人前列腺癌中已糖激酶-2基因对辅助性T细胞1和辅助性T细胞2（TH1,TH2）的影响

发布时间：2021-06-29 06:33

　　目的:探讨在人前列腺癌PC3细胞系中高表达的己糖激酶-2基因（HK2基因）对与PC3细胞系共培养体系里的辅助性T细胞1和辅助性T细胞2（TH1/TH2）的影响。方法:通过sh RNA构建慢病毒感染PC3细胞系产生HK2基因敲低的PC3细胞系的稳转株（sh-HK2）,同时使用无义序列构建慢病毒感染PC3细胞系获得阴性对照细胞（NC）,q PCR与Western blot验证敲低结果。培养前列腺癌细胞（NC和sh-HK2）48 h后分离癌细胞获得上清液,提取健康人外周血单个核细胞（PBMCs）,TH1实验组（sh-HK2组）:PBMCs在TH1诱导条件下使用培养过稳转株的上清液共培养48h,TH1阴性对照组（NC组）:PBMCs在TH1诱导条件下使用培养过阴性对照细胞的上清液共培养48h。TH2实验组（sh-HK2组）,TH2阴性对照组（NC组）诱导条件变更为TH2诱导条件,其他不变。48h后分光光度仪检测各共培养体系中乳酸水平。然后提取各组中PBMCs使用植物血凝素-M（PHA-M）另外培养24 h,Elisa法检测TH1诱导条件下各组中PBMCs的IFN-γ和TH2诱导条件下各组PBM... 

【文章来源】：安徽医科大学安徽省

【文章页数】：44 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

实时荧光定量PCR测定HK2基因mRNA表达Figure1DetectionofHK2mRNAexpressionbyreal-timequantitativePCR

安徽医科大学研究生学位论文12sh-RNA干扰HK2基因后，HK2蛋白表达降低图2WB测定HK2蛋白表达Figure2WBdeterminationofHK2proteinexpressionNC组：阴性对照组PC3细胞；sh-RNA组：HK2基因敲低实验组PC3细胞；NCgroup：NegativecontrolgroupPC3cellline；sh-HK2group：HK2geneknockdownPC3cellline3.3TH1培养体系中乳酸含量图3TH1共培养体系中乳酸含量Figure3Lacticacidcontentinco-culturesystemofTH1

安徽医科大学研究生学位论文12sh-RNA干扰HK2基因后，HK2蛋白表达降低图2WB测定HK2蛋白表达Figure2WBdeterminationofHK2proteinexpressionNC组：阴性对照组PC3细胞；sh-RNA组：HK2基因敲低实验组PC3细胞；NCgroup：NegativecontrolgroupPC3cellline；sh-HK2group：HK2geneknockdownPC3cellline3.3TH1培养体系中乳酸含量图3TH1共培养体系中乳酸含量Figure3Lacticacidcontentinco-culturesystemofTH1

【参考文献】：
期刊论文
[1]HK2基因在前列腺癌中的表达及其对前列腺癌细胞恶性表型的影响[J]. 陶陶,沈洲,项平,黄涛,陈恕求,宣强,肖峻.  临床与实验病理学杂志. 2017(02)
[2]恶性肿瘤患者外周血调节性T细胞及Th1、Th2细胞的检测和临床意义[J]. 张瑞萍,徐冰心,王社论,郑成中,董青,翟树森,周学慧,高云阁.  中国临床医学. 2012(06)



本文编号：3255937