羊栖菜聚酮合酶的基因克
发布时间：2021-06-10 21:31
褐藻多酚是羊栖菜中含量较高的一类具有生物活性的天然产物,从结构角度分析,尽管结构种类多样,但其仅由间苯三酚单体聚合而成。对长囊水云的研究表明,聚酮合酶基因是该单体生物合成途径中的关键基因。同源搜索结果发现,羊栖菜中存在一个聚酮合酶基因,与前者具有极高同源性;除此之外,羊栖菜中还存在着另外两个聚酮合酶基因,但目前对它们的功能还不甚了解。本文从羊栖菜聚酮合酶的基因克隆、异源表达和酶学性质分析三方面进行探究:羊栖菜中存在3个聚酮合酶基因,分别是SfPKS1、SfPKS2和SfPKS3,克隆这三个基因后在大肠杆菌中进行了异源表达,并对纯化后的重组蛋白进行了酶学性质的研究。同源性分析羊栖菜的三个PKS基因表明:SfPKS2和SfPKS3具有较高的相似度,且与宾得马尾藻SbPKS和水云EsiPKS1具有较高同源性;同时,SfPKS1、2和3的底物识别位点和催化活性位点的氨基酸序列高度保守。SfPKS的催化底物测试了两种类型的CoA—直链烷基CoA和芳香类CoA,结果显示SfPKS能以芳香类CoA作为反应底物合成相应的产物。对羊栖菜PKS的研究有助于进一步挖掘羊栖菜中其他聚酮类化合物,为羊栖菜相关天...
【文章来源】：温州大学浙江省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
多酚结构式Fig.1-1Congstucionofpolyphenols
图1-2 PKS的结构域Fig.1-2 Domain orgnization of PKSsA: type I PKS (modular type)，B: type I PKS (iterative type)，C: type II PKS，D: type IS结构域包括酰基转移酶（Acyltransferase，AT），酮缩酶（Ketos酮还原酶（Ketoreductase，KR），脱水酶（Dehydratase，DH）noylreductase，ER），酰基转移蛋白（Acy Carrier Protein，Ahioseterase，TE）[110]。AT和KS结构域负责聚酮类化合物链的化反应过程中，每一次延伸单元的叠加都会有AT的参与[111]，构域，KS结构中的乙酰基结合区域决定I型和II型PKS催化产、DH、ER结构域主要负责产物链的修饰作用，KR修饰多肽羰 则催化多肽脱水，在α和β碳间形成双键，ER结构域还原α,β烯，TE结构域在多肽合成的最后催化脱水或环化，ACP是一个120 AA），负责产物在酶激活位点间的传递，I型和II型的P。图1-3绘制了 PKS 结构域标准催化链的延伸和修饰[110]。
图1-2 PKS的结构域Fig.1-2 Domain orgnization of PKSsA: type I PKS (modular type)，B: type I PKS (iterative type)，C: type II PKS，D: type III PKSPKS结构域包括酰基转移酶（Acyltransferase，AT），酮缩酶（Ketosynthase，KS），酮还原酶（Ketoreductase，KR），脱水酶（Dehydratase，DH），烯酰还原酶（Enoylreductase，ER），酰基转移蛋白（Acy Carrier Protein，ACP），硫酯酶（Thioseterase，TE）[110]。AT和KS结构域负责聚酮类化合物链的延长，在I型PKS催化反应过程中，每一次延伸单元的叠加都会有AT的参与[111]，KS是PKS的必须结构域，KS结构中的乙酰基结合区域决定I型和II型PKS催化产物的长度[110]。