拟南芥CtBP/BARs增强子的筛选与基因克隆

发布时间：2021-07-16 13:02

　　细胞是构成器官形态的基本单位,植物器官的形成需要经过细胞增殖、组织分化等过程。拟南芥花瓣具有调节授粉和光反射等功能,在生殖器官中扮演着重要的角色,然而相对根、下胚轴和子叶来说,花瓣形态建成的机制研究极为少见。拟南芥ANGUSTIFOLIA（AN）是与哺乳动物中C-末端结合蛋白/蛋白转运抑制剂A-ADP核糖基化底物（CtBP/BARs）同源的蛋白,同时AN的工作机制目前尚不清晰。拟南芥中AN的突变体an-2,具有子叶变厚、变窄,毛状体分枝减少,根螺旋生长等性状。但至今,对于AN怎么去调控花瓣的形态建成尚不清楚。本研究利用甲基磺酸乙酯（EMS）对的种子进行诱变,筛选获得突变体ocean1/an-2（OCEAN1,Organ Control Enhancer of an-2）,并分离得到单突变体ocean1。相对野生型Col-0,ocean1子叶变窄且有卷曲,花瓣变得狭长。ocean1/an-2进一步增强了an-2的表型,子叶和花瓣都变得更加窄长、肥厚。细胞水平上,Col-0和ocean1子叶表皮铺板细胞之间具有明显的锯齿嵌合结构,an-2子叶表皮铺板细胞边缘锯齿状明显减少。相对单突变体oc... 

【文章来源】：福建农林大学福建省

【文章页数】：78 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

拟南芥花瓣[2]

图 1-5 图位克隆过程示意图[76]Figure 1-5 Schematic of the map-based cloning process[76].1.4 本课题的研究内容和拟解决的关键问题1.4.1 研究内容（1） ANGUSTIFOLIA 功能缺失突变体的化学诱变（甲基磺酸乙酯 EMS 诱变）；（2） 花瓣发育增强子筛选及表型分析；（3） 候选增强子基因的图位克隆；（4） 在分子生物学水平上确定突变位点的真实性并构建载体进行互补实验。1.4.2 拟解决的关键问题

三 实验结果与分析析图。分析发现野生型 Col-0 子叶较为圆润；an-2 突变体子叶变厚，较为狭长；ocean1/an-2 增强了 an-2 的表型，子叶长宽相对于 an-2 都具有显著差异，变得更长更窄；而去除掉 an-2 背景的单突变体 ocean1，子叶长度和宽度都有所恢复，但是子叶末端微微向下卷曲。其中野生型 Col-0 子叶各向同性生长。突变体 an-2、ocean1、ocean1/an-2 子叶的生长存在各向异性。根据以上表型，推测 OCEAN1和 AN 可能具有共同调节子叶形态的作用。


本文编号：3287063