蒺藜苜蓿重金属转运P型ATP酶基因HMA7在共生结瘤过程中的功能研究

发布时间：2021-06-13 18:49

　　重金属转运P型ATP酶HMAs（heavy metal P1B-ATPases）已被证实参与植物体内的重金属运输,HMA7（也称RAN1）可将铜离子传递给乙烯受体,乙烯在铜离子的存在下与受体结合,从而启动乙烯通路的表达。相关研究表明,乙烯对豆科植物共生结瘤起抑制作用,但HMA7在其中的功能尚不为人知。为了探究重金属转运P型ATP酶基因HMA7对共生结瘤的影响,通过对全基因组已测序的模式豆科植物蒺藜苜蓿的基因组进行筛查,得到两个HMA7类候选基因MTR₂g035840和MTR₄g094695,在对其表达模式分析的基础上,对MTR₂g035840进行亚细胞和组织定位,并对两个目的基因进行RNA干扰及对MTR₂g035840进行过表达研究,以分析其在根瘤形成中的作用。1、两个目的基因的表达模式分析共生条件下检测两个目的基因的表达显示,MTR₂g035840和MTR₄g094695在共生后期表达量上调,推测其在根瘤成熟晚期发挥作用。组织表达分析表明,MTR

【文章来源】：西北农林科技大学陕西省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：硕士

【部分图文】：

植物体内乙烯信号转导过程示意图(张存立和郭红卫2012)

Forward Primer (10um) 0.6Reverse Primer (10um) 0.6Template DNA VariableNuclease-free H2O To 20ul程采用两步法，程序为 95℃,10min，一个循环，95℃，15s，6溶解曲线从 60℃到 90℃，0.5℃/s。所有的实验样品设置三个机的显著性分析采用标准误进行分析，相对定量（2-△△CT）的方法析，表达量的数据使用蒺藜苜蓿持家基因 Actin 的表达量进行标分析蓿 HMA7 基因的筛选与序列分析 HMA7 基因(At5G44790)为参考，比对蒺藜苜蓿基因组数据库他植物来源的 HMA7 氨基酸序列，构建系统发育树，结果如图以看出，MTR_2g035840 和 MTR_4g094695 与其他物种的 HM测这两个基因属于蒺藜苜蓿 HMA7 家族。

图 2-2 总 RNA 电泳图谱Fig.2-2 The electrophoretogram of total RNA与不接菌条件下的表达情况基因 Actin 作为内参基因，取接菌后 5，10，菌的根作为对照，提取总 RNA 进行 qRT-PC后 5d 时无论接种根还是未接种根中的表达 28d 的接种根中显著上调。MTR_4g094695 的接菌后 5d 表达下调，接菌后 28d 明显上调。

【参考文献】：
期刊论文
[1]植物-根瘤菌共生固氮[J]. 王二涛.  中国基础科学. 2016(01)
[2]Classical Ethylene Insensitive Mutants of the Arabidopsis EIN2 Orthologue Lack the Expected‘hypernodulation’ Response in Lotus japonicus[J]. Pick Kuen Chan,Bandana Biswas,Peter M. Gresshoff.  Journal of Integrative Plant Biology. 2013(04)
[3]乙烯信号转导通路研究[J]. 张存立,郭红卫.  自然杂志. 2012(04)



本文编号：3228116