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小立碗藓胼胝质合酶6基因功能的初步研究

发布时间:2021-06-11 22:51
  小立碗藓(Physcomitrella patens)隶属葫芦藓目(Funariales)葫芦藓科(Funariaceae)小立碗藓属,属于非维管束植物,是早期登陆的植物代表。小立碗藓被灰霉菌侵染后在细胞壁形成可抵御病原菌的乳突结构。胼胝质是形成乳突的主要成分,由胼胝质合酶合成。在小立碗藓基因组中,共有12个基因编码胼胝质合酶。通过小立碗藓转录组测序和实时荧光定量PCR得到胼胝质合酶PpCalS6基因在接种灰霉菌后的第二天植株中表达量显著增加。说明胼胝质可能参与了小立碗藓对灰霉菌的防御反应,其它研究报道,胼胝质也可能参与植物的生长发育。本研究拟过反向遗传学方法研究PpCalS6的功能,从而证实胼胝质在小立碗藓中是否参与抵抗病原菌以及影响植株的长发育。本研究所得结果如下:1、本研究成功的构建了PpCalS6敲除植株。首先构建了PpCalS6-PTN182敲除载体,然后利用同源重组技术,通过PEG介导的遗传转化方法,将PpCalS6-PTN182转入到小立碗藓原生质体中。通过G418两次不同浓度筛选(25μg/mL,50μg/mL)及分子水平验证,成功的获得了PpCalS6敲除植株(PpC... 

【文章来源】:贵州师范大学贵州省

【文章页数】:64 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

小立碗藓胼胝质合酶6基因功能的初步研究


小立碗藓生活史(SchaeferandZrd,2001)

胼胝质,史志,化学结构式


图 1 小立碗藓生活史 (Schaefer and Zr d, 2001)Fig.1 The life cycle of P.patens (Schaefer and Zr d, 2001)1.1 胼胝质胼胝质(callose),即 β-1,3-葡聚糖(图 2),由胼胝质合酶(亦称为类葡聚催化合成,广泛存在于多细胞绿藻和高等植物中(Scherp, et al., 2001)。利用blue 染色后,可使其在荧光显微镜下呈现出黄绿色荧光(Schuette, et al., 2009)。示:一方面植物中胼胝质的快速合成或降解参与了植物的生长代谢(Chen a2009),另一方面胼胝质的沉积还可作为一种物理屏障限制或阻止病原体,从而原体的入侵(Allison and S, 1974)。

示意图,小立碗藓,示意图,原丝体


14图 3 PpCalS6-PTN182 敲除载体构建示意图Fig.3 PpCalS6-PTN182 knockout vector construction schematic diagram2.2.2 小立碗藓原生质体制备条件的优化及活性检测2.2.2.1 小立碗藓原丝体的制备


本文编号:3225415

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