白介素-22基因多态性与慢性乙型肝病相关性研究

发布时间：2017-04-24 18:20

  本文关键词：白介素-22基因多态性与慢性乙型肝病相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:乙型肝炎病毒感染仍然是导致中国目前慢性终末期肝病以及肝硬化相关性的肝衰竭和肝细胞癌所致死亡的最主要的因素,目前,乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)感染相关的慢性肝病发生发展过程中仍有多重未知因素有待探讨。白介素-22(Interleukin-22,IL-22)是近年发现的细胞因子,主要由淋巴细胞分泌的细胞因子。研究证实,该细胞因子在包括肝脏在内的多种器官和组织的病理过程中发挥抗炎、抗氧化应激、促进细胞再生和组织修复等保护性作用,近年与其相关的研究倍受关注。IL-22与急性肝损伤的关系较为明确,即为保护性角色;而与慢性肝损伤的关系较为模糊,尚无定论,这其中包括了与慢性乙型肝病的缺少相当数量的研究,也无明确的结论产生。有研究报道,IL-22在慢性乙型肝炎等某些病理状态下具有促进肿瘤增殖的作用,但研究数量稀少,可以说,IL-22在慢性乙型肝病中的功能和机制尚不清楚。基于慢性乙型肝病在中国慢性肝病构成中所扮演的重要角色,本研究通过检测IL-22基因上rs1026788、rs2227472、rs2227491、rs2227485、rs1179249、rs2046068、rs2227473和rs7314777共八个位点的基因多态性,探讨了中国东北部吉林地区人群IL-22基因多态性与慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化以及在肝硬化基础上发生的肝细胞癌之间的相关性。方法:本研究选取吉林地区的慢性乙型肝病患者649例,其中包括慢性乙型肝炎组(CHB组)103例、肝硬化组(LC组)264例、肝细胞癌组(HCC组)282例。利用外周血血液样本提取基因组DNA,应用Sequenom技术进行IL-22基因型的检测。采用SPSS17.0统计软件进行研究对象一般情况分析,应用拟和优度χ2检验对各SNP位点进行Hardy-Weinburg平衡检测。应用χ2检验对各SNP基因型和等位基因在各组中分布频率进行检验,计算OR和95%CI,从而对各位点SNP基因多态性和慢性乙型肝炎、乙型肝炎肝硬化、肝细胞癌的发生发展进行相关性分析。结果:1.CHB组、LC组、HCC组在性别和年龄组成上的差异无统计学意义(P0.05),说明各组研究对象均具有可比性。IL-22基因rs1026788、rs1179249、rs2046068、rs2227472、rs2227473、rs2227485和rs2227491基因型在各病例组中的频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05),rs7314777基因型在各病例组中的频率分布不符合Hardy-Weinberg平衡定律(P0.05),由于本试验以疾病组为参照对象,所以该位点也符合要求。2.IL-22 rs1026788,rs222747,rs2227491,rs2227473及rs7314777位点均有TT、TC、CC三种基因型;rs2046068位点有CC、AC、AA三种基因型,rs2227485位点有GG、AG、AA三种基因型,rs1179249位点有GG、GT、TT三种基因型。经χ2检验,结果显示上述各位点的基因型频率在CHB组、LC组、HCC三组中分布差异均无统计学意义(P0.05)。位点rs1179249等位基因型G/T在三组之间的频率分布差异有统计学意义(P=0.044);位点rs2227472等位基因型T/C在三组之间的频率分布差异也有统计学意义(P=0.049),但由于基因型的频率在CHB组、LC组、HCC组之间分布无统计学差异,因此,考虑位点rs1179249和rs2227472基因多态性与慢性乙型肝病进展无明显相关性。以上结果提示:位点rs1179249,rs2227472,rs1026788,rs2046068,rs2227473,rs2227485,rs2227491和rs7314777单个基因多态性可能与慢性乙型性肝病的发展可能无显著相关性。3.CHB组与LC组相比,有114种单倍体基因多态性在两组之间的分布差异有统计学意义(P0.05),P值在0.006-0.009之间单倍体21种,在0.01-0.019之间单倍体86种,在0.02-0.048之间单倍体6种,P值的均值为0.0129,标准差为0.0068;其中与疾病相关性最强的单倍体为rs2227473rs2227491,P=0.006。LC组与HCC组相比,95种单倍体在两组间的分布差异有统计学意义(P0.05),其中P值在0.024-0.03之间单倍体18种,在0.031-0.04之间单倍体43种,在0.041-0.05之间单倍体34种,P值的均数为0.0375,标准差为0.0073;其中,与疾病相关性最的单倍体为rs2046068rs2227491rs2227473rs7314777,P=0.024。由以上结果:IL-22单倍体基因多态性与慢性乙型肝病的进展有显著相关性。其中,与LC进展为HCC的相关性比较,单倍体基因多态性与CHB进展为HCC的相关性更强(前者P值均值为0.0375,后者P值均值为0.0129)。与CHB vs LC、LC vs HCC相关性最强的单倍体分别为rs2227473rs2227491,rs2046068rs2227491rs2227473rs7314777,后者是在前者基础上进一步联合新的突变位点形成的新的单倍体,与本研究中所有肝癌均为肝硬化基础上发生相一致,也进一步验证了rs2227473rs2227491这一单倍型与乙型肝炎肝硬化的发生发展密切相关。CHB组与HCC组相比,无单倍体与慢性乙型肝病进展有显著相关性(所有P值均0.05)。4.携带突变型单倍体A-G基因型的个体发生肝硬化的风险性是携带野生型A-A基因型个体的0.598倍,后者可能是肝硬化的危险因素。5.按吸烟、饮酒状况将研究对象分层,分析各位点基因型在CHB vs LC,LC vs HCC,CHB vs HCC间的频率分布。饮酒组位点rs2227485,rs2227491在LC vs HCC间的频率分布有意义;不饮酒组rs1179249基因在CHB vs LC间的频率分布有意义;无吸烟组rs1179249基因在CHB vs LC间、rs1026788,rs2227485,rs2227491基因在LC vs HCC间频率分布有意义(所有P值均0.05)。6.应用多因素非条件logistic回归检测IL-22基因与环境(饮酒状况)交互作用对慢性乙型肝病发展的影响,两两比较结果显示IL-22位点rsrs2227485,rs2227491,rs1026788,rs1179249基因多态性与环境因素(吸烟、饮酒状况)未见交互作用(P0.05)。提示各组人群吸烟、饮酒状况可能不与IL-22基因产生交互作用而影响慢性乙型肝病的发展。结论:1.IL-22位点rs1026788,rs1179249,rs2046068,rs2227472,rs2227473,rs2227485,rs2227491,rs7314777单个位点基因多态性可能与吉林地区人口慢性乙型肝病的进展无显著相关性。2.IL-22同时存在多个位点基因多态性的单倍型可能与吉林地区人口慢性乙型肝病的发生发展相关;与肝硬化发展肝细胞癌相关性相比较而言,多位点单倍型基因多态性与CHB发展为LC的相关性更为显著,可能是乙型肝炎肝硬化发生发展的重要影响因素,与慢性乙型肝病中,炎症的发展密切相关。3.IL-22单倍体rs2227491rs2227473基因多态性是慢性乙型肝病疾病进程中的重要影响因素,A-A基因型可能为肝硬化的危险因素。4.IL-22基因多态性不与环境因素(饮酒状况和吸烟状况)产生交互作用而影响慢性乙型肝病的发生发展。
【关键词】：IL-22 单核苷酸基因多态性 单倍型 慢性乙型肝炎 肝硬化 肝癌
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R512.62
【目录】：

