湖南部分养殖场猪、鸡源粪肠球菌毒力基因、耐药性及多位点序列分型研究

发布时间：2021-07-22 12:12

　　粪肠球菌（Enterococcus fascalis）是一种广泛分布的机会致病菌,能够引起人和动物的多种疾病。近年来,在抗生素的不合理使用下,粪肠球菌的耐药现象日趋严重结合其众多毒力基因与复杂的致病机制,使得粪肠球菌感染的临床治疗愈加困难。多位点序列分型（MLST）是一种简单且具有高分辨率的分型方法,主要通过分析多个持家基因的核酸序列来完成对菌株的分型,它有一个专门的MLST数据库,可实现对不同国家、地区菌株之间的信息交流,这为研究不同来源菌株的种群结构、耐药特征及流行型别等之间的相关性奠定了一定基础。本研究对湖南部分地区养殖场猪、鸡源粪肠球菌进行分离与鉴定,并对分离株的毒力基因及耐药性进行检测,再使用MLST方法对部分多重耐药菌株进行分型,以期初步了解该地区粪肠球菌的毒力基因携带情况、耐药特征及多重耐药株的流行型别,为指导粪肠球菌感染用药提供一定依据。本次研究结果如下:共分离到81株粪肠球菌,分离率鸡源（35.8%）高于猪源（28.4%）;除esp外其余毒力基因均有检测到,且85%以上的菌株携带两种及两种以上毒力基因;分离株对红霉素、四环素以及头孢西丁严重耐药,对万古霉素普遍敏感,多... 

【文章来源】：湖南农业大学湖南省

【文章页数】：63 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

粪肠球菌可疑株在肠球菌显色培养基上的菌落特征

15肠球菌在显色培养基上为紫红色光泽菌落，见图2-1；革兰氏染色为阳性，且呈单个、成双或短链状排列，见图2-2；根据粪肠球菌革兰氏染色的结果和在肠球菌显色培养基上的结果，可对粪肠球菌进行初步判定。图2-1粪肠球菌可疑株在肠球菌显色培养基上的菌落特征Fig2-1SuspiciousEnterococcusfaecalisonChromogenicmediumofEnterococcus图2-2粪肠球菌可疑株革兰氏染色镜检图Fig2-2ThemicroscopicexaminatioofSuspiciousEnterococcusfaecalisbyGramstaining2.3.2粪肠球菌的PCR鉴定结果利用粪肠球菌特异性引物对分离到的可疑菌株进行PCR扩增及电泳，结果共有81株出现1097bp的目的条带，将部分PCR产物送去测序，测序结果在NCBI网站上进行比对，同源性达98%以上。图1-3为部分粪肠球菌分离株的PCR鉴定结果。

16图2-3粪肠球菌分离株的PCR鉴定结果Fig1-3ThePCRresultsofEnterococcusfaecalisisolates注：M为DNA分子质量标准；1为ATCC29212菌株；2为阴性对照；3-10为分离株2.3.3不同地区粪肠球菌分离情况本次试验共分离到粪肠球菌81株，其中包括猪源38株，鸡源43株，总分离率鸡源大于猪源；四个地区中，常德地区的样本分离率最高，占40.0%，浏阳及宁乡地区次之，衡阳地区最低。具体分离情况见表1-3表1-3湖南省不同地区猪、鸡源粪肠球菌分离结果Table1-3IsolationofEnterococcusfaecalisfrompigsandchickensindifferentareasofHunanProvince猪源Isolatedfrompigs鸡源Isolatedfromchickens总计Total地区Area样本数Numberofsamples分离数NumberofIsolation分离率Isolationrate/%样本数Numberofsamples分离数NumberofIsolation分离率Isolationrate/%样本数Numberofsamples分离数NumberofIsolation分离率Isolationrate/%宁乡25832.0401230.0652030.8衡阳541425.9301033.3842428.6常德20525.0301550.0502040.0浏阳351131.420630.0551730.9总计1343828.31204335.82548131.9

【参考文献】：
期刊论文
[1]2012-2014年辽宁省大连市某医院分离粪肠球菌耐药性及多位点序列分析[J]. 李岩,王晶,张桂,杨晶,金东.  疾病监测. 2018(05)
[2]新疆北疆地区猪源粪肠球菌的耐药性分析[J]. 王蒙蒙,张子荣,欧都·吾吐那生,蒲敬伟,袁立岗,齐亚银.  中国畜牧兽医. 2018(05)
[3]河南省部分地区猪和鸡源粪肠球菌的分离鉴定与耐药性分析[J]. 李金磊,董鹏,狄元冉,方忠意,高延玲,周红霞,吴志明.  动物医学进展. 2018(04)
[4]480株泌尿道感染肠球菌的分布以及耐药性分析[J]. 侯景英.  抗感染药学. 2018(01)
[5]江西省猪源粪肠球菌毒力基因及耐药性分析[J]. 黄奕雯,幸文定,陶政,王萍.  中国兽医学报. 2018(03)
[6]东北地区动物源粪肠球菌耐药性监测与分析[J]. 李延山,李欣南,韩镌竹,高铎,武凤娇.  现代畜牧兽医. 2018(02)
[7]糖尿病足患者感染病原菌及药敏分析[J]. 张慧华,张慧,方水晶,徐惠,毛磊.  中华医院感染学杂志. 2018(03)
[8]屎肠球菌和粪肠球菌多位点序列分型及耐药相关性研究[J]. 邹绍伟,王占黎,王英,牛海英,张利霞.  中国病原生物学杂志. 2018(01)
[9]2016年内蒙古包头地区10家医院肠球菌耐药性监测分析[J]. 张利霞,王翠峰,田改林,刘芳馨.  现代预防医学. 2017(24)
[10]不同动物源肠球菌耐药性及毒力基因测定与分析[J]. 陈丽颖,张留君,秦明明,陈飞,金钺,胡慧,王亚宾.  中国人兽共患病学报. 2017(11)

硕士论文
[1]江西部分地区猪源粪肠球菌耐药性及毒力基因检测与分析[D]. 幸文定.江西农业大学 2016
[2]Ⅰ类整合子介导粪肠球菌多重耐药性的研究[D]. 欧都·吾吐那生.石河子大学 2016
[3]动物源性肠球菌多位点序列分型及质粒检测[D]. 张秀方.河南农业大学 2015
[4]粪肠球菌心内膜炎抗原EfaA在大鼠心内膜炎中的作用[D]. 王侠.福建医科大学 2015



本文编号：3297132