KR、DH、ER结构域主要负责产物链的修饰作用，KR修饰多肽羰基的还原[112]，DH 则催化多肽脱水，在α和β碳间形成双键，ER结构域还原α,β烯酰基成饱和α，β键，TE结构域在多肽合成的最后催化脱水或环化，ACP是一个小分子蛋白（60～120 AA），负责产物在酶激活位点间的传递，I型和II型的PKS都含有ACP[113]。图1-3绘制了 PKS 结构域标准催化链的延伸和修饰[110]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]羊栖菜蛋白质提取及功能性研究[J]. 庞庭才,胡上英,范和良,黄海,林丽丹. 中国酿造. 2017(09)
[2]海洋褐藻羊栖菜（Sargassum fusiforme）中马尾藻甾醇、岩藻甾醇的分类纯化及抗菌、抗氧化活性研究[J]. 孙瑜,丁国芳,徐银峰. 海洋与湖沼. 2017(03)
[3]羊栖菜非多糖成分及其药理活性研究进展[J]. 秦华夏,廖志勇. 安徽农业科学. 2017(08)
[4]响应面法优化酶辅助提取羊栖菜多酚工艺及其抗氧化性研究[J]. 刘楠,曾帅,孙永,牟伟丽,周德庆. 食品安全质量检测学报. 2017(01)
[5]羊栖菜多糖的提取和抗氧化活性研究[J]. 何丹,张旭,肖保衡,吴晓辉,吴明江. 海洋科学. 2016(12)
[6]正交试验法优化酶辅助提取羊栖菜多酚工艺[J]. 曾帅,周德庆,刘楠. 南方农业学报. 2016(09)
[7]对香豆酰辅酶A酯生物合成及纯化方法[J]. 潘琛,任百光,盖颖. 北京林业大学学报. 2016(03)
[8]羊栖菜成分以及药理研究进展[J]. 王百龙,孙稚颖,周凤琴. 山东中医杂志. 2015(09)
[9]羊栖菜多酚提取工艺优化[J]. 何传辉,何传波,魏好程,王姣,熊何健. 食品安全质量检测学报. 2015(08)
[10]羊栖菜活性多糖的提取与生物活性研究进展[J]. 丁浩淼,谢作亮,谢琰,汪财生,顾筱筱,钱国英. 药物生物技术. 2015(04)
硕士论文
[1]羊栖菜多糖的提取分离、生物活性及结构鉴定[D]. 刘洪超.上海海洋大学 2017
[2]羊栖菜多糖的化学修饰及生物活性研究[D]. 陈冰洁.浙江工商大学 2017
[3]羊栖菜中萜类成分的提取与纯化方法研究[D]. 徐忠明.浙江工商大学 2015
[4]不同品系羊栖菜形态和营养成分的初步分析[D]. 崔海峰.东北林业大学 2013
[5]羊栖菜多糖的提取和纯化研究[D]. 周峙苗.浙江工业大学 2004
[6]马尾藻多糖与多酚的提取及其活性研究[D]. 周贞兵.广西大学 2002
本文编号：3223156
【文章来源】：温州大学浙江省
【文章页数】：72 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
多酚结构式Fig.1-1Congstucionofpolyphenols
图1-2 PKS的结构域Fig.1-2 Domain orgnization of PKSsA: type I PKS (modular type)，B: type I PKS (iterative type)，C: type II PKS，D: type IS结构域包括酰基转移酶（Acyltransferase，AT），酮缩酶（Ketos酮还原酶（Ketoreductase，KR），脱水酶（Dehydratase，DH）noylreductase，ER），酰基转移蛋白（Acy Carrier Protein，Ahioseterase，TE）[110]。AT和KS结构域负责聚酮类化合物链的化反应过程中，每一次延伸单元的叠加都会有AT的参与[111]，构域，KS结构中的乙酰基结合区域决定I型和II型PKS催化产、DH、ER结构域主要负责产物链的修饰作用，KR修饰多肽羰 则催化多肽脱水，在α和β碳间形成双键，ER结构域还原α,β烯，TE结构域在多肽合成的最后催化脱水或环化，ACP是一个120 AA），负责产物在酶激活位点间的传递，I型和II型的P。图1-3绘制了 PKS 结构域标准催化链的延伸和修饰[110]。
