非酒精性脂肪性肝炎大鼠TLR4基因及其甲基化水平的相关性研究

发布时间：2021-07-15 16:59

　　目的观察非酒精性脂肪性肝炎（NASH）大鼠肝脏中Toll样受体4（TLR4）基因的表达及其甲基化水平的变化,并探讨两者在NASH发病中的相关性。方法将20只大鼠采用随机数字表法分为正常组与模型组,每组10只。正常组与模型组大鼠分别饲喂普通饲料和高脂高糖饲料,于24周后处死。测量大鼠体质量及肝质量,并取各组大鼠血清及肝脏组织,于低温保存。通过病理染色观察肝细胞的形态变化、脂肪变性及炎性细胞浸润程度。采用酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、三酰甘油（TG）及总胆固醇（TC）水平;采用免疫组织化学染色法检测肝脏CD68蛋白的表达;采用蛋白免疫印迹法检测肝脏TLR4蛋白的表达;实时荧光定量PCR检测肝脏TLR4基因mRNA的表达;亚硫酸氢测序PCR（BSP）检测肝脏TLR4基因甲基化水平。结果与正常组相比,模型组肝细胞体积增大,出现大量脂肪空泡,炎性细胞浸润明显;肝指数升高,血清中ALT、AST、TC及TG明显升高（P<0.01）;CD68蛋白的表达含量明显升高;TLR4蛋白、m RNA表达明显升高（P<0.01）;甲基化水平... 

【文章来源】：天津医药. 2020,48(07)北大核心

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

BSP扩增引物及TLR4基因片段中CpG位点

肉眼观察，正常组大鼠肝脏颜色偏深红色，肝脏大小、形态如常，包膜光滑清晰，肝缘角较锐；实验24周末模型组大鼠肝脏颜色淡黄，肝脏偏大，形态饱满，肝缘角变钝，见图2。显微镜下观察HE染色的肝脏切片可发现，正常组肝细胞结构完整，呈放射状排列。与正常组相比，模型组大鼠肝脏组织结构不明显，肝细胞内出现大量脂滴，且肝脏内炎性细胞浸润明显，见图3。图3 正常组与模型组HE染色（×100)

正常组与模型组HE染色（×100)

【参考文献】：
期刊论文
[1]逍遥散对非酒精性脂肪性肝炎肝郁脾虚证大鼠TLR-4/TRIF信号转导通路的影响[J]. 刘杨,李明磊,贾飞,李若瑜,关伟,刘晋芳,苗宇船.  中国实验方剂学杂志. 2018(17)
[2]Toll-like receptors in pathophysiology of liver diseases[J]. Safak Kiziltas.  World Journal of Hepatology. 2016(32)
[3]世界胃肠病学会全球指南:非酒精性脂肪性肝病及非酒精性脂肪性肝炎[J]. 朱鹏,徐宗,王宇明.  临床肝胆病杂志. 2014(09)
[4]2型糖尿病脂肪肝与脂代谢、胰岛素抵抗的关系[J]. 宋淑萍.  天津医药. 2006(06)

硕士论文
[1]基于TLR4/TRIF信号通路探讨逍遥散治疗NASH肝郁脾虚证的机制[D]. 张冉冉.山西中医药大学 2019



本文编号：3286108