• 中文摘要4-8
• Abstract8-14
• 中英文缩略词对照表14-15
• 第1章 引言15-16
• 第2章 文献综述16-26
• 2.1 IL-22 的研究概述16-18
• 2.2 IL-22 与肝脏疾病的关系18-25
• 2.3 研究展望及存在的问题25-26
• 第3章 材料和方法26-32
• 3.1 资料和仪器26-27
• 3.1.1 研究对象26
• 3.1.2 诊断标准26-27
• 3.2 主要试剂27
• 3.3 主要仪器27-28
• 3.4 实验方法28-31
• 3.4.1 相关遗传学基本概念28
• 3.4.2 留取标本28
• 3.4.3 人类基因组DNA提取28-29
• 3.4.4 DNA含量及纯度的检测29
• 3.4.5 IL-22 基因的SNP选取29
• 3.4.6 引物设计29-30
• 3.4.7 基因分型30-31
• 3.5 统计学处理31-32
• 第4章 结果32-48
• 4.1 研究对象一般情况32
• 4.2 提取DNA结果32-33
• 4.3 IL-22 SNPs基因分型结果33-34
• 4.4 Hardy-Weinberg平衡检验结果34-35
• 4.5 IL-22 SNPs等位基因与基因型频率分布35-41
• 4.5.1 IL-22 rs1026788与慢性乙型肝病发展的关联35-36
• 4.5.2 IL-22 rs1179249与慢性乙型肝病发展的关联36-37
• 4.5.3 IL-22 rs2046068与慢性乙型肝病进展的关联37-38
• 4.5.4 IL-22 rs2227472与慢性乙型肝病进展的关联38
• 4.5.5 IL-22 rs2227485与慢性乙型肝病进展的关联38-39
• 4.5.6 IL-22 rs2227491与慢性乙型肝病进展的关联39-40
• 4.5.7 IL-22 rs2227473与慢性乙型肝病进展的关联40
• 4.5.8 IL-22 rs7314777与慢性乙型肝病进展的关联40-41
• 4.6 IL-22 基因rs1026788、rs1179249、rs2046068、rs2227473、rs2227485、rs2227491、rs7314777单倍体分析41-44
• 4.7 IL-22 基因多态性与慢性乙型肝病关系的分层分析44-46
• 4.8 IL-22 基因环境交互与慢性乙型肝病发展的关联46-48
• 第5章 讨论48-52
• 第6章 结论52-53
• 参考文献53-60
• 附表60-68
• 作者攻读学位期间发表的学术论文68-69
• 致谢69

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 魏阳;史昌河;闫杰;;欧洲肝脏学会《HCV感染治疗指南(2014年)》简介[J];中华临床医师杂志(电子版);2014年13期

  本文关键词：白介素-22基因多态性与慢性乙型肝病相关性研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：324742