Bmi-1基因表达对K562细胞CPT化疗药物敏感性的影响及其机制

发布时间：2021-07-12 23:10

　　目的:探究Bmi-1基因表达对K562细胞CPT化疗敏感性的影响,并初步探讨其凋亡机制。方法:1、采用瞬时转染方法将pGenesil-2-Bmi-1 1 siRNA、p-MSCV-Bmi-1及其空白质粒分别转染到K562细胞中,并采用RT-PCR及Western blot的方法分别检测Bmi-1RNA和蛋白的表达情况。2、MTT实验检测1-4天不同浓度化疗药物CPT对K562细胞的增殖抑制作用,找出最适作用时间和浓度。3、MTT实验观察1-5天Bmi-1表达的改变对K562细胞CPT化疗敏感性的影响。4、采用免疫荧光实验检测细胞内γ-H2AX核聚焦点数来观察细胞DSBs的程度。5、采用流式细胞术检测细胞凋亡来观察Bmi-1基因表达对CPT诱导的K562细胞凋亡的影响。6、采用JC-1线粒体膜电位检测实验来观察细胞线粒体膜电位的变化。7、进一步采用Western blot检测线粒体凋亡途径主要的凋亡蛋白Cytochrome C、Caspase-3、Bax、Bcl-2的表达。结果:1、转染pGenesil-2-Bmi-1 1 siRNA与空白对照相比Bmi-1基因表达降低,转染p-MSCV... 

【文章来源】：大连医科大学辽宁省

【文章页数】：54 页

【学位级别】：硕士

【文章目录】：
摘要
abstract
前言
材料与方法
    1.实验材料
    2.实验所需试剂的配置
    3.实验所用主要仪器
    4.实验方法
结果
    1.pGenesil-2-Bmi-11 siRNA和p-MSCV-Bmi-1对K562细胞Bmi-1表达的改变
    2.CPT对 K562 细胞的增殖抑制作用
    3.Bmi-1基因表达在K562细胞对CPT化疗敏感性中的作用
    4.Bmi-1基因表达在CPT诱导K562细胞DSBs中的作用
    5.Bmi-1基因表达在CPT诱导K562细胞凋亡中的作用
    6.Bmi-1基因表达影响CPT诱导的K562细胞线粒体膜电位的改变.
    7.Bmi-1基因表达影响CPT诱导的K562细胞线粒体凋亡途径相关蛋白的表达
讨论
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢



本文编号：3280833