芥蓝CRISPR/Cas9基因编辑体系的建立

发布时间：2021-07-09 07:25

　　芥蓝（Brassica oleracea var.alboglabra）属十字花科芸薹属蔬菜,其花薹和嫩叶中维生素C、类胡萝卜素、芥子油苷和多酚等营养物质含量丰富。ζ–胡萝卜素脱氢酶（ζ-carotene desaturase,ZDS）和八氢番茄红素脱氢酶（Phytoene desaturase,PDS）是植物类胡萝卜素生物合成途径中重要的限速酶,ZDS和PDS基因分别被沉默后,转基因植株均会表现出明显的白化表型,因此这两个基因常作为CRISPR/Cas9基因编辑、VIGS等体系建立的报告靶基因。在CRISPR/Cas9基因编辑体系中,利用原生质体瞬转化技术筛选优良的CRISPR靶位点是一种高效精确的方法。我们前期研究发现,芥蓝中ZDS基因有一个成员,属单基因;而PDS基因有两个成员,属多基因。因此,本研究以芥蓝为试验材料,以BaZDS与BaPDSs基因为靶基因,首次建立了CRISPR/Cas9基因编辑技术在芥蓝中的原生质体瞬时转化体系、单基因与多基因编辑的稳定遗传体系。本研究的结果为芥蓝等芸薹属植物上利用CRISPR/Cas9基因编辑技术研究基因功能及新品种选育提供了理论基础和技术支... 

【文章来源】：四川农业大学四川省 211工程院校

【文章页数】：59 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

CRISPR位点结构

CRISPR／Cas9系统作用机制[53]

BaZDS基因靶位点及CRISPR/Cas9载体结构图

【参考文献】：
期刊论文
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[2]沙冬青子叶原生质体瞬时表达体系的建立及其AmDREB1蛋白的亚细胞定位[J]. 楠迪娜,薛敏,唐宽刚,任美艳,王茅雁.  植物科学学报. 2018(04)
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[8]TALEN-Mediated Homologous Recombination Produces Site-Directed DNA Base Change and Herbicide-Resistant Rice[J]. Ting Li,Bo Liu,Chih Ying Chen,Bing Yang.  Journal of Genetics and Genomics. 2016(05)
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[10]应用CRISPR/Cas9技术在杨树中高效敲除多个靶基因[J]. 刘婷婷,范迪,冉玲玉,姜渊忠,刘瑞,罗克明.  遗传. 2015(10)

硕士论文
[1]利用CRISPR/Cas9技术构建草莓抗镶脉病毒植株体系的研究[D]. 江雷雨.四川农业大学 2016



本文编号：3273307