miR-656-3p靶向ATP10A基因调控阿尔茨海默病模型细胞凋亡的分子机制
发布时间：2021-07-25 19:47
目的探究微小RNA-656-3p（miR-656-3p）对阿尔茨海默病（AD）模型细胞增殖、凋亡的影响及潜在作用机制。方法通过不同浓度淀粉样蛋白（Aβ25～35）（0、5、10、20μmol/L）作用于SH-SY5Y细胞,选取最优浓度构建AD模型细胞。荧光定量聚合酶链反应（qPCR）检测不同浓度Aβ25～35和作用时间对miR-656-3p表达量的影响,噻唑蓝（MTT）检测模型细胞的增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,观察过表达miR-656-3p或敲低腺苷三磷酸酶（ATP）10A对细胞增殖、凋亡的影响;在线软件TargetScan预测和双荧光素酶报告基因验证miR-656-3p与ATP10A的靶向关系;蛋白质印迹（Western印迹）分析过表达或敲低miR-656-3p对ATP10A蛋白表达量的影响,共转染过表达miR-656-3p和ATP10A或敲低miR-656-3p和ATP10A,观察ATP10A对miR-656-3p调控细胞增殖、凋亡的影响。结果不同浓度Aβ25～35对SH-SY5Y细胞增殖起抑制作用（P<0.05）,且具有浓度依赖性,其中10μmol/L Aβ25～35诱导...
【文章来源】：中国老年学杂志. 2020,40(23)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组细胞凋亡流式细胞检测
表3 双荧光素酶报告基因验证miR-656-3p与ATP10A的靶向关系及蛋白表达 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 ATP10A-wt ATP10A-mut ATP10A NC组 1.000±0.067 0.296±0.018 0.969±0.057 miR-656-3p组 1.000±0.081 0.998±0.0791) 0.432±0.0281) anti-NC组 1.001±0.073 3.029±0.1272) 1.000±0.062 anti-miR-656-3p组 1.003±0.068 1.000±0.056 2.629±0.1212) 1)与NC组相比,2)与anti-NC组相比,均P<0.052.4 下调ATP10A对AD模型细胞增殖、凋亡的影响
表6 下调miR-656-3p和ATP10A对阿尔茨海默病模型细胞增殖、凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 ATP10A表达量 细胞的凋亡率(%) OD490值 0 h 24 h 48 h 72 h anti-NC组 1.000±0.064 23.098±2.227 0.288±0.027 0.358±0.043 0.464±0.038 0.646±0.061 anti-miR-656-3p组 2.689±0.1161) 33.657±4.2371) 0.269±0.032 0.264±0.0271) 0.288±0.0191) 0.389±0.0431) anti-miR-656-3p+si-NC组 2.673±0.122 33.761±4.292 0.272±0.031 0.271±0.029 0.281±0.022 0.391±0.041 anti-miR-656-3p+si-ATP10A组 1.537±0.0972) 19.35±2.2012) 0.275±0.026 0.324±0.0372) 0.416±0.0342) 0.618±0.0472) 与anti-NC组相比:1)P<0.05;与anti-miR-635-3P+si-NC组相比:2)P<0.053 讨 论
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-29b在2型糖尿病和前期糖尿病患者血清中的表达及临床意义[J]. 何丽亚,吴政治,王平,夏光云. 安徽医药. 2018(07)
[2]miRNAs在心血管疾病中的作用研究进展[J]. 朱荣梅,薛竟宜,安梦楠. 医学综述. 2018(10)
[3]阿尔茨海默病及其他痴呆诊断与治疗临床转化研究进展[J]. 李彬寅,徐玮,邓钰蕾,马建芳,王刚,汤荟冬,丁健青,程琦,陈生弟. 中国现代神经疾病杂志. 2018(02)
[4]阿尔茨海默病患者血清miR-19b-3p表达与认知功能的关系[J]. 徐静,吴玉泉,许娟,戴毅,焦德敏,胡金华,陈晓娜. 中华行为医学与脑科学杂志. 2017 (11)
