12XP_004230017.1；拟南芥ArabidopsisthalianaATHB-12NP_191748.1。
【参考文献】：
期刊论文
[1]叶片相对含水量的活体测定[J]. 张慧,汪沛洪. 植物生理学通讯. 1991(03)
硕士论文
[1]湿地植物耐旱能力与机制的研究[D]. 徐星.华中师范大学 2016
[2]紫花苜蓿盐诱导HD-Zip类转录因子MsHB2的克隆及功能分析[D]. 李明娜.南京农业大学 2014
本文编号：3219512
【文章来源】：哈尔滨师范大学黑龙江省
【文章页数】：63 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
HD-ZipI–IV亚类家族的结构特征[9]
哈尔滨师范大学硕士学位论文1260℃1min95℃15s其中最后一步为扩增产物的溶解曲线分析。定量结果采用2-ΔΔCT法（Livak）计算基因的相对表达量。2.5实验结果2.5.1MsHB7基因的克隆根据NCBI已知的蒺藜苜蓿中相关基因的序列设计引物，以反转录得到的cDNA为模板，对目的基因克隆之后，进行琼脂糖凝胶电泳检测，获得一条750bp左右的条带。与目标序列大小一致（图2-1）。M：DNAmarker图2-1MsHB7基因的PCR产物Fig.2-1PCRpruductofMsHB7gene2.5.2生物信息学分析对获得的MsHB7基因序列进行生物信息学分析，该基因包含一个738bp的开放阅读框，可编码245个氨基酸，蛋白质的分子量为29.02kDa，理论等电点5.33，包含两个结构域：同源异形域（41-91）和亮氨酸拉链结构域（93-131）。MsHB7基因核苷酸序列如下：
哈尔滨师范大学硕士学位论文14I-IV分别为拟南芥中四类亚家族HD-Zip蛋白I-IVarefoursubfamilyofHD-ZipproteinsinArabidopsisthaliana图2-2MsHB7与拟南芥中一些同源异型域-亮氨酸拉链蛋白进化树分析Fig.2-2PhylogenetictreeanalysisofMsHB7andsomehomeodomain-leucinezipperproteinfromArabidopsisthaliana用于多重序列比对的HD-ZipI类亚家族蛋白信息如下：蒺藜苜蓿MedicagotruncatulaATHB-12XP_003602321.2；鹰嘴豆CicerarietinumATHB-12-likeXP_004502719.1；小豆VignaangularisATHB-12-likeXP_017420762.1；陆地棉GossypiumhirsutumATHB-12-likeXP_016695089.1；核桃JuglansregiaATHB-12-likeXP_018842791.1；毛果杨PopulustrichocarpaATHB-7XP_002320889.1；巨桉EucalyptusgrandisATHB-12-likeXP_018729630.1；桃树PrunuspersicaATHB-12XP_007218213.1；麻疯树JatrophacurcasATHB-12XP_012088620.1；苹果MalusdomesticaATHB-12-likeNP_001281285.1；辣椒CapsicumannuumATHB-12-likeXP_016538252.1；烟草NicotianatabacumATHB-12-likeNP_001311821.1；橙CitrussinensisATHB-7XP_006491341.1；大豆GlycinemaxATHB-12XP_003548207.2；番茄SolanumlycopersicumATHB-12XP_004230017.1；拟南芥ArabidopsisthalianaATHB-12NP_191748.1。
【参考文献】：
期刊论文
[1]叶片相对含水量的活体测定[J]. 张慧,汪沛洪. 植物生理学通讯. 1991(03)
硕士论文
[1]湿地植物耐旱能力与机制的研究[D]. 徐星.华中师范大学 2016
[2]紫花苜蓿盐诱导HD-Zip类转录因子MsHB2的克隆及功能分析[D]. 李明娜.南京农业大学 2014
本文编号：3219512
本文链接：https://www.wllwen.com/kejilunwen/jiyingongcheng/3219512.html
最近更新
教材专著
