E1A基因修饰的间充质干细胞介导的CD3-HAC阻断PD-1/PD-L1对转移性乳腺癌的免疫治疗研究

发布时间：2021-07-21 11:25

　　背景和目的:乳腺癌是影响全世界女性健康的头号杀手,据全国肿瘤登记中心统计,2015年全国乳腺癌发病病例约26.9万例,死亡病例约7.0万例。三阴性乳腺癌（triple negative breast cancer,TNBC）是其中恶性程度最高的一个分型,预后极差,且极易发生脑部和内脏的转移。全球范围内每年有超过50万人死于乳腺癌转移,其中位生存期仅有2到3年。临床上对于TNBC的治疗手段以手术和化疗为主,但对于已发生转移的患者手术切除明显是不现实的,化疗药物也很难起到很好的效果,并常常伴有副作用。随着免疫治疗的迅速发展,CAR-T、TCR-T、肿瘤疫苗、双功能抗体、免疫检查点抑制剂等多种治疗方案应用于恶性肿瘤的治疗中,并取得了喜人的临床效果。其中又以PD-1/PD-L1通路阻断剂在实体瘤的疗效最为突出。对TNBC的肿瘤微环境研究表明,TNBC是一种高异质性和突变负荷的肿瘤类型,且有着较多的淋巴细胞浸润和PD-L1表达。这样的免疫微环境对于PD-1/PD-L1抑制剂发挥作用是非常有益的。随着临床适应症的扩展和患者范围的扩大,PD-1抗体的不良反应事件逐渐增多,且对部分患者临床响应率偏低也... 

【文章来源】：北京协和医学院北京市 211工程院校 985工程院校

【文章页数】：98 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．双特异性融合蛋白ＣＤ３－ＨＡＣ的结构??－－

验室之前的研宄结果也证明了这一现象［３０，?４１］。??综上，我们设计了一套由ＭＳＣｓ运载的局部释放免疫治疗药物的靶向治疗体系??（图２），结合三阴性乳腺癌的病理特征，实现对转移性肿瘤的靶向治疗。结合双??１１??

消化收集各组细胞，铺至９６孔培养板内（ｌｘｌＯ４个／部贴于孔底，吸弃培养基，以效靶比１０：１的比例加００?ｐｌ／？Ｌ），２５０?ｇ离心４?ｍｉｎ以保证效靶细胞充分３７°Ｃ、５％?Ｃ０２培养箱中培养１０小时。在获取上清解液至靶细胞最大释放孔及培养基体积对照孔中。?４?ｍｉｎ〇按照Ｃｙｔ〇Ｔ〇Ｘ９６非放射性细胞毒检测试剂盒说明测，方法同５．２。??平行设置另一反应板，使效靶细胞共培养２４小时后，共培养上清中ＩＬ－２、ＴＮＦ－ａ、ＩＦＮ－丫的水平，方法同的ＨＵＭＳＣ?（ＭＳＣ．Ｅ１Ａ）可以包装、释放腺病毒颗的慢病毒表达载体是以ｐＣＤＨ?１－ＭＳＣ－ＥＦ１?－ＤｅｓＲｅｄ（ｐＬｅ插入来自Ａｄ－５基因组的Ｅ１Ａ基因构建而成。质粒由７Ｋ意图如下：??


本文编号：3294934