[5]miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达N2a/APPswe细胞凋亡率及细胞内钙离子浓度[J]. 向月,张雄,杨军,戴颂阳,李昱. 重庆医科大学学报. 2015(05)
[6]MicroRNA-153对靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响[J]. 梁春联,朱华,黄澜,许艳峰,邓巍,马春梅,刘颖,秦川. 中国比较医学杂志. 2011(08)
[7]阿尔茨海默病中mir-34a作用机制的探讨[J]. 王晓映,刘鹏,朱华,徐艳峰,马春梅,代小伟,刘颖,秦川. 中国比较医学杂志. 2009(10)
本文编号：3302658
【文章来源】：中国老年学杂志. 2020,40(23)北大核心
【文章页数】：6 页
【部分图文】：
各组细胞凋亡流式细胞检测
表3 双荧光素酶报告基因验证miR-656-3p与ATP10A的靶向关系及蛋白表达 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 ATP10A-wt ATP10A-mut ATP10A NC组 1.000±0.067 0.296±0.018 0.969±0.057 miR-656-3p组 1.000±0.081 0.998±0.0791) 0.432±0.0281) anti-NC组 1.001±0.073 3.029±0.1272) 1.000±0.062 anti-miR-656-3p组 1.003±0.068 1.000±0.056 2.629±0.1212) 1)与NC组相比,2)与anti-NC组相比,均P<0.052.4 下调ATP10A对AD模型细胞增殖、凋亡的影响
表6 下调miR-656-3p和ATP10A对阿尔茨海默病模型细胞增殖、凋亡的影响 ( x ˉ ±s,n=3) 组别 ATP10A表达量 细胞的凋亡率(%) OD490值 0 h 24 h 48 h 72 h anti-NC组 1.000±0.064 23.098±2.227 0.288±0.027 0.358±0.043 0.464±0.038 0.646±0.061 anti-miR-656-3p组 2.689±0.1161) 33.657±4.2371) 0.269±0.032 0.264±0.0271) 0.288±0.0191) 0.389±0.0431) anti-miR-656-3p+si-NC组 2.673±0.122 33.761±4.292 0.272±0.031 0.271±0.029 0.281±0.022 0.391±0.041 anti-miR-656-3p+si-ATP10A组 1.537±0.0972) 19.35±2.2012) 0.275±0.026 0.324±0.0372) 0.416±0.0342) 0.618±0.0472) 与anti-NC组相比:1)P<0.05;与anti-miR-635-3P+si-NC组相比:2)P<0.053 讨 论
【参考文献】：
期刊论文
[1]miR-29b在2型糖尿病和前期糖尿病患者血清中的表达及临床意义[J]. 何丽亚,吴政治,王平,夏光云. 安徽医药. 2018(07)
[2]miRNAs在心血管疾病中的作用研究进展[J]. 朱荣梅,薛竟宜,安梦楠. 医学综述. 2018(10)
[3]阿尔茨海默病及其他痴呆诊断与治疗临床转化研究进展[J]. 李彬寅,徐玮,邓钰蕾,马建芳,王刚,汤荟冬,丁健青,程琦,陈生弟. 中国现代神经疾病杂志. 2018(02)
[4]阿尔茨海默病患者血清miR-19b-3p表达与认知功能的关系[J]. 徐静,吴玉泉,许娟,戴毅,焦德敏,胡金华,陈晓娜. 中华行为医学与脑科学杂志. 2017 (11)
[5]miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达N2a/APPswe细胞凋亡率及细胞内钙离子浓度[J]. 向月,张雄,杨军,戴颂阳,李昱. 重庆医科大学学报. 2015(05)
[6]MicroRNA-153对靶基因下游信号分子GSK-3β表达水平及细胞抗损伤能力的影响[J]. 梁春联,朱华,黄澜,许艳峰,邓巍,马春梅,刘颖,秦川. 中国比较医学杂志. 2011(08)
[7]阿尔茨海默病中mir-34a作用机制的探讨[J]. 王晓映,刘鹏,朱华,徐艳峰,马春梅,代小伟,刘颖,秦川. 中国比较医学杂志. 2009(10)
本文编号：3302658
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