图1-2 PKS的结构域Fig.1-2 Domain orgnization of PKSsA: type I PKS (modular type)，B: type I PKS (iterative type)，C: type II PKS，D: type III PKSPKS结构域包括酰基转移酶（Acyltransferase，AT），酮缩酶（Ketosynthase，KS），酮还原酶（Ketoreductase，KR），脱水酶（Dehydratase，DH），烯酰还原酶（Enoylreductase，ER），酰基转移蛋白（Acy Carrier Protein，ACP），硫酯酶（Thioseterase，TE）[110]。AT和KS结构域负责聚酮类化合物链的延长，在I型PKS催化反应过程中，每一次延伸单元的叠加都会有AT的参与[111]，KS是PKS的必须结构域，KS结构中的乙酰基结合区域决定I型和II型PKS催化产物的长度[110]。KR、DH、ER结构域主要负责产物链的修饰作用，KR修饰多肽羰基的还原[112]，DH 则催化多肽脱水，在α和β碳间形成双键，ER结构域还原α,β烯酰基成饱和α，β键，TE结构域在多肽合成的最后催化脱水或环化，ACP是一个小分子蛋白（60～120 AA），负责产物在酶激活位点间的传递，I型和II型的PKS都含有ACP[113]。图1-3绘制了 PKS 结构域标准催化链的延伸和修饰[110]。
【参考文献】：
期刊论文
[1]羊栖菜蛋白质提取及功能性研究[J]. 庞庭才,胡上英,范和良,黄海,林丽丹. 中国酿造. 2017(09)
[2]海洋褐藻羊栖菜（Sargassum fusiforme）中马尾藻甾醇、岩藻甾醇的分类纯化及抗菌、抗氧化活性研究[J]. 孙瑜,丁国芳,徐银峰. 海洋与湖沼. 2017(03)
[3]羊栖菜非多糖成分及其药理活性研究进展[J]. 秦华夏,廖志勇. 安徽农业科学. 2017(08)
[4]响应面法优化酶辅助提取羊栖菜多酚工艺及其抗氧化性研究[J]. 刘楠,曾帅,孙永,牟伟丽,周德庆. 食品安全质量检测学报. 2017(01)
[5]羊栖菜多糖的提取和抗氧化活性研究[J]. 何丹,张旭,肖保衡,吴晓辉,吴明江. 海洋科学. 2016(12)
[6]正交试验法优化酶辅助提取羊栖菜多酚工艺[J]. 曾帅,周德庆,刘楠. 南方农业学报. 2016(09)
[7]对香豆酰辅酶A酯生物合成及纯化方法[J]. 潘琛,任百光,盖颖. 北京林业大学学报. 2016(03)
[8]羊栖菜成分以及药理研究进展[J]. 王百龙,孙稚颖,周凤琴. 山东中医杂志. 2015(09)
[9]羊栖菜多酚提取工艺优化[J]. 何传辉,何传波,魏好程,王姣,熊何健. 食品安全质量检测学报. 2015(08)
[10]羊栖菜活性多糖的提取与生物活性研究进展[J]. 丁浩淼,谢作亮,谢琰,汪财生,顾筱筱,钱国英. 药物生物技术. 2015(04)
硕士论文
[1]羊栖菜多糖的提取分离、生物活性及结构鉴定[D]. 刘洪超.上海海洋大学 2017
[2]羊栖菜多糖的化学修饰及生物活性研究[D]. 陈冰洁.浙江工商大学 2017
[3]羊栖菜中萜类成分的提取与纯化方法研究[D]. 徐忠明.浙江工商大学 2015
[4]不同品系羊栖菜形态和营养成分的初步分析[D]. 崔海峰.东北林业大学 2013
[5]羊栖菜多糖的提取和纯化研究[D]. 周峙苗.浙江工业大学 2004
[6]马尾藻多糖与多酚的提取及其活性研究[D]. 周贞兵.广西大学 2002
本文编号：3223156
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