文昌鱼中Tol2转座子系统转基因技术的建立以及两个转基因品系的获得
发布时间：2021-07-26 21:31
文昌鱼具有独特的进化地位以及形态结构和基因组的简单性,因此是很好的进化发育生物学研究的模式动物。近年来,实验室连续繁育、诱导产卵、显微注射、基因敲除等技术的建立使得文昌鱼模型愈趋成熟。转基因技术是重要的基因功能研究手段,但目前尚未有转基因文昌鱼的报道。Tol2转座子系统是一个比较高效的转基因工具,它能够携带10kp以上的目的片段转座到宿主基因组中,且已有研究证明该系统在诸多脊椎动物模型中有很好的工作效率。为了在文昌鱼中建立Tol2转座子系统介导的转基因技术,本研究分别将斑马鱼（Danio rerio）的 mylz2 基因启动子和文昌鱼（Branchiostomafloriaae）的Chordin基因启动子与红色荧光蛋白（RFP）报告基因mCherry一起组装到pminiTol2质粒上构建成两个转座子供体质粒pmini-mylz2-mCherry和pmini-Chordin-mCherry。将这两个供体质粒分别与体外合成的转座酶mRNA共注射到文昌鱼（B.floridae）的未受精卵中,在受精后的胚胎中即检测到很强的RFP信号。将注射后的胚胎培育成性成熟个体（FO）并与野生型个体（WT）...
【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２?７ｂ／２元件的切除反应示意图（仿自Ｋａｗａｋａｍｉ，?Ｋｏｇａｄａ／．?１９９８Ｐ６］）??Ｆｉｇ．１－２?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｅｘｃｉｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｔｏｌ２?ｅｌｅｍｅｎｔ?ｆｒｏｍ?ｐＴｏｌ２??
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本文编号：3304394
【文章来源】：厦门大学福建省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校
【文章页数】：65 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图１－２?７ｂ／２元件的切除反应示意图（仿自Ｋａｗａｋａｍｉ，?Ｋｏｇａｄａ／．?１９９８Ｐ６］）??Ｆｉｇ．１－２?ｓｃｈｅｍａｔｉｃ?ｄｉａｇｒａｍ?ｏｆ?ｔｈｅ?ｅｘｃｉｓｉｏｎ?ｏｆ?Ｔｏｌ２?ｅｌｅｍｅｎｔ?ｆｒｏｍ?ｐＴｏｌ２??
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