药材甲转录组分析及其羧酸酯酶家族基因对气调胁迫的应答

发布时间：2021-07-21 18:02

　　目的:通过气调胁迫下药材甲（Stegobium paniceum）转录组学分析,就药材甲在气调胁迫下的出现明显差异表达的功能基因进行功能研究,选择有显著响应的羧酸酯酶基因,初步探讨其对药材甲应对气调胁迫的分子机制。方法:使用Illumina Hiseq平台对10%和70%CO₂处理药材甲进行测序,利用差异基因检测方法,筛选两样本间的差异表达基因;用RT-PCR方法对差异表达显著的药材甲羧酸酯酶基因进行克隆,运用生物信息学方法对该基因及其编码蛋白进行预测和分析;利用荧光定量PCR技术（RT-qPCR）检测羧酸酯酶在药材甲低龄幼虫、高龄幼虫、蛹和成虫中的表达量,同时检测spCarEs基因在LC₁₀（30%CO₂+70%空气）、LC₃₀（70%CO₂+30%空气）两个亚致死浓度和致死中浓度LC₅₀（90%CO₂+10%空气）CO₂浓度气调胁迫前后的mRNA表达模式;以pGEX4T-1为载体构建原核表达系统进行表达,用羧... 

【文章来源】：贵州师范大学贵州省

【文章页数】：83 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

药材甲危害现状（引自Ignatowiczetal.Fig2,2011）

羧酸酯酶的结构（引自Sopopetal.2002Fig1-c）

组装流程

【参考文献】：
期刊论文
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[2]家蝇GNBP3基因克隆及感染白色念珠菌后的表达[J]. 胡亚,罗嫚,王宇,王涛,尚小丽,张迎春,修江帆,吴建伟.  环境昆虫学报. 2017(03)
[3]中药材仓储害虫及其绿色防控技术研究进展[J]. 程茂高,乔卿梅,魏志华,李先芳.  中药材. 2016(08)
[4]中华稻蝗羧酸酯酶家族基因生物信息学及组织表达特异性分析[J]. 刘娇,张建珍,李大琪,张婷婷,马恩波,张建琴.  中国农业科学. 2015(21)
[5]橘小实蝇幼虫解毒酶系基因应对高效氯氰菊酯胁迫的组织特异性表达[J]. 申光茂,王晓娜,黄勇,豆威,王进军.  中国农业科学. 2015(19)
[6]羧酸酯酶介导的小菜蛾对氟虫腈的抗性[J]. 任娜娜,谢苗,尤燕春,李建玉,陈伟军,程学敏,尤民生.  昆虫学报. 2015(03)
[7]CO2气调对药材甲的毒力及其能源物质的代谢比较[J]. 曹宇,吴先勇,卢丽娟,邓吉,李灿.  中国生物防治学报. 2015(01)
[8]羧酸酯酶及其介导昆虫抗药性的研究进展[J]. 任娜娜,谢苗,尤燕春,尤民生.  福建农林大学学报(自然科学版). 2014(04)
[9]CO2气调技术防治害虫研究进展与展望[J]. 方剑锋,王文祥,葛萃萃,李凯兵,陈小帆,林克剑,云昌均.  南方农业学报. 2014(06)
[10]橘小实蝇羧酸酯酶基因BdCAREB1的克隆及其表达模式解析[J]. 申光茂,豆威,王进军.  中国农业科学. 2014(10)

博士论文
[1]桔小实蝇消化和解毒代谢相关基因鉴定及其对药剂胁迫的应激反应[D]. 申光茂.西南大学 2013
[2]中药材储藏期主要害虫种群生态及气调毒理研究[D]. 李灿.贵州大学 2008

硕士论文
[1]印度谷螟转录组分析及Bt毒素相关基因的鉴定[D]. 薛昊.南京财经大学 2015



本文编号：3295509