褐飞虱丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Nlserpin4的克隆及表达模式分析

发布时间：2021-06-09 01:42

　　【目的】克隆和分析褐飞虱Nilaparvata lugens丝氨酸蛋白酶抑制剂基因Nlserpin4,并探明其时空表达谱和病原真菌诱导表达模式。【方法】基于褐飞虱转录组和全基因组序列数据,利用PCR技术克隆得到褐飞虱Nlserpin4基因的全长cDNA序列;利用生物信息学手段分析其核苷酸和蛋白质序列特征;通过qRT-PCR技术检测其在褐飞虱不同发育时期（卵、1-5龄若虫和初羽化雌雄成虫）和5龄若虫不同组织（脂肪体、肠道、血淋巴和剩余虫体）中的时空表达谱,以及金龟子绿僵菌Metarhizium anisopliae注射感染褐飞虱5龄若虫不同时间后的诱导表达模式。【结果】克隆获得褐飞虱Nlserpin4基因全长cDNA序列（GenBank登录号:MN822802）,其开放阅读框长1 227 bp,编码408个氨基酸,蛋白的相对分子质量和等电点分别为45.91 kD和6.23。氨基酸序列分析表明,Nlserpin4蛋白无糖基化位点,N端包含一段由23个氨基酸残基组成的信号肽,C端具有serpin蛋白家族典型的RCL区,且含有能被靶标蛋白酶识别的活性裂解位点。系统发育分析表明,Nlserpin... 

【文章来源】：昆虫学报. 2020,63(07)北大核心CSCD

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【部分图文】：

褐飞虱Nlserpin4基因cDNA序列及其编码氨基酸序列

图1 褐飞虱Nlserpin4基因cDNA序列及其编码氨基酸序列图3 基于氨基酸序列采用邻接法构建的褐飞虱和其他昆虫serpin蛋白系统发育树(1 000次重复)

图2 褐飞虱Nlserpin4与其他昆虫同源蛋白质序列RCL区多序列比对图4 Nlserpin4在褐飞虱不同发育时期(A)和5龄若虫不同组织(B)中的表达模式

【参考文献】：
期刊论文
[1]稻飞虱灾变和治理研究透析[J]. 吕进,祝增荣,娄永根,程家安.  应用昆虫学报. 2013(03)
[2]共生菌在褐飞虱防治中的应用[J]. 陈列忠,俞晓平,陈建明,吕仲贤,郑许松,张珏锋.  农药. 2006(11)

硕士论文
[1]Serpin2和βGRP3在亚洲玉米螟免疫识别和防卫过程中的功能研究[D]. 赵雅.扬州大学 2018
[2]烟粉虱丝氨酸蛋白酶抑制剂Serpin的克隆、原核表达及表达分析[D]. 冯佳颖.华南农业大学 2016



本文编号：3219652